Идентификация и определение сапонинов методом тонкослойной хроматографии

Сорокина О.Н.,¹ Барышева С.В.²

1Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова,

Саратов, Россия.

аспирант 3г.

Sorokina-O-N@yandex.ru

2Саратовский государственный технический университет, Саратов, Россия. Молодой учёный.

Научный руководитель: Сумина Е.Г.

Идентификация и количественное определение сапонинов в растительном сырье и фитопрепаратах является важной аналитической задачей в связи с отсутствием универсальных методик и стандартных образцов. Тритерпеновые сапонины обладают уникальными фармакологическими свойствами, такими как, гепатопротекторным, кардиотоническим, противосклеротическим действием и противораковой активностью [1]. Установлено, что основными действующими веществами фитопрепаратов, содержащих сапонины являются глицирризиновая кислота, олеоноловая кислота и ее гликозиы –аралозиды А, В и С [2, 3,4].

Таким образом, цель данной работы - разработка методик идентификации и количественного определения сапонинов в растительном сырье и препаратах солодки. Для достижения поставленной задачи были изучены условия хроматографического разделения сапонинов методом тонкослойной хроматографии (ТСХ). В качестве объектов исследования были выбраны тритерпеновые сапонины – олеоноловая и глицирризиновая кислоты, а также хедерозид. Для достоверной идентификации сапонинов в растительных объектах использовали в качестве свидетелей стандартные образцы олеоноловой и глицирризиновой кислот. Хроматографирование исследуемых соединений осуществляли методом восходящей ТСХ на пластинах различной полярности (Силуфол, Сорбфил на алюминиевой и полимерной подложках,Сорбтон–диол, Сорбтон-С₃, Полиамид-С₆, RP-C₁₈). В качестве подвижных фаз (ПФ) апробированы органические растворители ацетонитрил, изопропанол, бутанол, этилацетат и их смеси с водой и буферными растворами в различных соотношениях. Проявление хроматографических зон сапонинов осуществляли опрыскиванием высушенных пластин 10% раствором сульфата железа в 20% серной кислоте. В результате проведенных исследований было установлено, что оптимальными условиями для хроматографического разделения и идентификации олеоноловой и глицирризиновой кислот и хедерозида являются: ПФ бутанол – вода в соотношении 3:7 на пластинах Сорбфил. Разработаны ТСХ методики раздельного определения олеоноловой и глицирризиновой кислот, а также хедерозида в препарате солодки.

Литература:

[1] Мовсумов И.С., Гараев Э.А. Хим. растительного сырья 3, 5-10 (2010)

[2] Писарев Д.И., Мартынова Н.А., Нетребенко Н.Н. и др Химия растительного сырья 4, 197-198 (2010)

[3] Егоров М.В., Куркин В.А., Запесочная Г.Г., Быков В.А. Вестник ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация 1, 175-180 (2005)

[4] Калач А.В., Ситников А.И., Страшилина Н.Ю., Селеменев В.Ф. Химия растительного сырья 4, 39-43 (2006)

Identification and quantification of saponins in plant material and phytopreparation is an important analytical task due to the lack of universal methods and reference materials. Triterpene saponins possess unique pharmacological properties, such as hepatoprotective, cardiotonic, protivoskleroticheskim action and anticancer activity [1].

It is established that the main active ingredients herbal remedies containing saponins are glycyrrhizic acid, oleonolovaya acid and its glycosyl-aralosides A, B and C [2, 3, 4].

Thus, the purpose of this work - development of methods for identification and quantitative determination of saponins in plant material and preparations of licorice. To achieve this task have been studied conditions of chromatographic separation of saponins by thin layer chromatography (TLC). As objects of study were selected triterpenoid saponins - oleonolovaya and glycyrrhizic acid and hederozid. For accurate identification of saponins in plant facilities were used as standard samples oleonolovoy witnesses and glycyrrhizic acid. . Chromatography of the compounds was performed by ascending TLC on plates of different polarity (Silufol, Sorbfil on aluminum and polymer substrates, Sorbton-diol, Sorbton-C₃ polyamide-C₆, RP-C₁₈₎.

As the mobile phase (MF) tested organic solvents acetonitrile, isopropanol, butanol, ethyl acetate, and mixtures thereof with water and buffer solutions in different ratios.

Manifestation of chromatographic zones saponins was performed by spraying the dried plates of 10% solution of ferric sulfate in 20% sulfuric acid. The studies found that the optimum conditions for chromatographic separation and identification oleonolovoy and glycyrrhizic acid and hederozida are: MF butanol - water in a ratio of 3:7 on plates Sorbfil. TLC methods have been developed separately and determine oleonolovoy glycyrrhizic acids, as well as in the preparation of licorice hederozida.