2.4.24. Идентификация остаточных растворителей и их количественное определение

Методики испытаний, приведенные в этой общей статье, могут быть использованы:

1. для идентификации основной массы остаточных растворителей классов 1

и 2 в субстанциях, вспомогательных веществах и готовых лекарственных средствах, если остаточные растворители неизвестны;

2. для определения предельного содержания растворителей классов 1 и 2, если они присутствуют в субстанциях, вспомогательных веществах и готовых лекарственных средствах;

3) для количественного определения растворителей класса 2, если их предельное содержание превышает 1000 ppm (0,1%), или, если необходимо, для количественного определения растворителей класса 3.

Остаточные растворители классов 1, 2 и 3 перечислены в статье 5.4. «Остаточные количества органических растворителей».

Для приготовления испытуемых растворов ниже приведены три растворителя, а также условия введения газовых проб при парофазной газовой хроматографии. Хотя описаны две хроматографические системы, предпочтительнее использовать систему А, система В обычно используется для идентификации. Выбор методики приготовления испытуемых растворов зависит от растворимости анализируемого вещества и, в первую очередь, от класса контролируемого остаточного растворителя.

Формамид, 2-этоксиэтанол, 2-метоксиэтанол, этиленгликоль, N-метилпирролидон и сульфолан следует определать другими валидированными методиками.

Если приведенную ниже методику испытаний применяют для количественного определения остаточных растворителей в конкретном веществе, она должна быть валидирована.

МЕТОДИКА

Испытания проводят методом парофазной газовой хроматографии (2.2.28).

Пробоподготовка 1. Применяют при определении остаточных растворителей в веществах, растворимых в воде.

Исходный раствор испытуемого образца (1). 0,250 г испытуемого образца растворяют в воде Р и доводят объем раствора этим же растворителем до 25,0 мл.

Пробоподготовка 2. Применяют при определении остаточных растворителей в веществах, нерастворимых в воде.

Исходный раствор испытуемого образца (2). 0,250 г испытуемого образца растворяют в NN-диметилформамиде Р (ДМФ) и доводят объем раствора этим же растворителем до 25,0 мл.

Пробоподготовка 3. Применяют при контроле N^-диметилацетамида и/или N^-диметилформамида, если известно или допускается, что один или оба растворителя присутствуют в испытуемом образце.

Исходный раствор испытуемого образца (3). 0,250 г испытуемого образца растворяют в 1,3-диметил-2-диметил-2-имидазолидоне Р (ДМИ) и доводят объем раствора этим же растворителем до 25,0 мл.

Если ни одна из вышеприведенных методик пробоподготовки не подходит, возможно использование другого растворителя и других подходящих условий парофазного анализа.

Раствор остаточного растворителя (а). 1,0 мл ФСО раствора остаточного растворителя класса 1 доводят водой Р до 100,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят водой Р до 10,0 мл.

Раствор остаточных растворителей (b). Соответствующие количества остаточных растворителей класса 2 растворяют в диметилформамиде Р и доводят объем водой Р до 100,0 мл. Объем полученного раствора доводят водой Р до концентрации, соответствующей 1/20 значений пределов концентраций, указанных в Табл.1 или Табл.2 статьи 5.4. «Остаточные количества органических растворителей».

Раствор остаточных растворителей (с). 1,00 г растворителя или растворителей, присутствующих в испытуемом образце, растворяют в диметилсульфоксиде Р или в воде Р и доводят объем раствора водой Р до концентрации, соответствующей 1/20 значений пределов концентраций, указанных в Табл.1 или Табл.2 статьи 5.4. «Остаточные количества органических растворителей».

Холостой раствор (контроль). Готовят аналогично раствору остаточных растворителей (с), но без добавления остаточных растворителей (используют для проверки отсутствия мешающих пиков).

Испытуемый раствор. 5,0 мл исходного раствора испытуемого образца, подготовленного в соответствии с методикой пробоподготовки, и 1,0 мл холостого раствора помещают во флакон.

Раствор сравнения (а) (класс 1). 1,0 мл раствора остаточного растворителя

1. и 5,0 мл подходящего растворителя помещают во флакон.

Раствор сравнения (а₁) (класс 1). 5,0 мл исходного раствора испытуемого образца, подготовленного в соответствии с методикой пробоподготовки, и 1,0 мл раствора остаточного растворителя (а) помещают во флакон.

Раствор сравнения (b) (класс 2). 1,0 мл раствора остаточного растворителя

2. и 5,0 мл подходящего растворителя помещают во флакон.

Раствор сравнения (с). 5,0 мл исходного раствора испытуемого образца, подготовленного в соответствии с методикой пробоподготовки, и 1,0 мл раствора остаточного растворителя (с) помещают во флакон.

Раствор сравнения (d). 1,0 мл холостого раствора и 5,0 мл подходящего растворителя помещают во флакон.

Для проведения хроматографического анализа могут быть использованы следующие системы.

Флаконы плотно закрывают резиновыми пробками, покрытыми политетрафторэтиленом, и обжимают алюминиевыми колпачками. Встряхивают до получения однородного раствора.

Система А:

- колонка кварцевая капиллярная 30 м х 0,32 мм или 30 м х 0,53 мм, покрытая слоем поперечносшитого полимера с 6% полицианопропилфенилсилоксана и 94% полидиметилсилоксана толщиной 1,8 мкм или 3 мкм;

• газ-носитель: азот для хроматографии Р или гелий для хроматографии Р, с делением потока 1:5 и линейной скоростью газа-носителя около 35 см/с;

• пламенно-ионизационный детектор (для хлорсодержащих остаточных растворителей класса 1 может быть также использован масс-спектрометрический детектор или детектор электронного захвата);

• температура колонки : изотермический режим при 40^оС в течение 20 минут с последующим программированным повышением температуры со скоростью 10^оС/мин до 240^оС, затем изотермический режим при температуре 240^оС в течение 20 минут;

• температура блока ввода проб - 140 ^оС;

• температура детектора -250 ^оС.

Если возможно мешающее влияние основного вещества (матрицы), используют систему В.

Система В:

- колонка кварцевая капиллярная 30 м х 0,32 мм или 30 м х 0,53 мм, покрытая слоем макрогола 20 000 Р толщиной 0,25 мкм;

• газ-носитель: азот для хроматографии Р или гелий для хроматографии Р, с делением потока 1:5 и линейной скоростью газа-носителя около 35 см/с;

• пламенно-ионизационный детектор (для хлорсодержащих остаточных растворителей класса 1 может быть также использован масс-спектрометрический детектор или детектор электронного захвата);

• температура колонки : изотермический режим при 50^оС в течение 20 минут с последующим программированным повышением температуры со скоростью 6^оС/мин до 165^оС, затем изотермический режим при температуре 165^оС в течение 20 минут;

• температура блока ввода проб -140 ^оС;

• температура детектора -250 ^оС.

Проверка пригодности хроматографической системы А

Хроматографическая система А считается пригодной, если выполняются следующие условия:

• вводят 1 мл равновесной газовой фазы раствора сравнения (а1) и записывают хроматограмму в таких условиях, чтобы можно было измерить отношение сигнал/шум для 1,1,1-трихлорэтана; отношение сигнал/шум должно быть не менее 5. Типичная хроматограмма представлена на Рис. 2.4.24.-1;

• вводят 1 мл равновесной газовой фазы раствора сравнения (а) в колонку; пики, соответствующие остаточным растворителям класса 1 должны обнаруживаться;

• вводят 1 мл равновесной газовой фазы раствора сравнения (b) в колонку и записывают хроматограмму в таких условия, чтобы можно было определить степень разделения между пиками ацетонитрила и метиленхлорида; хроматографическая система пригодна, если полученная хроматограмма имеет вид хроматограммы, представленной на Рис. 2.4.24.-2, а степень разделения между пиками ацетонитрила и метиленхлорида - не менее 1,0.

Выполнение измерений в системе А:

• вводят 1 мл равновесной газовой фазы испытуемого раствора в колонку. Если на полученной хроматограмме не обнаруживаются пики, соответствующие пикам остаточных растворителей на хроматограммах, полученных для растворов сравнения (а) или (b), то анализируемый образец выдерживает испытания. Если какой-либо пик на полученной хроматограмме испытуемого раствора соответствует одному из пиков остаточных растворителей на хроматограммах, полученных для растворов сравнения (а) или (b), то должна быть применена система В.

Проверка пригодности хроматографической системы В

Хроматографическая система В считается пригодной, если выполняются следующие условия:

• вводят 1 мл равновесной газовой фазы раствора сравнения (а₁) в колонку и записывают хроматограмму в таких условиях, чтобы можно было замерить соотношение сигнал/шум для бензола; отношение сигнал/шум должно не менее 5 (типовая хроматограмма представлена на Рис.2.4.24.-3).

• вводят 1 мл равновесной газовой фазы раствора сравнения (а) в колонку; пики, соответствующие остаточным растворителям класса 1 должны обнаруживаться;

• вводят 1 мл равновесной газовой фазы раствора сравнения (б) в колонку и записывают хроматограмму в таких условия, чтобы можно было определить степень разделения между пиками ацетонитрила и трихлорэтилена; система пригодна, если полученная хроматограмма имеет вид хроматограмы, представленной на Рис. 2.4.24.-4, а степень разделения пиков ацетонитрила и трихлорэтилена - не менее 1,0.

Выполнение измерений в системе В

Вводят 1 мл равновесной газовой фазы испытуемого раствора в колонку. Если на полученной хроматограмме не обнаруживаются пики, соответствующие пикам остаточных растворителей на хроматограммах, полученных с растворами сравнения (а) или (б), то анализируемый образец выдерживает испытания. Если какой-либо пик на полученной хроматограмме испытуемого раствора соответствует одному из пиков остаточных растворителей на хроматограммах, полученных для растворов сравнения (а) или (b), и подтверждает соответствие, полученное при использовании системы А, то далее поступают следующим образом.

Подтверждение предела содержания остаточных растворителей класса 1 или класса 2

Вводят 1 мл равновесной газовой фазы над раствором сравнения (с) в колонку, в условиях, указанных для системы А или системы В, при этом высота пика, соответствующего устанавливаемому остаточному растворителю должна быть не менее 50% шкалы регистрирующего устройства.

Вводят 1мл равновесной газовой фазы над раствором сравнения (d) в колонку. Не должно наблюдаться никаких мешающих пиков.

1 мл равновесной газовой фазы испытуемого раствора и 1 мл газовой фазы над раствором сравнения (с) вводят в колонку не менее трех раз.

Средняя площадь пика остаточного растворителя/растворителей на хроматограмме равновесной газовой фазы над испытуемым раствором не должна быть больше половины площади пика остаточного растворителя/растворителей на хроматограмме равновесной газовой фазы раствора сравнения (с). Хроматографическая система считается пригодной, если относительное стандартное отклонение разностей площадей пиков анализируемого вещества, полученное из трех повторных парных введений равновесной газовой фазы над раствором сравнения (а) и испытуемым раствором, не превышает 15%.

Схема проведения испытаний представлена на Рис. 2.4.24.-5.

Если уровень содержания остаточного растворителя (классов 2 или 3) составляет 0,1% и более, для его количественного определения может быть использован метод стандартных добавок.

# Для контроля остаточных растворителей могут быть использованы также и другие валидированные методики.

1>л

6 5

i 5-

4­

1

3.5

U 2 4 6 И W 1+ min

Рисунок 2.4.24.-1. Типичная хроматограмма остаточных растворителей класса 1 в условиях, описанных для системы А и пробоподготовки 1. Пламенно-ионизационный детектор. 4.бензол;10.четыреххлористый углерод;14.1,2-дихлорэтан;15.1,1-дихлорэтен;52. 1,1,1-трихлорэтан.

20-

\*>-

14-

12-

10

II

_/

? I

^л¹

Т" —1——Т"

^{-| 1 1 1 1 1 1 г-"-I 1 1 1 1 1 1 1 1 1 г"—I 1—Ч 1 1 1—}

■■■■ ^ ■■ ■ £

Рисунок 2.4.24.-2. Типичная хроматограмма остаточных растворителей класса 2 в условиях, описанных для системы А и пробоподготовки 1. Пламенно-ионизационный детектор. З.ацетонитрил; 11.хлороформ; 13.циклогексан; 16а.цис-1,2-дихлорэтен;17.дихлорметан;29.гексан; ЗО.метилбутилкетон; 34.метанол; 49. пиридин; 51.толуол; 53.1,1,2-трихлорэтен; 54.орто-, мета- и пара-ксилолы; 58. хлорбензол; 61. тетралин; 62. метилциклогексан; 63. нитрометан; 64. 1,2-диметоксиэтан.

If. -

14-

ij-

10-1 -I 1

_A

₁

A '■i i

I

< i

■1.5

I - i—т—i—i—г—i—r~

I I.'.

-1 1 1 1 г^-т—т—I I

—I P 1 1^-

It

-T—г—г-~т—г—I M ni'.n

Рисунок 2.4.24.-3. Типичная хроматограмма остаточных растворителей класса 1 в условиях, описанных для системы В и пробоподготовки 1. Пламенно-ионизационный детектор. 4.бензол; 10.четыреххлористый углерод;14.1,2-дихлорэтан;15.1,1-дихлорэтен;52.1,1,1-трихлорэтан.

<.IJ.

40-

I'D

2<).

и i.

10 -I

_■1,1

ft

-1—г л

!"J J : .1 1 5 (■ 7 Я 'v ц;-п

Рисунок 2.4.24.-4. Типичная хроматограмма остаточных растворителей класса 2 в условиях, описанных для системы В и пробоподготовки 1. Пламенно-ионизационный детектор. 3. ацетонитрил; 11. хлороформ; 13. циклогексан; 16а. цис-1,2-дихлорэтилен; 17. дихлорметан; 23. 1,4-диоксан; 29. гексан; 30. метилбутилкетон; 34. метанол; 49. пиридин; 51. толуол; 53. 1,1,2-трихлорэтен; 54. орто-, мета- и пара-ксилолы; 58. хлорбензол; 61. тетралин; 62. метилциклогексан; 63. нитрометан; 64. 1,2-диметоксиэтан.

Испытуемый раствор

_I

Система А

Пики, -Соответствующие^ остаточным растворителям

?