1.1. Освещение по Кёлеру
Вся современная микроскопия, с помощью которой исследователи стремятся понять, как соотносится получаемое в микроскопе изображение с физико-химической природой препарата, начинается с освещения по Кёлеру.
Система освещения в микроскопе служит для того, чтобы, во-первых, получить равномерно освещенное поле зрения, на котором детали образца могут быть хорошо различимы, и, во-вторых, осветить образец как можно более широким пучком света с целью достичь максимального разрешения мелких деталей.
1.1.1. Принципы метода
1.Линза, находящаяся впереди источника света, формирует изображение источника света не в плоскости препарата.
2.Вторая линза (конденсор) переносит изображение поверхности первой линзы на исследуемый образец. Она имеет минимальное фокусное расстояние, чем достигается максимальный раствор конуса света, падающего на образец.
Таблица 1.1. Сопряженные плоскости при освещении по Кёлеру
Серия А
Нить лампы (источник света)
Диафрагма конденсора (апертурная диафрагма) Задняя фокальная плоскость объектива Диск Рамсдена
Серия Б
Полевая диафрагма Препарат Первичное изображение Сетчатка глаза
1.1.2. Предварительная проверка оборудования
Фирмы — изготовители микроскопов прилагают подробную инструкцию к каждому типу выпускаемого микроскопа, но в лабораториях описания часто теряются или в них не считают нужным заглядывать. Названия
исимволы, используемые в дальнейшем описании, приведены на рис. 1.1.
1.Проверьте, что ваш микроскоп имеет коллекторную линзу, которая находится между лампой и конденсором. Эта линза может быть встроена в основание микроскопа, но и в данном случае она устанавливается для того, чтобы проецировать изображение источника света на ирисовую диафрагму конденсора. Когда диафрагма закрыта, при помощи зеркала можно увидеть, так ли это в действительности. Во многих случаях, однако, нить лампы бывает не видна из-за того, что мешает матовое стекло. В таких случаях необходимо просто полностью осветить ирисовую диафрагму конденсора. В некоторых типах микроскопов для этого нет котировочных приспособлений, но принцип остается прежним. Могут иметься винты, центрирующие нить лампы относительно коллекторной линзы. Их можно использовать на этом этапе или на этапе 7 в методе, описанном в разд. 1.2. На коллекторной линзе может находиться ирисовая диафрагма, которая называется диафрагмой поля зрения (разд. 1.2).
2.Проверьте наличие в микроскопе конденсора и его диафрагмы. В хороших системах диафрагма находится в передней фокальной плоскости конденсора. Она называется апертурной диафрагмой.
Рис. 1.1. Ход лучей при установке освещения по Кёлеру и две серии сопряженных плоскостей. Сплошными линиями показаны краевые лучи, идущие слева направо от центра нити накала лампы. Пунктирной линией обозначен луч, проходящий через центр коллекторной линзы. Сплошные вертикальные линии со стрелками
5