2.2.45. Сверхкритическая флюидная хроматография

Сверхкритическая флюидная хроматография (СФХ, SFC) - это метод хроматографического разделения, в котором подвижная фаза является флюидом, находящимся в сверхкритическом или субкритическом состоянии. Неподвижная фаза, содержащаяся в колонке, состоит либо из тонко измельчённых твёрдых частиц, таких как силикагель или пористый графит; химически модифицированная неподвижная фаза, такая же, как и в жидкостной хроматографии, или, в случае капиллярных колонок, плёнка жидкости, равномерно нанесённая на стенки колонки.

СФХ основана на механизмах адсорбции или распределения.

АППАРАТУРА

Прибор обычно состоит из охлаждённой насосной системы, инжектора, хроматографической колонки, находящейся в термостатируемой печи, детектора, регулятора давления и регистрирующего устройства (интегратор или самописец).

Насосная система.

Насосная система необходима для поддержания постоянной скорости подвижной фазы. Колебания давления должны быть сведены к минимуму, например, путём пропускания сжимаемой жидкости через устройство, подавляющее пульсацию. Насосно-компрессорная система и соединительные линии устойчивы к давлениям, создаваемым насосом.

Точная доставка подвижной фазы при постоянных либо изменяющихся по определённой программе условиях осуществляется системами, контролируемыми микропроцессором. В случае градиентного элюирования могут быть использованы насосные системы, доставляющие растворитель (растворители) из нескольких резервуаров, смешивание растворителей может быть проведено как со стороны насоса (насосов), имеющей низкое давление, так и со стороны, имеющей высокое давление.

Инжекторы

Ввод пробы может быть осуществлён непосредственно в колонку с помощью клапана.

Неподвижные фазы

Неподвижные фазы находятся в колонках, которые были описаны в главах, посвященных Жидкостной хроматографии (2.2.29) (набивные колонки) и Газовой хроматографии (2.2.28) (капиллярные колонки). Максимальный внутренний диаметр (0) капиллярной колонки равен 100 мкм.

Подвижные фазы

Обычно подвижной фазой является диоксид углерода, который может содержать полярный модификатор, такой как метанол, 2-пропанол или ацетонитрил. Состав, давление (плотность), температура и скорость используемой подвижной фазы могут быть как постоянными в течение всего хроматографического процесса (изократическое, изотермическое элюирование, элюирование при постоянной плотности), так и изменяться по определённой программе (градиентное элюирование модификатора, давления (плотности), температуры или скорости потока).

Детекторы

Наиболее часто используемыми детекторами являются спектрофотометры, работающие в ультрафиолетовой и видимой областях (UV/Vis) и пламенно-ионизационные детекторы. Кроме того, могут применяться детекторы, работа которых основана на измерении рассеяния света, ИК-спектрофотометры, катарометры или другие специальные детекторы.

МЕТОД

Исследуемый раствор (растворы) и раствор (растворы) сравнения готовят так, как описано в методике. Растворы не должны содержать твёрдых частиц.

Критерии для оценки пригодности системы были описаны в главе Хроматографические методы разделения (2.2.46). В данной главе были также приведены уровни, до которых можно регулировать параметры хроматографической системы, для того, чтобы она оставалась пригодной.