- •Российский университет дружбы народов
- •К практическим занятиям по биохимии
- •Авторский коллектив:
- •Предисловие как пользоваться этим учебным пособием?
- •Список сокращений и условных обозначений
- •Техника безопасности при работе в биохимической лаборатории
- •1. Общие требования безопасности
- •Классификация химических реактивов в биохимической лаборатории
- •2. Требования безопасности перед началом работ
- •3. Требования безопасности во время работы
- •4. Требование безопасности в аварийных ситуациях
- •5.Требование безопасности по окончании работы
- •Раздел 1: Аминокислоты и простые белки Введение
- •1.1 Проверка знаний по органической химии
- •1.2. Цветные реакции на белки и аминокислоты. Реакции осаждения и денатурации белков а. Цветные реакции на белки и аминокислоты
- •Б. Реакции осаждения и денатурации белков
- •1.3. Количественное определение белка биуретовым методом. Построение калибровочных кривых
- •1 .4. Диализ белков. Бумажная хроматография аминокислот
- •А. Диализ
- •1.5. Коллоквиум I по теме «Аминокислоты и простые белки»
- •Раздел 2: Сложные белки, нуклеиновые кислоты и ферменты Введение
- •2.1 Действие амилазы на крахмал. Влияние температуры на активность амилазы а. Действие амилазы на крахмал
- •Б. Изучение влияния температуры на скорость ферментативной реакции
- •2.2. Количественное определение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови с п-нитрофенилфосфатом
- •2.3. Коллоквиум II по теме: «Сложные белки, нуклеиновые кислоты и ферменты» Вопросы, для самостоятельной подготовки
- •Варианты письменной части коллоквиума
- •Варианты заданий на компьютерном тестировании
- •Правильные ответы
- •Раздел 3: Витамины, липиды, гормоны Введение
- •3.1. Количественное определение витаминов с и р.
- •3.3. Влияние гормонов на содержание глюкозы в крови
- •3.4. Коллоквиум III по теме «Витамины, липиды, гормоны»
- •Раздел 4: Метаболизм. Биоэнергетика клеток. Химия и обмен углеводов Введение
- •4.1. Специфичность действия ферментов распада углеводов: амилазы и сахаразы
- •4.2. Количественное определение глюкозы. Построение «сахарных кривых»
- •4.3. Определение активности сукцинатдегидрогеназы в мышцах. Количественное определение пирувата в моче
- •4.4 Коллоквиум IV по теме: «Метаболизм. Биоэнергетика клеток. Химия и обмен углеводов»
- •Правильные ответы
- •Раздел 5: Обмен липидов и его регуляция Введение
- •5.1. Кинетика действия липазы.
- •5.2. Количественное определение фосфатидилхолинов (лецитинов) по фосфору
- •I. Приготовление рабочего раствора сыворотки.
- •II. Определение концентрации фосфатидолхолинов по содержанию фосфора.
- •5.3. Количественное определение холестерина в сыворотке крови
- •5.4. Количественное определение малонового диальдегида
- •5.5. Коллоквиум по теме «Обмен липидов»
- •Раздел 6: Переваривание белков и обмен аминокислот
- •6.1. Количественный анализ желудочного сока. Определение свободной, связанной, общей соляной кислоты и общей кислотности желудочного сока.
- •6.2. Количественное определение аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы в сыворотке крови
- •6.3. Доказательство проявления активности аланин-аминотрансферазы (АлАт) методом бумажной хроматографии
- •6.4. Экспресс-метод определения повышенного содержания фенилаланина в плазме крови
- •6.5. Количественное определение мочевины в моче ферментативным уреазным/фенол-гипохлоритным методом
- •6.6. Количественное определение креатинина в моче
- •6.7. Коллоквиум по теме: «Обмен простых белков» Вопросы, для самостоятельной подготовки
- •Варианты письменной части коллоквиума
- •Правильные ответы
- •Раздел 7: Обмен хромопротеинов и нуклеопротеинов. Биохимия крови и мочи. Биосинтез нуклеиновых кислот и белков. Введение
- •7.1. Определение общего билирубина в сыворотке крови
- •7.2. Количественное определение мочевой кислоты в моче
- •7.3. А. Определение активности -амилазы в моче
- •7.3. Б. Составные части мочи в норме и при патологии
- •7.4. Определение активности холинэстеразы в сыворотке крови
- •7.5. Определение активности лактатдегидрогеназы в сыворотке крови
- •7.6. Коллоквиум по теме: «Обмен хромопротеинов и нуклеопротеинов. Биохимия крови и мочи. Биосинтез нуклеиновых кислот и белка». Вопросы, для самостоятельной подготовки
- •Варианты письменной части коллоквиума
- •Правильные ответы
- •Раздел 8: Подготовка к экзамену
- •8.1. Основные вопросы, выносимые на обсуждение
- •8.2. Пример экзаменационного тестового задания по курсу биохимии
- •59. Найти соответствие между процессом и его графическим изображением
- •60. Цикл мочевинообразования установил
- •Ответы к экзаменационному тесту
- •Раздел 9: Приложения
- •9.1. Термины, различающиеся по смыслу, но сходные по написанию и звучанию
- •9.2. Стандартные биохимические наборы и реактивы, используемые в практикуме
- •9.3. Рекомендуемая литература
- •Содержание
- •Раздел 7: Обмен хромопротеинов и нуклеопротеинов. Биохимия крови и мочи. Биосинтез нуклеиновых кислот и белков. 126
- •Раздел 8: Подготовка к экзамену 148
- •Раздел 9: Приложения 161
9.3. Рекомендуемая литература
Берёзов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия: Учебник.- 4-е изд. Переработ. и доп.- М.: Медицина, 2007.-704 с.
Биохимия. Краткий курс с упражнениями и задачами./ Под ред. Е. С. Северина и А.Я. Николаева.- 2-е изд., испр. и доп. – М.: Гэотар Мед, 2002.- 448 с.
Биохимия. Учебник / Под ред. Е. С. Северина. – 2-е изд., испр. - М.: Гэотар Мед, 2004.- 784 с.
Клиническая биохимия/ Под ред. В.А. Ткачука.- М.: Гэотар Мед, 2002.- 360 с.
Кольман Я., Рём К.-Г. Наглядная биохимия: Пер с нем.- М.: Мир, 2000.-469 с.
Николаев А.Я. Биологическая химия.- М.: Медицинское информационное агенство, 1998.- 496 с.
Руководство к лабораторным занятиям по биохимии/ Под ред. Т.Т. Берёзова.- М.: Медицина, 1976.- 294 с.
Сборник тестов по биохимии. Учебное пособие/ Под ред. Н.Н. Чернова. - М.: Изд-во РУДН, 2004. - 92 с.
Справочник биохимика: Пер с англ./ Досон Р., Элиот Д., Элиот У.,Джонс К.- М.: Мир, 1991.- 544 с.
Чернов Н.Н., Буробина С.С. Вопросы и тесты для проверки знаний по биохимии. Для студентов мед. факультетов.- М.: Изд-во РУДН, 2002.- 62 с.
Rendox, Manual procedures, Edition III, Bilirubin, Colorimetric Method
Содержание
Москва 3
Список сокращений и условных обозначений 6
Техника безопасности при работе в биохимической лаборатории 7
Раздел 1: Аминокислоты и простые белки 12
1.1 Проверка знаний по органической химии 13
1.2. Цветные реакции на белки и аминокислоты. Реакции осаждения и денатурации белков 14
1.3. Количественное определение белка биуретовым методом. Построение калибровочных кривых 19
1.4. Диализ белков. Бумажная хроматография аминокислот 21
1.5. Коллоквиум I по теме «Аминокислоты и простые белки» 25
Раздел 2: Сложные белки, нуклеиновые кислоты и ферменты 31
2.1 Действие амилазы на крахмал. Влияние температуры на активность амилазы 32
2.2. Количественное определение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови с п-нитрофенилфосфатом 35
2.3. Коллоквиум II по теме: «Сложные белки, нуклеиновые кислоты и ферменты» 39
Раздел 3: Витамины, липиды, гормоны 46
3.1. Количественное определение витаминов С и Р. 46
3.2. Спектрофотометрическое определение НАДН(Н+) и расчёт чистоты коммерческого препарата 50
3.3. Влияние гормонов на содержание глюкозы в крови 53
3.4. Коллоквиум III по теме «Витамины, липиды, гормоны» 55
Раздел 4: Метаболизм. Биоэнергетика клеток. Химия и обмен углеводов 64
4.1. Специфичность действия ферментов распада углеводов: амилазы и сахаразы 65
4.2. Количественное определение глюкозы. Построение «сахарных кривых» 67
4.3. Определение активности сукцинатдегидрогеназы в мышцах. Количественное определение пирувата в моче 71
4.4 Коллоквиум IV по теме: «Метаболизм. Биоэнергетика клеток. Химия и обмен углеводов» 77
Раздел 5: Обмен липидов и его регуляция 83
5.1. Кинетика действия липазы. 84
5.2. Количественное определение фосфатидилхолинов (лецитинов) по фосфору 87
5.3. Количественное определение холестерина в сыворотке крови 90
5.4. Количественное определение малонового диальдегида 93
5.5. Коллоквиум по теме «Обмен липидов» 96
Раздел 6: Переваривание белков и обмен аминокислот 102
6.1. Количественный анализ желудочного сока. Определение свободной, связанной, общей соляной кислоты и общей кислотности желудочного сока. 104
6.2. Количественное определение аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы в сыворотке крови 106
6.3. Доказательство проявления активности аланин-аминотрансферазы (АлАТ) методом бумажной хроматографии 109
6.4. Экспресс-метод определения повышенного содержания фенилаланина в плазме крови 111
6.5. Количественное определение мочевины в моче ферментативным уреазным/фенол-гипохлоритным методом 113
6.6. Количественное определение креатинина в моче 116
6.7. Коллоквиум по теме: «Обмен простых белков» 119