Л.И. Степанова, в.В. Россинская, в.В. Сергеев использование полутонких срезов в судебно-гистологических исследованиях г. Самара

В настоящее время при проведении судебно-гистологических исследова-ний актуальной задачей является внедрение в экспертную практику новых информативных и малозатратных методов. Необходимость поиска новых гистологических методов обусловлена, в частности, тем, что многие вопросы судебно-медицинской танатологии требуют дальнейшего глубокого изучения.

Данные вопросы имеют не только теоретическое, но и практическое значе-ние при производстве судебно-медицинской экспертизы (исследования) тру-па особенно при сочетанной патологии. Ю.И. Пиголкин и соавт. (2000) справедливо отмечают, что при экспертизе трупов лиц, умерших от острой и хронической сердечно-сосудистой недостаточности, возникшей в результате сочетания нескольких патологических состояний и повреждений, помимо выяснения танатогенеза и установления ближайшей причины смерти, приходится решать и другие задачи. К их числу относятся диагностика основного заболевания и осложнений; выяснение роли в танатогенезе алкогольной интоксикации и механической травмы, имевшихся до травмы патологических процессов, степени влияния возраста и пола пострадавшего [3].

Представляется, что решение названных вопросов возможно в рамках комплексного подхода к изучению объекта наблюдения на разных структурных уровнях (органном, тканевом, клеточном, субклеточном). Вместе с тем в настоящее время трудно представить, что высокоинформативные гистологи-ческие методы, в частности, методы электронной микроскопии найдут широкое применение в рутинной судебно-гистологической практике. Это связано с отсутствием у большинства бюро судебно-медицинской экспертизы соответ-ствующего оборудования, штатов и квалифицированного персонала для мас-сового проведения подобных исследований. Кроме того, эксплуатация электронного микроскопа обходится достаточно дорого. В связи с этим на сегодняшний день при судебно-гистологических исследованиях применяется, как правило, окраска срезов гематоксилин-эозином с последующим изучением их с помощью светового микроскопа. Электронная микроскопия обычно применяется судебными медиками или в научной работе, или в отдельных особо сложных случаях при сочетании нескольких патологических состояний с целью глубокого изучения всех звеньев танатогенеза.. В судебно-медицинской практике это обычно сочетание (конкуренция) ишемической болезни сердца, алкогольной интоксикации, травмы. В подобных случаях важное значение имеет изучение патологических процессов в миокарде.

Необходимость достоверной оценки слабо выраженных изменений сердечной мышцы, уточнения имеющихся и разработки новых диф-ференциально-диагностических критериев этих изменений определяет поиск новых методических подходов к исследованию морфологии миокарда в подобных ситуациях.

Нами в процессе изучение сердечной мышцы людей, умерших скоро-постижно, с использованием общегистологических, гистохимических и электронно-микроскопических методов была отмечена высокая информатив-ность исследования так называемых полутонких срезов.

Срезы толщиной 0,5-2 мкм, приготовленные с блоков, залитых для электронной микроскопии, и окрашенные толуидиновым синим, традиционно используются отечественными и зарубежными учеными для уточнения расположения в блоке интересующих структур. После этого производится прицельная заточка блока и изготовление ультратонких срезов. Однако данные научной литературы [1, 2, 4] свидетельствуют о том, что полутонкие срезы, помимо толуидинового синего, хорошо окрашиваются гематоксилин-эозином, азур-эозином по Романовскому, метиленовым синим, основным фуксином, по Маллори. На таких срезах могут проводиться выявление липидов, ШИК-реакция, серебрение ретикулярных волокон и нейроэндокрин-ных клеток. Наш опыт в значительной степени подтвердил эти данные.

Мы изучали полутонкие срезы, окрашенные толуидиновым синим, гематоксилин-эозином, азур-эозином по Романовскому, проводили ШИК-реакцию. Сравнение результатов изучения материала, фиксированного в 2% растворе глютаральдегида, в 4% растворе формальдегида, приготовленном из параформальдегида, и в аналогичном растворе, приготовленном из 37% раствора формальдегида (формалина), показало хорошее качество полутонких срезов во всех случаях при условии точного соблюдения всех требований методики. Лучшие результаты окраски мы получили при предварительном удалении заливочной смолы.

Полутонкие срезы позволяли всесторонне изучить строение базальных мембран, микроциркуляторного русла, уточнить морфо-функциональное состояние ядра и характер морфологических нарушений в цитоплазме клеток. В частности, разнообразную информацию можно получить о структуре мио-фибрилл миокарда и состоянии сарколеммы.

Высокая информативность полутонких срезов, а также относительно малозатратный способ их получения и просмотра по сравнению с электронной микроскопией позволяют рекомендовать для широкого практического использования полутонких срезов при проведении судебно-гистологических исследований.