2.6.11. Депрессорные вещества

Испытание проводят на кошке массой не менее 2 кг, анестезированной с использованием хлоралозы или барбитурата, что позволяет поддерживать посто­янное кровяное давление. Животное защищают от потери температуры тела и поддерживают ее таким образом, чтобы ректальная температура оставалась в физиологических пределах. В трахею вводят дыхательную трубку. В общую сон­ную артерию вводят канюлю, наполненную гепаринизированным раствором хло­рида натрия концентрацией 9 г/л, и присоединяют ее к устройству, обеспечиваю­щему постоянную регистрацию кровяного давления. В бедренную вену вводят другую канюлю, наполненную гепаринизированным раствором хлорида натрия концентрацией 9 г/л, через которую может быть введен раствор гистамина и испы­туемого образца. Определяют чувствительность животного к гистамину путем внутривенного введения через равные промежутки времени раствора гистамина R в дозах, соответствующих °,1 мкг и °,15 мкг основания гистамина на килограмм массы тела. Введение меньшей дозы повторяют не менее трех раз. Вторую и по­следующие инъекции вводят не ранее, чем через одну минуту после того, как кро­вяное давление возвращается к уровню, наблюдавшемуся непосредственно пе­ред предыдущей инъекцией. Животное используют в испытании только в случае, если получено четко регистрируемое снижение кровяного давления, являющееся постоянным для меньшей дозы, а большая доза вызывает более высокую реак­цию. Испытуемое вещество растворяют в растворе хлорида натрия концентраци­ей 9 г/л или в другом растворителе, указанном в частной статье и взятом в коли­честве, достаточном для получения предписанной концентрации. Вводят внутри­венно на килограмм массы тела 1,° мл раствора гистамина R, затем две после­довательные инъекции предписанного в частной статье количества испытуемого раствора и, наконец, 1,° мл раствора гистамина R. Вторую, третью и четвертую инъекции вводят не ранее, чем через одну минуту после того, как кровяное дав­ление возвращается к уровню, наблюдавшемуся непосредственно перед преды­дущей инъекцией. Эти серии инъекций повторяют дважды и завершают испыта­ние введением 1,5 мл раствора гистамина R на килограмм массы тела.

Если реакция на 1,5 мл раствора гистамина R на килограмм массы тела не превышает реакцию на 1,° мл того же раствора, результаты испытания признают недостоверными. Испытуемый образец не выдерживает испытание, если среднее значение реакции на его введение превышает среднее значение реакции на 1,° мл раствора гистамина R на килограмм массы тела, или если любая из доз об­разца вызвала более высокую депрессорную реакцию, чем завершающая доза раствора гистамина. Лабораторное животное не следует использовать в другом испытании на депрессорные вещества, если любая из испытанных доз вызывает более выраженную депрессорную реакцию, чем завершающая доза раствора гис-тамина, или если реакция на высокую дозу гистамина, введенную после испытуе­мой субстанции, менее среднего значения реакции на введенные ранее меньшие дозы гистамина.

# Испытание на содержание веществ гистаминоподобного действия может быть проведено также в соответствии с нижеизложенным методом.

Испытание проводят на кошках обоего пола массой не менее 2 кг, анесте­зированной с использованием хлоралозы, зооксилазина, рометара или барбиту­рата, что позволяет поддерживать постоянное кровяное давление.

Для регистрации артериального давления в отпрепарированную сонную ар­терию вставляют канюлю, заполненную раствором, предупреждающим свертыва­ние крови (насыщенный раствор натрия гидрокарбоната, 25% раствор магния сульфата, раствор гепарина, содержащий 5° ЕД в 1 мл и др.) и соединяют ее с ртутным манометром. Запись давления производят на ленте кимографа.

Испытуемые растворы вводят внутривенно. Вначале проверяют чувстви­тельность животного к гистамину. Для приготовления основного раствора гиста-мина, содержащего 1 мг гистамина-основания в 1 мл воды, около 138,1 мг (точная навеска) гистамина фосфата или около 82,8 мг (точная навеска) гистамина дигид-рохлорида растворяю в 5° мл дистиллированной воды.

Раствор хранят не более 1 месяца в склянке из темного стекла с притертой пробкой в защищенном от света месте при температуре от 4 до 1°^°С.

В качестве основного раствора гистамина можно использовать также раствор гистамина дигидрохлорида в ампулах, в 1 мл которого содержится °,6°38 мг гистамина-основания.

Из основного раствора гистамина непосредственно перед опытом путем по­следовательных разведений в воде или в растворе натрия хлорида изотоническо­го °,9% для инъекций, в зависимости от растворителя для испытуемого препара­та, указанного в соответствующей статье, готовят стандартные растворы, содер­жащие °,5 и 1 мкг/мл гистамина-основания.

Для проверки реакции животного на гистамин в вену последовательно вво­дят указанные стандартные растворы с промежутками не менее 5 минут в дозах °,1 и °,2 мкг гистамина-основания в °,2 мл на 1 кг массы. Скорость введения рас­твора °,1 мл в секунду. Животных, у которых при введении гистамина в дозе °,2 мкг на 1 кг массы артериальное давление снизится менее чем на 2° мм рт. ст., из опыта исключают.

После проверки чувствительности животного к гистамину уточняют величи­ну гипотензивной реакции посредством повторного введения стандартного рас­твора гистамина в дозе °,1 мкг (°,2 мл раствора) на 1 кг массы со скоростью °,1 мл в секунду. Введение гистамина с интервалом 5 минут повторяют несколько раз, пока при двух последовательных введениях не будет получено одинаковое снижение артериального давления, которое принимается за стандартное в дан­ных условиях опыта.

Затем с интервалом не менее 5 минут животному вводят испытуемый рас­твор лекарственного средства с той же скоростью, с которой вводили раствор гис-тамина.

Растворитель и концентрация испытуемого раствора (тест-доза) указаны в соответствующей фармакопейной статье.

Препарат считают выдержавшим испытание, если снижение артериального давления после введения тест-дозы не превышает реакции на введение °,1 мкг/кг гистамина в стандартном растворе.

При испытании в одном опыте разных лекарственных средств необходимо проводить дополнительное определение реакции животного на введение стан­дартного раствора гистамина в дозе °,1 мкг/кг. Отмеченная при этом величина ре­акции принимается за стандартную для последующего испытания препарата.

В случае значительного уменьшения величины реакции по сравнению с на­блюдаемой в начале опыта необходимо вновь проверить чувствительность жи­вотного к действию гистамина в дозе °,2 мкг/кг. Если снижение артериального давления при этом будет не менее 2° мм рт. ст., испытание препаратов продол­жают в соответствии с указанными выше требованиями.