5.3. Альтернативные эффекты

5.3.1 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДА ПРОБИТ-АНАЛИЗА ПРИ СРАВНЕНИИ ИСПЫТУЕ­МОГО ПРЕПАРАТА СО СТАНДАРТНЫМ

Количественное определение вакцины против дифтерии in vitro

Выполняли количественное определение вакцины против дифтерии (предпола­гаемая активность 140 МЕ/флакон) по отношению к стандартному препарату (установ­ленная активность 132 МЕ/флакон). На основании этих данных готовили эквивалент­ные дозы и вводили случайным образом группам морских свинок. Через определенный период времени после введения, это вызывало гибель животных вследствие пораже­ния дифтерийным токсином. Подсчитывали число выживших свинок. Полученные ре­зультаты приведены в Таблице 5.3.1.-1.

Затем эти результаты переносили в первую рабочую таблицу, остальные ее столбцы заполняют в соответствии с рекомендациями, приведенными в Разделе 4.2.1. В Таблице 5.3.1.-2. приведены результаты первого цикла процедуры итерационного анализа.

Далее суммируют данные последних шести столбцов для каждого из препаратов и результаты заносят во вторую рабочую таблицу (см. Таблицу 5.3.1.-3). Остальные столбцы заполняют данными, полученными при использовании формул 4.2.1.-4. -4.2.1.-10. В результате получают значение общего углового коэффициента b, равное

1,655.

Далее значения Y первой рабочей таблицы заменяют значениями a+bx и выпол­няют второй цикл (см. Таблицу 5.3.1.-4).

Циклы повторяют до тех пор, пока разница между результатами двух последова­тельных циклов не станет достаточно маленькой. В результате получают вторую рабо­чую Таблицу 5.3.1 .-5.

Проверку линейности проводят как описано в Разделе 4.2.2. Значение с² для 4 степеней свободы равно 0,851+1,070=1,921, чему соответствует значение р=0,750, ко­торое не является статистически значимым.

Поскольку отклонение от линейности не является статистически значимым, про­верку отклонения от параллельности можно выполнить, как описано в том же разделе. Значение с² для 1 степени свободы равно

14 15²

(16,71 +17,27) - = 0,001,

5,89

чему соответствует значение p=0,974, которое также не является статистически значимым.

Исходные данные для количественного определения

Стандартный препарат (S) Установленная активность 132 МЕ/флакон

Испытуемый препарат (T) Предполагаемая активность 140 МЕ/флакон

Число зара­женных жи­вотных 12

12 12

11

Доза (МЕ/мл)

1,0 1,6 2,5 4,0

Число выжив-

ших

0

3 6

10

Доза

(МЕ/мл)

1,0

1,6 2,5

4,0

Число зара­женных жи­вотных 11

12 11

11

Число выжив-

ших

0

4

8 10

mT

Теперь натуральный логарифм отношения активностей может быть рассчитан, как описано в Разделе 4.2.3.

t

-1,721 - (-2,050)

0,137

2,401

Далее

= 1,127

C

2,401² х 5,893

V

2,401² х 5,893 -1² х1,960² 11

0 1110

18,37 ⁺ 17,96

Натуральный логарифм доверительного интервала:

0 1155 - 0,013 ±yJ0,127(0,649 +1,127 х 0,036² ) = 0,142 ± 0,288

Вычислив антилогарифм и умножив полученное значение на предполагаемую активность 40 МЕ/флакон, получим оценку активности 160,6 МЕ/флакон и 95% довери­тельный интервал от 121,0 до 215,2 МЕ/флакон.

Вторая рабочая таблица для первого цикла итерации

Первая рабочая таблица для второго цикла итерации

w

Вторая рабочая таблица после достаточного количества циклов итерации

1.0-

0.9-

0.84

s"0.7-

r°0.64 о

feO.5 о

_io.44

0.3­0.2­0.1 -0.0

5.3.2 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДА ЛОГИТ-АНАЛИЗА И ДРУГИХ АНАЛОГИЧНЫХ МЕ­ТОДОВ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРИ СРАВНЕНИИ ИСПЫТУЕ­МОГО ПРЕПАРАТА СО СТАНДАРТНЫМ ПРЕПАРАТОМ

Результаты будут описаны для случая, в котором метод логит-анализа и другие «классические» методы данного типа используют данные, предоставленные в Разделе 5.3.1. В данной конкретной ситуации приведенный материал следует рассматривать как упражнения, а не в качестве альтернативного методу пробит-анализа. Другая фор­ма кривой может быть принята только в том случае, если необходимость замены под­тверждается экспериментальными данными или теоретическими расчетами.

Количественное определение in vivo вакцины против полиомиелита, применяемой орально

Для количественного определения ЕД50 вакцины против полиомиелита было ис­следовано 10 различных разведений 50 мкл исходной вакцины на чашках Элиса по 8 повторений в каждом случае. Полученные результаты приведены в Таблице 5.3.3.-1.

Разведения (10^х мкл исходной вакцины)

Полученные результаты заносят в первую рабочую таблицу, а остальные ее столбцы заполняют как описано в Разделе 4.2.1. В Таблице 5.3.3.-2 приведены резуль­таты первого цикла процедуры итерации, описанной в данном разделе.

Вакци­на

Доза

10^-3,5 10^-4,0 10^-4,5 10^-5,0 10^-5,5 10^-6,0 10^-6,5 10^-7,0 10^-7,5 10^-8,0

T

Затем данные оставшихся шести столбцов суммируют для каждого из препара­тов и результаты заносят во вторую рабочую таблицу (см. Таблицу 5.3.3.-3). Осталь­ные столбцы заполняют данными, рассчитанными по формулам 4.2.1.-4 - 4.2.1.-10. В результате получают общий угловой коэффициент b, равный -0,295.

Далее значения Y первой рабочей таблицы заменяют на значения a+bx и вы­полняют второй цикл итерации. Циклы повторяют до тех пор, пока разница между ре­зультатами двух последовательных циклов не станет достаточно маленькой. В резуль­тате получают вторую рабочую Таблицу 5.3.3.-4.

Проверку линейности проводят как описано в Разделе 4.2.2. Значение с² для 8 степеней свободы равно 2.711, чему соответствует значение p=0,951, которое не явля­ется статистически значимым.

Теперь оценка отношения активностей может быть получена, как описано в Раз­деле 4.5.

t

mT

- (-7,931) - 0,646

-12,273

Далее

с

(-0,646)² х 55,883 (-0,646)² х 55,883 -1² х1,960²

= 1 1197

v

1

19,39

0 052

Натуральный логарифм доверительного интервала

-14,692 - (-2,420) ±^0,197 х (2,882 +1,197 х 0,009²

-12,272 ± 0 , 754

Эта оценка все еще выражена в виде натурального логарифма разведений. Для того, чтобы выразить активность в /п(ЕД₅₀)/мл, результаты преобразуют в

_л/!. , (1000S - m_t + In I.

I 50 J

Поскольку активность такого типа вакцин обычно выражают с использованием десятичного логарифма 1од1₀(ЕД₅₀)/мл, полученный результат следует разделить на In(10). В результате получим оценку активности 6.36 1од₁₀(ЕД₅₀)/мл при 95% довери­тельном интервале 6.30-6.961одю(ЕД,5о)/мл.

1 -0—1 0.9 J

£ 0.8­-О

8 0-7-

5 X

О

§0.5-о

а

£ 0.4-о

Ео.з-

о

Cl

^ф 0 ? J

со \

Cl

0.14

0.0

Рисунок 5.3.3.-1.