6. Что необходимо для гистохимической работы

6.1. Оборудование и материалы

Единственной стадией обработки препарата, требующей специального и сложного (а потому сравнительно дорогого) оборудования, является микротомия. Кроме этого, специальные приборы требуются для криотомии и заливки препаратов в парафин или пластик. Если в исследовании используется большое число препаратов, то рекомендуется иметь в лаборатории автомат для проводки/окраски. Несомненно, что необходим хороший микроскоп. Поскольку, однако, современный автоматизированный исследовательский микроскоп стоит дорого, то получают преимущество микроскопы старых моделей, которые с точки зрения оптики часто являются вполне удовлетворительными, хотя для работы с ними требуется большое мастерство. Многие реактивы, применяемые для изготовления и окраски препаратов, стоят недорого. Следует отметить, что хотя комплекты для заливки и окраски часто стоят дороже, однако для новичка они оправдывают свою цену, правда, в том случае, если они высокого качества. Многие стандартные гистохимические реактивы являются летучими и опасными. Они либо токсичны, как формальдегид, либо легко воспламеняются, как ксилол. Следовательно, для работы с ними понадобится вытяжной шкаф или аналогичное оборудование. Все обсуждавшиеся в настоящем разделе приборы и реактивы можно легко приобрести через торговую сеть.

6.2. Как научиться работать?

Практические навыки, которые новичкам даются наиболее трудно, связаны с резкой на микротоме и микроскопией. Разумеется, существует обратная зависимость между необходимыми навыками и степенью автоматизации заказываемого оборудования (которая отражается на его цене). Если в вашем институте работают люди, практически знакомые с гистохимией, то считайте, что вам повезло. Если таких людей рядом нет, то за советом можно обратиться к представителям классических дисциплин, например к специалистам по анатомии или зоологии, или в гематологические или патологоанатомические отделения больниц. Чтобы получить представление о принципах методов, которое необходимо приобретать параллельно с усвоением практических навыков, изучайте литературу, начиная с работ [1] и [2]. Затем поговорите со специалистом. Если нет возможности обучиться на месте, подумайте о посещении специальных курсов, например таких, которые организует Королевское микроскопическое общество. Для получения информации по этому вопросу следует обратиться в администрацию Королевского микроскопического общества по адресу 37/38 St Clements, Oxford

ОХ4 1AJ, UK.

И наконец, помните, что в Великобритании для проведения фиксации перфузией на живых животных необходима труднодоступная лицензия от Общества домашних животных. Аналогичное правовое регулирование существует или скоро будет введено повсеместно.

7. Почему используются гистохимические методы

Методы микроскопии обязательно используются в тех случаях, когда нужно выяснить локализацию какихлибо соединений или структур в биологических объектах. Однако подходы, в основе которых лежит микроскопия, не ограничиваются гистохимией. В тех случаях, когда речь идет об идентификации чего-либо, необходимость в применении микроскопа не столь очевидна. Для облегчения выбора метода в табл. 5.24 сопоставлены преимущества и ограничения методик для исследования состава и структуры клеток и тканей. Эта информация позволяет оценить, с одной стороны, разносторонние возможности гистохимии, а с другой стороны, дополнительный характер каждого из этих способов исследования.

Таблица 5.24. Перспективы гистохимии — сравнение различных методов получения информации о биологических объектах

Проблемы, возникающие в процессе получения информации

115