Микроскопия вирусов

Как известно, вирусы не могут быть рассмотрены в свето­вом микроскопе, поэтому в световом микроскопе изучают включения или ткани, пораженные вирусом. Изменения, проис­ходящие в тканях, изучают с помощью методов и приемов гис­тологического исследования, которые рассматриваются в соот­ветствующих руководствах.

Препараты для микроскопирования элементарных телец и включений готовят из мазков и отпечат­ков органов и тканей. Подготовленные мазки немедленно фиксируют. С этой целью применяют простые и сложные фиксаторы. Среди простых чаще других употребляют метиловый спирт, смесь Никифорова (спирта и эфира поровну), ацетон. Среди сложных фиксаторов нашли применение следую­щие: 1) смесь Дюбоска-Бразиля-Буэна: пикриновой кислоты 1 г, имеющегося в продаже (40%) формалина 60 мл, спирта (80%) 150 мл и ледяной уксусной кислоты 15 мл; 2) сулемовые смеси: а) Шаудина: насыщенного раствора сулемы 2 части и абсолютного спирта 1 часть; б) Ценкера: сулемы 5 г, бихро­мата калия 2,5 г, сульфата натрия 1 г, ледяной уксусной ки­слоты 5 мл, дистиллированной воды 100 мл. Уксусную кислоту добавляют в смесь перед употреблением; в) Хелли-Макси­мова: сулемы 5 г, бихромата калия 2,5 г, имеющегося в про­даже неразведенного формалина 10 мл, 2% раствора осмиевой кислоты 10 мл, дистиллированной воды 100 мл. Формалин и ос­миевую кислоту добавляют смесь перед употреблением.

Окраска препаратов Окраска по Романовскому

Техника. Высушенные на воздухе препараты без фиксации опускают на 1-2 мин в раствор неразведенного красителя Романовского. Затем их промывают дистиллированной водой, высушивают на воздухе и микроскопируют с иммерсионной системой.

Микроскопическая картина. Элементарные тельца, окрашиваемые этим способом, имеют синий цвет на голубом фоне препарата.

Окраска по Муромцеву

Техника. Влажные мазки или отпечатки фикси­руют 1-2 ч в этиловом или метиловом спирте комнатной темпе­ратуры или 15-20 мин в спирте, подогретом до 50-70°С. После промывания дистиллированной водой красят 5-10 мин синим Мен­сона, разведенным в 40 раз.

Синий Менсона: в 10 мл кипящей воды растворяют 5-8 г химически чистой буры, добавляют 2 г метиленового синего. Окрашенный препарат, не промывая, диф­ференцируют 5-10 мин в водном растворе танина (5-10%). После приобретения препаратом голубоватого оттенка его промывают дистиллированной водой и подсушивают фильтровальной бумагой. Препарат проводят через абсолютный спирт или 50% смесь абсо­лютного спирта с ацетоном, после чего он готов для микроско­пирования.

Микроскопическая картина. В окрашенном препарате фон и цитоплазма клеток бледно-голубые, тельца Бабеша-Негри резко очерчены, фиоле­товые с розовым оттенком, ядра синие, ядрышки темно-синие, эритроциты оранжево-красные.

Окраска по Морозову

Техника. Приготовление реактивов и порядок окраски см. выше.

Микроскопическая картина. Элементарные тельца имеют вид темно-коричневых, почти черных зерен на светло-коричневом фоне.

Окраска по Селлеру

Техника. Влажный мазок или отпечаток без фик­сации 10 секунд окрашивают смесью из насыщенных растворов в мети­ловом спирте основного фуксина (3-5 мл) и метиленового си­него (15 мл), а также чистого метилового спирта (25 мл). Промывают проточной водой и сушат на воздухе; препарат готов для микроскопии.

Микроскопическая картина. Тельца Бабеша-Негри пурпурно-красные, ци­топлазма, ядра и ядрышки синие, эритроциты кирпично-красные (рис.28).