5.4. Рисование с монитора

Иногда на хороших рисунках деталей больше, чем на плохой фотографии. Для получения рисунков с экрана монитора можно воспользоваться прозрачной пленкой, накладываемой на телеэкран. Однако из-за толщины стекла в телевизионной трубке этот способ может вызвать определенные геометрические искажения. Лучше использовать следующий метод.

Тонкую (1—2 мм) стеклянную пластинку (такую, как для тонкослойной хроматографии) укрепляют с помощью струбцины под углом 45° перед центром вертикально расположенного экрана. Нижняя часть пластины касается монитора. Середина пластины должна находиться на равных расстояниях от экрана и от листа бумаги, который помещается под пластиной на столе. Если смотреть на пластину сверху, то будут одновременно видны оба изображения (листа бумаги и экрана). Можно также смотреть по горизонтали сквозь пластину на экран. Важно точно установить стеклянную пластину, особенно в тех случаях, когда телевизионный экран расположен не вертикально. Это можно сделать следующим образом.

1.Изменяйте высоту и угол наклона пластины до тех пор, пока экран не будет точно проецироваться на плоскость бумаги. Если экран искривлен, то углы будут проецироваться несколько ниже, а центр несколько выше бумаги.

2.Только после такой установки пластины можно сдвигать голову, не вызывая при этом смещения изображений и на бумаге. Бумагу для рисования лучше зафиксировать с помощью клейкой ленты.

3.Для удобства работы приглушите верхнее освещение и/или осветите бумагу лампой с регулируемой яркостью. В результате вы получите внизу изображение экрана в масштабе 1:1.

Такая же система может быть использована, если заменить бумагу планшетом дигитайзера, чтобы при отсутствии удобного оборудования переносить информацию с телевизионного экрана в компьютер.

6. Благодарности

Эта глава могла быть написана только благодаря Роберту Д. Ал лену (1927—1986), который щедро делился своим огромным опытом и знаниями в данной области во время совместной работы с одним из авторов (Вейссом) в летние сезоны 1984 и 1985 гг. Часть данной главы создана в значительной степени на основании записей многочисленных лекций, которые Боб читал на эту тему. Вейсс глубоко признателен также Шиниа Иноэ и коллегам по видеомикроскопической работе из Вудс-Хола за многочисленные дискуссии и советы.

7. Литература

1.Inoue, S. (1981) J. Cell Biol., 89, 346.

2.Inoue, S. (1986) Video Microscopy. Plenum Press, New York.

3.Allen, R. D., Travis, J. L, Allen, N. S. and Yilmaz, H. (1981) Cell Moti].. 1, 275.

4.Allen, R. D., Allen, N. S. and Travis, J. L. (1981) Cell Motil., 1, 291,

5.Allen, R. D., Allen, N. S. (1983) J. Microsc., 129, 3.

6.Willingham, M. C. and Pastan, I. (1978) Cell, 13, 501.

7.Reynolds, G, T. and Taylor, D. L. (1980) BioScinece, 30, 586.

8.Allen, R. D., Weiss, D. G., Hayden, J. H., Brown, D. Т., Fujiwake, H. and Simpson, M. (1985) J. Cell Biol., 100,

1736.

9.Weiss, D. G. (1986) J. Cell Sci. Suppl., 5, 1.

10.Arndt-Jovin, D. J., Robert-Nicoud, M., Kaufman, S. J. and Jovin, Т. М. (1985) Science, 230, 247.

11.DiGuiseppi, J., Inman, R., Ishihara, A., Jacobson, K. and Herman, B. (1985) BioTechniques, 3, 394.

12.Hecht, E. and Zajac, A. (1974) Optics. Addison-Wesley Publishing Co., Reading, MA.

13.Walter, R. J. and Berns, M. W. (1981) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 78, 6927.

14.Wick, R. A. (1987) Applied Optics, 26, 3210.

15.Bennett, H. S. (1950) In Handbook of Microscopical Techniques. McCIung, G. L. (ed.), Harper & Row (Hoeber), New York, p. 591.

16.Inoue, S. (1961) In The Encyclopedia of Microscopy. Clark, G. L. (ed.)3 Reinhold, New York, p. 480.

17.Conchello, J. A., Hansen, E. W. and Allen, R. D. (1987) Proc. 13th Northeast Bioeng. Conf. Philadelphia, p. 4.

18.Schnapp, B. J. (1986) Methods Enzymol., 134, 561.

19.Kachar, B. (1985) Science, 227, 766.

20.Ellis, G. W. (1985) J. Cell Biol., 101, 83a.

21.Lichtscheidl, I. and Url, G. W. (1987) Eur. J. Cell Biol., 43, 93.

22.De May, J. (1983) In Immunocytochemistry. Polak, J. and Van Noorden, S. (eds), Wright-PGS, London, p. 92.

23.Hoffman, R. (1977) J. Microsc., 110, 205.

24.Ellis, G. W. (1978) In Cell Reproduction. In Honor of Daniel Mazia. Dirk-sen, E., Prescott, D. and Fox, C. F. (eds), Academic Press, New York, p. 465.

25Allen, R. D. (1985) Annu. Rev. Biophys. Biophys. Chem., 14, 265.

26Allen, R. D,, David, G. B. and Nomarski, G. (1969) Z. Wiss. Mikr. Mikro-tech., 69, 193.

189

27.Izzard, C. S. and Lochner, L. R. (1976) J. Cell Sci., 21, 129.

28.Beck, K. and Bereiter-Hahn, J. (1981) Microsc. Act., 84, 153.

29 De Brabander, M., Nuydens, R., Geuens, G., Moeremans, M. and De Mey, J. (1986) Cell Motil. Cytoskel., 6, 105.

30 Geerts, H., De Brabander, M., Nuydens, R., Geuens, G., Moeremans, M., De Mey, J. and Hollenbeck, P. (1987) Biophys. J., 52, 775.

31. Mathog, D., Hochstrasser, M. and Sedat, J. W. (1985) J. Microsc., 137, 241 and 253. 32 White, J. G., Amos, W. B. and Fordham, M. (1987) J. Cell Biol., 105, 41.

33 Kachar, В., Evans, D. F. and Ninham, B. W. (1984) J. Coll. Interface Sci., 100, 287.

34.Trendelenburg, M., Allen, R. D., Gundlach, H., Meissner, В., Troster, H. and Spring, H. (1986) In Nucleocytoplasmic Transport. Peters, R. and Trendelenburg, M. (eds), Springer-Verlag, Berlin, p. 96.

35.Allen, R. D. and Allen, N. S. (1981) Protoplasma, 109, 209.

36.Kachar, B. (1985) Science, 227, 1355.

37.Cohn, S. A., Ingold, A. L. and Scholey, J. M. (1987) Nature, 328, 160.

38.Weiss, D. G., Langford, G. M., Seitz-Tutter, D. and Keller, F. (1988) Celt Motil. Cytoskel., 10, 285.

39.Weiss, D. G., Keller, F., Gulden, J. and Maite, W. (1986) Cell Motil. Cytoskel., 6, 128.

40.Taylor, D. L., Amato, P. A., Luby-Phelps, K. and McNeil, P. (1984) Trends Biochem. Sci., 9, 88.

41.Tsien, L. Y. and Poenie, M. (1986) Trends Biochem. Sci., 11, 450.

42.Bright, G. R., Rogows-ka, J., Fisher, G. W. and Taylor, D. L. (1987) BioTechniques, 5, 556.

43.Bright, G. R., Fisher, G. W., Rogowska, J. and Taylor, D. L. (1988) Methods Cell Biol., 30, in press.

44.Peters, R. (1985) Trends Biochem. Sci., 10, 223.

45.Kapitza, H. and Jacobson, K. (1986) In Lateral Motion of Membrane Proteins. Techniques for the Analysis of Membrane Proteins. Ragon and1 Cherry (eds), Chapman and Hall, London, p. 345.

46.Yanagida, M., Morikawa, K., Hiraoka, Y., Matsumoto, S., Uemura, T. and Okada, S. (1986) In Application of Fluorescence in the Biomedical Sciences. Taylor et al. (eds). Alan R. Liss, New York, p. 321.

47.Kron, S. J. and Spudich, J. A. (1986) Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 83, 6272.

48.Wampler, J. E. (1986) In Application of Fluorescence in the Biomedical Sciences. Taylor et al. (eds), Alan R. Liss, New York, p. 301.

49.Yoshimoto, Y., Iwamatsu, Т., Hirano, K., Hiramoto, Y. (1986) Dev. Growth Differ., 28, 583.

50.Schauer, A., Ranes, M., Santamaria, R., Guijarro, J., Lawlor, E., Mendez C., Chater, K. and Losick, R. (1988) Science, 240, 768.

51.O'Kane, D. J., Lingle, W. L., Wampler, J. E., Legocki, M., Legocki, R. Я. and Szalay, A, A. (1988) Plant Mol. Biol., 10, 387.

52.Purves, D. and Voyvodic, T. (1987) Trends Neurosci., 10, 398.

53.Blasdel, G. G. and Salama, G. (1986) Nature, 321, 579.

54.DeBiasio, R., Bright, G. R., Ernst, L. A., Waggoner, A. S. and Taylor, D. L* (1987) J. Cell Biol., 105, 1613.

55.Haugland, R. P. (1988) Handbook of Fluorescent Probes and Research Chemicals. Molecular Probes Inc., Eugene, OR, 2nd edn.

56.Allen, T. D. (1987) J. Microsc., 147, 129.

57.Wolf, R. and Fuldner, D. (1986) Mikrokosmos, 75, 375.

ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЕ ОКРАШИВАНИЕ ХРОМОСОМ

А. Т. Самнер

1. Введение

Дифференциальное окрашивание (сегментирование) хромосом можно определить как применение специальных способов окрашивания, позволяющих получить различия в окраске по длине хромосом. В соответствии с этим строгим определением к сегментам хромосом не относится видимая структурная неоднородность хромосом, например диски политенных хромосом и хромомеры пахитенных хромосом, хотя в последнем случае есть достоверные данные о сходстве в распределении хромомеров и некоторых сегментов митотических хромосом [1]. Как бы то ни было, сущность метода сегментирования состоит в выявлении рисунка на хромосомах, в которых лет каких-либо очевидных структурных различий. Дифференциальное окрашивание хромосом — это, разумеется, только один из подходов к исследованию их организации, но достоинство данного метода состоит в том, что он позволяет получать различные типы сегментации, а это имеет большое значение, особенно в клинической цитогенетике и в эволюционных исследованиях.

В литературе описано большое число методов сегментирования хромосом и до сих пор изобретаются новые. На практике, однако, все эти методы можно разделить на несколько типов, классификация которых дана в разд. 2. В настоящей главе подробно рассматриваются несколько методов дифференциального окрашивания

190