75. Принципы диагностики нбо

Показания к бх исследованиям нбо:

Неясные и затяжные формы желтухи у детей в период новорожденности и первые года жизни 2) Хр. Расстройства пищеварения не инфекционной природы (диарея, рвота, ранний цирроз) 3)Аномалии развития скелета нерахитического происхождения (нарушение походки, задержка физ развития) 4)Нарушение речи 5)Нарушение органов зрения 6)Дефекты поведения (леши-нихана) 7) снижение слуха или полная глухота 8) судорожный синдром, не поддающийся терапии 9) умственная отсталость 10) необычные волосы, ногти, лицо 11) стойкие изменения мочи, необычный цвет и запах мочи

Группы населения подлежащих обследованию:

Новорожденные, дети из спец учреждений, дети направленные на обследование по поводу показаний.

Скрининговые программы. Иммуноферментный анализ, биохимические методы и др.

ДНК-диагностика:

Прямая – мутации определенного гена

Косвенная – семейный анализ различных полиморфных вариантов ДНК

Косвенная диагностика – исторически более ранний подход.

Полиморфные варианты:

Минисателлиты	Микросателлиты
Мономер 5-30 пн	1-4 пн
Размер 0,5-20 kb	20-40 пн
Блот-гибридизация	ПЦР, электрофорез
Каждый человек имеет уникальный образец; образец ребенка является смесью родительских образцов	Для каждого человека есть вероятность
Наследование по Менделю
Достаточно одного эксперимента для надежной идентификации образца	Необходимо идентифицировать большое количество локусов

Методы прямой диагностики:

Блот-гибридизация

ПДРФ-анализ

ПЦР-амплификация с последующим электрофорезом

Аллель-специфическая гибридизация (амплификация)

Определение статуса метилирования

Анализ экспансии тринуклеотидных повторов

SSCP-анализ

гетеродуплексный анализ

RT-ПЦР

Секвенирование

Метод детекции ошибок спаривания

Биочиповые технологии

76. Просеивающие программы, скрининг.

Двухэтапное система обследования на НБО: 1) просеивающие программы (массовый скрининг, селективный) 2) исп методы подтверждающие диагноз

Массовый скрининг новорожденных:

Скрининг – предположительное выявление не диагностированных ранее болезней\дефекта с помощью тестов, обследований и других процедур, дающих быстрый ответ.

В практике для массового скрининга используют кровь из пяточки, высушенную на фильтровальную бумагу.

Цели и задачи МС:

Доклиническое выявление, когда раннее лечение дает хороший эффект 2)изучение распространенности аномалий 3) популяционные исследования по определению частоты метаболического дефекта 4) углуюление знаний о сущности уже известных НБО 5) разработка методов диетотерапии 6) изучение особенности бх и клинических вариантов патологии в период новорожденности и др возрастных периодах 7) выявление гетерозиготного носительства

Требования к НБО, которую целесообразно выявлять при МС:

1)Заболевания, приводящие к серьезному уменьшению качеству жизни и трудоспособности без лечения 2)заболевания, которые достаточно распространены в популяции 3) заболевания, для которых существуют методы диагностики 4) заболевания, которые поддаются лечению с достижением принципиального эффекта для больного и общества, разработаны четкие методики профилактики.

МС: фенилкетонурия (1:8000), врожденный гипотериоз 1:4000, адреногенитальный синдром, галактоземия, муковисцидоз

Требования к методам: 1) метод должен быть диагностически значимым 2) надежен и воспроизводим 3)использует легкодоступный материал 4) экономически выгодный 5) не должен давать ложноположительных результатов.

Время диагностирования – промежуток между периодом когда можно диагностировать и лечение еще эффективно