Вопросы для самоподготовки.

1. Современные требования к производству стерильных лекарственных средств.

2. Пирогены, их природа и свойства.

3. Методы определения стерильности лекарственных средств.

Литература

1. Дикий И.Л., Холупяк И.Ю., Шевелева Н.Е., Стегний М.Ю. Микробио­ло­гия. – Х.: Прапор, Издательство УкрФА, 1999. – С. 159-165.

2. Н.П.Елинов, Н.А.Заикина, И.П.Соколова. Руково­дство к лабораторным занятиям по микробиологии. – М.: Медицина, 1988. – С. 87-100.

3. Государственная Фармакопея СССР: Вып. 2. / МЗ СССР. – 11-е изд., доп.– М.: Медицина, 1990. – С. 187-193.

В соответствии с рекомендациями Международной федерации фармацевтов и Государственной фармакопеи стерильными должны быть:

• лекарственные средства для парентерального применения (инъекций, инфузий и др. способов введения);

• глазные лекарственные средства (капли, мази, пленки и др.);

• субстанции и вспомогательные вещества, используемые при получении стерильных лекарственных средств, которые не подвергаются стерилизации в процессе производства;

• лекарственные средства для введения в полость тела, где в нормальном состоянии отсутствует микрофлора.

Лекарственные препараты для парентерального введения должны подвергаться контролю не только на стерильность, но и на пирогенность, т.е. отсутствие пирогенов.

Пирогенность (от греч. pyr – огонь, genes – рождающий) – это способность некоторых веществ при парентеральном введении вызывать повышение температуры тела, что сопровождается ознобом, обильным потовыделением, головной болью, тошнотой, учащением пульса. Тяжелые лихорадочные состояния могут иметь летальный исход.

Пирогенные вещества классифицируются как экзогенные (бактериальные) и эндогенные (клеточно-тканевые). Экзогенные пирогены представляют собой продукты жизнедеятельности и распада микроорганизмов. С химической точки зрения – это сложные высокомолекулярные соединения, состоящие в основном из липополисахаридов, адсорбированных на белковом носителе. Эндогенные пирогены – это биологически-активные вещества, выделяемые при определенных условиях белками и лейкоцитами крови (лейкопирогены).

Пирогены объединены рядом общих свойств: имеют малые размеры (от 1 до 50 нм), благодаря чему легко проходят через бактериальные фильтры; водорастворимы, но практически нерастворимы в спирте и ацетоне; чувствительны к действию перекиси водорода, перманганата калия; чрезвычайно термостабильны. Стерилизация сухим воздухом при температуре 160С в течение 2 ч не гарантирует освобождение стерилизуемого объекта от пирогенов. Нагревание в автоклаве при 120С приводит к гибели микроорганизмов, но не к разрушению пирогенов. Таким образом весьма понятным становится определение: «стерильный раствор может вызвать пирогенную реакцию», и в этом его опасность. Пирогены отличаются высокой биологической активностью – при выделении всего лишь 1,5 мкт в организм человека массой 75-80 кг вызывают характерную пирогенную реакцию.

Удалить пирогены чрезвычайно сложно и поэтому важное значение имеет соблюдение условий, исключающих возможность микробной контаминации парентеральных растворов и, следовательно, предупреждение пирогенной реакции.

Стерильность лекарственных средств достигается совокупностью противомикробных мероприятий на всех этапах их изготовления, хранения и использования.

На этапе изготовления, в целях предупреждения первичной микробной контаминации, необходимо ограничить содержание микробов в сырье, обеспечить стерильность растворителей, разбавителей, асептические условия технологического процесса. В соответствии с принципами GMP (Good manufacturing practice – надлежащая производственная практика) производство стерильной продукции должно осуществляться в специальных, только для этих целей предназначенных так называемых «чистых» помещениях, в воздухе которых регламентируется строго определенное количество аэрозольных частиц и микроорганизмов. Важное значение имеет соблюдение правил личной гигиены персонала, определенных соответствующими инструкциями.

Испытание на стерильность должно проводится в асептических условиях, в боксах, желательно под вытяжкой стерильного ламинарного потока воздуха, в стерильной антистатической одежде.

Для контроля стерильности готовых лекарственных средств, а также субстанций и вспомогательных веществ, используемых при их изготовлении, используют жидкую тиогликолевую (меркаптоуксусную) среду (для выявления бактерий) и жидкую среду Сабуро (для выявления грибов). При этом используют два метода:

1) метод прямого посева

2) метод мембранной фильтрации.