4. Результаты иммунологических исследований больныхмногоформной экссудативнойэритемой

СледующимэтапомнашихисследованийбылоизучениеэкспрессииToll-подобныхрецепторов(TLRs)намононуклеарныхлейкоцитахпериферическойкрови(МЛПК),клеткахкожииэпителиальныхклеткахсцельювыявлениянарушенийэкспрессиииопределенияролиэтихнарушенийвпатогенезеМЭЭ.ИндукциясигналовчерезTLRsобеспечиваетактивациюразличныхэффекторовврожденногоиммунитета,нарушениефункциипроводимостиданныхсигналовприводиткразвитиюцелогорядапатологическихпроцессовворганизме.Влитературевстречаютсяединичныеработыпоизучению экспрессииTLR3иTLR9убольныхМЭЭ,вкоторыхвыявленавзаимосвязьмеждуполиморфизмомвгенахэтихрецепторовитяжестью теченияМЭЭ[338,340].

СцельювыявленияособенностейэкспрессииTLRsвзависимостиоттеченияМЭЭбольныебылиранжированынагруппыподлительноститеченияичастотерецидивов(табл.26).УбольныхМЭЭвцеломпогруппеисходнонаблюдалсявысокийуровеньToll-подобныхрецепторовTLR2,3,9всывороткекрови,превышающийзначениявгруппездоровыхлиц,(p<0,05).ВходеисследованиябыливыявленынекоторыеособенностиэкспрессииTLRsвзависимостиотхарактератеченияМЭЭ.Убольныхсчастотойрецидивовдо3вгодзначенияTLR3былиниже,чемубольныхсчастотойрецидивов3иболеевгод.УбольныхМЭЭсчастотойрецидивов3иболеевгодуровниэкспрессииTLR3иTLR9превышализначенияуздоровыхлицв4разапосравнениюспоказателямиубольныхсредкимирецидивами(21,9и23).ВыявленоснижениеэкспрессииTLR2вгруппебольныхсдлительностьюМЭЭдо2-хлет.ДлительностьзаболеваниятакжевлияланаэкспрессиюTLR3иTLR9.Ихуровнибылибольшимиприменьшейдлительности(≤2лет)иприэтомсоставляли(45и38)при(15,7и11,2)уздоровых

лиц.ВдинамикепоказателейуровнейTLR2иTLR4значимыхизмененийневыявлено.TLR2иTLR4имеютбольшиепоказателиудлительноболеющихималоотличаютсяубольныхсразнымчисломрецидивов.TLR3иTLR9наоборотимеютбольшиезначенияпридлительностизаболевания≤2лет.Сувеличениемдлительностиуровеньэтихрецепторовуменьшается.Втожевремяихуровеньувеличенприбольшейчастотерецидивов(табл.26).

Таблица26Уровни экспрессииTLRнаМЛПКубольныхМЭЭвзависимости отдлительности заболеванияичастотырецидивоввгод

Характеристикизаболевания	n	%экспрессирующихTLRклеток,(M±σ),(Me)(LQ-UQ)
		TLR2	TLR4	TLR3	TLR9
ГруппабольныхМЭЭвцелом	88	11,1±3,6 11(9-12,7)*	9,7±3,5 10(7-12)	34,9±4,8* 37,5(27,8-39)	29,7±3,6* 29(26,7-32)
Длительностьтечения≤2года	28	7,2±2,8 7,3(6,2-8,3)#	5,6±1,7 5,1(4,8-6,9)	45,8±5,5# 45(42,6-47,8)	37,5±5,2# 38(34-40,5)
Длительностьтечения≥2года	60	15,0±4,4 15,4(12,7-17,3)#	13,8±5,3 13,7(11,7-16)	24,1±4,1# 24(22-26,4)	21,9±2,0# 21,6(20,7-22,7)
Частотарецидивов<3	57	10,6±2,9 10,5(8,2-12,5)	8,5±2,2 8,4(7,1-10,1)	21,9±3,7# 21,9(19,9-23,6)	23,7±2,6# 23,1(22,6-25)
Частотарецидивов≥3	31	11,6±4,3 11(9,5-13,5)	10,9±4,8 10(8-12)	47,9±4,7# 48(44-51,3)	35,7±4,6# 36,8(35-38)
Группаздоровыхлиц	15	4,8±0,6 4,8(4,4-5,2)*	4,2±0,3 4,2(3,8-4,5)	15,4±3,4* 15,7(14,2-16,2)	11,2±1,3* 11,2(10,9-11,6)

Примечание:*p<0,05-достоверностьразличиймеждугруппойбольныхМЭЭи

группойздоровыхлиц(p<0,05)(Mann-WhitneyUtest).#p<0,05‒достоверностьразличиймеждугруппамибольныхподлительностирецидивов(p<0,05);междугруппамибольныхпочастотерецидивов(p<0,05)(Mann-WhitneyUtest).n-числобольных.М‒средняяарифметическая.Ме–медиана.σ‒стандартноеотклонение.LQ-UQ‒25-75перцентили.

Повышение экспрессии TLR3,9 происходит под влиянием вирусных

лигандов(антигены,ДНК,РНК),чтоипроисходитубольныхМЭЭ,укоторыхбыла

выявленаДНКгерпесвирусов.ГиперэкспрессияTLR3иTLR9происходитпричастыхрецидивах, чтоприводиткувеличению вируснойнагрузкиворганизме.

ЭкспрессияTLRsтакжебылаопределенавслизистойзеваивклеткахкожиизочагов.ВэпителиислизистойзеваубольныхМЭЭвпериодрецидивазаболеванияотмечалисьотносительнонизкиеуровниэкспрессииTLR2иTLR9,средниезначениякоторыхсоставили(5,0±1,4)%и(5,8±1,3)%ивысокиеуровниэкспрессииTLR7(37,8±9,3)%иTLR8(58,5±8,7)%.УровниэкспрессииTLR4составили(11,7±4,1)%, TLR3–(18,9±6,0)%.

ЭкспрессияTLRsвклеткахкоживочагах,взятыхспомощьюбиопсии,быламенеевыражена,чемвклеткахэпителияслизистойзева.ВклеткахизочаговвыявленыболеевысокиезначенияэкспрессииTLR9–(18,4±4,4)%иTLR8–(16,6±5,2).УровниэкспрессиирецепторовTLR2,4,3,7колебалисьвпределах6,2-8,9%(рис.7).ДинамикаэкспрессииTLRsвклеткахслизистойоболочкизевасвидетельствуетовлияниивирусно-бактериальнойфлорыпредшествующейисопутствующейМЭЭипроникающейворганизмчерезслизистыеоболочки.СэтимжесвязаннизкийуровеньэкспрессииTLR2,которыйпримукозальныхметодахаппликации,поданнымрядаавторов,неимеетположительнойдинамики[22,94].

100

_% КлеткикожиизочаговМЭЭ(n=10)

37,8

58,5

6,2 ₅

0

8,3

11,7

8,9

18,9

18,4

5,8

8,2

16,6

TLR2 TLR4 TLR3 TLR9 TLR7 TLR8

Рис.7.ЭкспрессияTLRsнаклеткахкоживочагахивклеткахэпителиязеваубольныхМЭЭ.

Примечание:n-числообразцов.Вграфикепредставленызначения(M±σ),

где М‒средняяарифметическая.

СцельювыявленияособенностейэкспрессииTLRвкожевзависимостиоттяжеститеченияМЭЭнамибылпроведенкорреляционныйанализмеждуэкспрессиейTLRsнаклеткахкожииоднимизнаиболееважныхпоказателейтяжеститечениязаболевания-частотойрецидивов.ВходепроведенияанализавыявленавысокаяпрямаякорреляционнаясвязьмеждучастотойрецидивовМЭЭиэкспрессиейTLR8(коэффициенткореляции-0,613),(р<0,05)наклеткахкоживочагахМЭЭ.Известно,чтовнутриклеточныерецепторыTLR7,8,9распознаютразличныетипынуклеиновыхкислот,встречающихсяпривирусныхинфекциях[279].ВыявлениевысокихуровнейэкспрессииTLR7иTLR8наклеткахкоживочагахМЭЭинаклеткахэпителиязеваубольныхМЭЭявляютсяпризнакамихроническоговоспаленияубольныхМЭЭ.

ОпределениефагоцитарнойактивностинейтрофиловпериферическойкровиприоценкекислородзависимогометаболизманейтрофиловвНСТтестепоказалонахождениесреднихзначенийпоказателейспонтанногоНСТтестананижнейграниценормы:цитологический(световой)показательсоставил(0,1±0,01)у.е.,содержаниеформазанпозитивныхнейтрофилов(11,4±1,2)%(табл.27).СнижениеиндексовактивацииуказываетнанарушениепроцессовопсонизацииифагоцитозаубольныхМЭЭ,обусловленномнеснижениемвыработкиактивныхформкислородавответнастимул(онавпределахнормы),аповышениемспонтаннойихпродукции[47,72].