Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
GFRB_t_1.doc
Скачиваний:
1229
Добавлен:
05.02.2016
Размер:
14.72 Mб
Скачать

2.4.21. Посторонние масла в жирных маслах методом тонкослойной хроматографии

Испытание проводят методом тонкослойной хроматографии (2.2.27) с использованием в качестве тонкого слоя кизельгура G Р. Пластинку пропитывают, поместив в камеру, содержащую смесь вазелинового масла Р и петролейного эфира Р (10:90) в таком количестве, чтобы нижний край пластинки погрузился на 5 мм ниже поверхности жидкости. Когда смесь для пропитывания поднимется не менее чем на 12 см от нижнего края пластинки, ее вынимают из камеры и дают растворителю испариться в течение 5 мин. Последующее хроматографирование проводят в том же направлении, что и пропитывание.

Приготовление смеси жирных кислот. К 2 г масла прибавляют 30 мл 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового и нагревают с обратным холодильником в течение 45 мин. Прибавляют 50 мл воды Р, оставляют до охлаждения, переносят в делительную воронку и встряхивают с тремя порциями эфира Р, по 50 мл каждая. Эфирные слои отделяют, водный слой подкисляют кислотой хлористоводородной Р и вновь встряхивают с тремя порциями эфира Р, по 50 мл каждая. Все эфирные слои объединяют и встряхивают с тремя порциями воды Р, по 10 мл каждая, отбрасывая промывные воды. Объединенные эфирные слои высушивают над натрия сульфатом безводным Р и фильтруют. Затем эфир выпаривают на водяной бане, а из остатка готовят испытуемый раствор или раствор сравнения. Жирные кислоты также можно извлечь из раствора, полученного в ходе определения неомыляемых веществ.

Испытуемый раствор. 40 мг смеси жирных кислот, полученной из испытуемого масла, растворяют в 4 мл хлороформа Р.

Раствор сравнения. 40 мг смеси жирных кислот, полученной из смеси 19 объемов кукурузного масла Р и 1 объема рапсового масла Р, растворяют в 4 мл хлороформа Р.

На линию старта хроматографической пластинки наносят по 3 мкл каждого раствора. Помещают пластинку в камеру со смесью растворителей: вода Р -кислота уксусная ледяная Р (10:90). Когда фронт растворителей пройдет 8 см от линии старта, пластинку вынимают из камеры, высушивают при температуре 110°С в течение 10 мин и оставляют до охлаждения. Затем, если нет других указаний в частной статье, пластинку помещают в закрытую плотно подогнанной крышкой хроматографическую камеру, предварительно насыщенную парами йода (на дно камеры в выпарительной чашке помещен йод Р). Через некоторое время проявляются коричневые или желтовато-коричневые пятна. Пластинку вынимают из камеры и оставляют на несколько минут. Когда коричневый фон исчезнет, пластинку опрыскивают раствором крахмала Р. Появляющиеся синие пятна могут приобретать коричневую окраску при высушивании и вновь становятся синими после опрыскивания водой Р.

На хроматограмме испытуемого раствора всегда должны обнаруживаться пятно с Rf около 0,5 (олеиновая кислота) и пятно с Rf около 0,65 (линолевая кислота), соответствующие пятнам на хроматограмме раствора сравнения. На хроматограммах некоторых масел может обнаруживаться пятно с Rf около 0,75 (линоленовая кислота). Путем сравнения пятен на хроматограмме испытуемого раствора с пятнами на хроматограмме раствора сравнения убеждаются в отсутствии на хроматограмме испытуемого раствора пятна с Rf около 0,25 (эруковая кислота).

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]