2.6.10. Гистамин

Убивают морскую свинку массой от 25° до 35° г, которая была лишена пи­щи в течение предшествовавших 24 часов. Извлекают участок периферийной тон­кой кишки длиной 2 см и опорожняют отделенную часть путем тщательной про­мывки раствором В, описанным ниже, с помощью шприца. К каждому из концов присоединяют тонкую нить и делают маленький поперечный разрез в центре фрагмента кишки. Помещают её в ванночку для органов, вместимостью от 1° до 2° мл, содержащую раствор B, поддерживаемый при постоянной температуре (от 34°С до 36°С), и пропускают через раствор смесь 95 частей кислорода и 5 частей диоксида углерода. Укрепляют одну из нитей рядом с дном ванночки для органов. Другую нить присоединяют к изотоническому миографу и регистрируют сокраще­ния органа с помощью кимографа и другим подходящим способом непрерывной регистрации. Если используется рычаг, его длина должна быть такой, чтобы дви­жение органа усиливались приблизительно в 2° раз. Натяжение кишки должно со­ставлять около 9,8 мН (1 г) и быть отрегулировано в соответствии с чувствитель­ностью органа. Промывают ванночку для органов раствором В. Выдерживают в течение 1° минут. Промывку раствором В повторяют еще 2 или 3 раза. Стимули­руют серию сокращений путем добавления измеренных объемов от °,2 до °,5 мл раствора гистамина дигидрохлорида R, имеющего концентрцию, которая вызы­вает воспроизводимые субмаксимальные реакции. Эту дозу обозначают как «вы­сокую дозу». Перед каждым добавлением гистамина ванночку для органов триж­ды промывают (предпочтительно, путем переполнения без опорожнения ванноч­ки) раствором В. Последовательные добавления следует выполнять, соблюдая равные интервалы времени, достаточные для полной релаксации между добав­лениями (около 2 минут). Добавляют равные объемы более разбавленного рас­твора гистамина дигидрохлорида R, приводящего к воспроизводимым реакциям, составляющим примерно половину от реакций, вызываемых «высокой дозой». Эту дозу обозначают как «малую дозу». Продолжают периодическое добавление «вы­соких» и «низких» доз раствора гистамина, следуя вышеуказанному, и чередуют каждое добавление с равным объемом разведения испытуемого раствора, регу­лируя степень разбавления таким образом, чтобы сокращение кишки, в случае его наличия, было меньшим, чем сокращение, вызываемое «высокой дозой» гистами-на. Определяют, является ли сокращение, в случае его наличия, воспроизводи­мым и остаются ли реакции на «высокую» и «низкую» дозы гистамина неизмен­ными. Вычисляют активность испытуемой субстанции, выраженную в ее эквива­ленте на микрограмм основания гистамина, основываясь на определенном выше разведении.

Определенное таким образом количество не должно превышать количест­во, указанное в частной статье.

Если испытуемый раствор не вызывает сокращений, готовят свежий рас­твор, добавляя количество гистамина, соответствующее максимально допустимо­му в соответствии с требованиями частной статьи, и отмечают, соответствуют ли сокращения, вызываемые препаратом с добавкой гистамина, количеству добав­ленного гистамина. Если такого соответствия не наблюдается, или сокращение, вызываемое испытуемой субстанцией, не воспроизводимо, или последующие ре­акции на «высокие» и «низкие» дозы гистамина уменьшаются, то результаты ис­пытания считают недостоверными и выполняют испытание на депрессорные ве­щества (2.6.11).

Раствор А

Натрия хлорид 16°,° г

Калия хлорид 4,° г

Кальция хлорид, безводный 2,° г

Магния хлорид, безводный 1,° г Натрия гидрофосфат додекагидрат г

Вода для инъекций R До 1°°° мл

Раствор В

Раствор А 5°,° мл

Атропина сульфат °,5 мг

Натрия гидрокарбонат 1,° г

Глюкозы моногидрат °,5 г

Вода для инъекций R До 1°°° мл

Раствор В должен быть свежеприготовленным, и его используют в течение 24 ча­сов.