1Львовский национальный университет имени Ивана Франко,

Львов, Украина.

Молодой учёный.

olga_korkuna@yahoo.com

2Львовский национальный университет имени Ивана Франко, Львов, Украина. Аспирант 3г.

Научный руководитель: Врублевская Т.Я.

Сульфаниламиды (СА) являются одним из старейших классов антибактериальных средств. На фоне сокращения использования СА, как однокомпонентных препаратов, широкое применение получили комбинированные препараты, содержащие СА в сочетании с триметопримом, либо с некоторыми антибиотиками. Такие комбинации антибактериальных субстанций характеризуются выраженным бактерицидным эффектом и широким спектром антибактериальной активности, в т. ч. относительно микрофлоры, устойчивой ко многим антибиотикам и издавна используемым сульфаниламидам.

Известно, что как действующие, так и вспомогательные вещества, составляющие один комбинированный препарат, очень часто затрудняют определение каждого, либо некоторых, из них. Этим, в частности, обуславливается необходимость поиска селективных реагентов для определения, контролируемых веществ, как среди уже известных соединений, так и поиск новых аналитических форм.

Наиболее распространенным СА, используемым в ветеринарной практике является сульфаметазин (4-Амино-N-(2,4-диметил-2-пиридинил) бензосуль­фонамид), резорбтивный препарат краткосрочного действия. Нами изучено взаимодействие сульфаметазина (СМТ) с азореагентом (кислотным моноазокрасителем) – тропеолином О (Тр О), и гетероциклическими азореагентами 4-(2-пиридилазо) резорцином (ПАР) и 4-(2-тиазолилазо) резорцином (ТАР). Методики основаны на диазотировании СМТ 10-кратным избытком нитрита натрия в среде 1 М соляной кислоты при температуре ледяной бани в течение 20 минут. Последующее азосочетание, образовавшихся диазосолей СА, с азокрасителями Тр О, ПАР и ТАР осуществляется, соответственно, при рН 10,5, 11,0 и 9,5 при 1,5-2-кратном избитке азореагента. Для всех систем в качестве буферной смеси использовали 0,01 М раствор тетрабората натрия.

На стадии разработки методик было установлено, что вспомогательные вещества, входящие в состав лекарств, не влияют на определение СМТ с использованием всех испытанных азокрасителей, в то время, как антибиотики тетрациклинового ряда и тилозин мешают такому определению с участием ПАР и ТАР. Полученные результаты позволили применить разработанные методики для анализа лекарственных средств в различных лекарственных формах (растворы, суспензии, порошки, таблетки), с использованием, в частности, Тр О – для четырехкомпонентных, ПАР – трехкомпонентных и ТАР – двухкомпонентных препаратов.

Согласно требованиям Европейской [1], Американской [2] Фармакопей, Государственной Фармакопеи Украины [3] а также других международных [4] и внутригосударственных документов [5], методики определения действующих веществ в лекарственных средствах должны быть валидированы. В соответствии с требованиями [1-5] для аналитической методики на испытание "количественное определение содержания действующего вещества" необходимо определять такие валидационные характеристики: специфичность; робастность (стойкость); линейность; правильность (или точность), прецизионность на трех уровнях – сходимость (повторяемость), внутрилабораторную (промежуточную) прецизионность, воспроизводимость; диапазон применения; предел обнаружения и предел количественного определения.

Исходя из этих требований, мы провели валидацию разработанных нами методик: методику определения сульфаметазина с Тр О в таблетках "Септовет" (ООО Укрзооветпромпостач) и порошке "Сульфатилозин" (ООО Укрветпромпостач); с ПАР – в суспензии "Мастисан-А" (Харьковская биофабрика); с ТАР – в растворе "Веттримеразин" (ООО Базальт) (табл. 1).

Таблица 1. Состав исследуемых препаратов сульфаметазина.

Препарат	Другие действующие вещества	Вспомогательные вещества
"Веттримеразин" (186±19 мг/мл)	триметоприм (40 мг/г)	пропиленгликоль, бензиловый спирт, вода
"Мастисан-А" (70±7 мг/мл)	стрептомицин (12 мг/мл), бензилпенницилин (26 мг/мл)	стеарат алюминия, вазелиновое масло
"Септовет" (180±18 мг/табл)	тилозин (25 мг/табл), триметоприм (30  мг/табл), ретинол ацетат (6  мг/табл)	лактоза, крохмаль, гидрокар бонат натрия, хлорид натрия, стеарат магния, карбоксиметил целюлоза, поливиниловый спирт, винная кислота
"Сульфатилозин" (175±17,5 мг/г)	триметоприм (35 мг/г), тилозин (3 мг/г), окситетрациклин (5 мг/г)	крохмаль, лактоза

Экспериментально доказано, что спектрофотометрическая методика количественного определения СА с использованием Тр О, ПАР и ТАР в исследованных препаратах пригодна для контроля качества этих препаратов по показателю "количественное определение" СМТ, что подтверждено установленными валидационными характеристиками.

Литература:

[1] European Pharmacopoeia (Eur. Ph.). 7-th Ed. Strasbourg: Council of Europe,2010.

[2] United States Pharmacopoeia, USP 30-NF25 Convention Inc., Rockville, MD XXVI, 2007.

[3] Державна Фармакопея України. – Доп. 1. – Х.: РІГЕР, 2004. – 520 с.

[4] Note for guidance on validation of analytical procedures: text and methodology (CPMP/ICH/381/95).

[5] Юргель Н.В., Младенцев А.Л., Бурдейн А.В. и др. Руководство по валидации методик анализа лекарственных средств – М.: — Изд. «Спорт и Культура - 2000», 2007. – 192 с.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ БИСФЕНОЛА А И ДИЭТИЛСТИЛЬБЭСТРОЛА В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ СОЧЕТАНИЯ МЕТОДОВ QUECHERS И ДИСПЕРСИОННОЙ ЖИДКОСТНО – ЖИДКОСТНОЙ МИКРОЭКСТРАКЦИИ МЕТОДОМ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Королёв Д.С.

Федеральный центр охраны здоровья животных,

Владимир, Россия.

Аспирант 2г.

bbzanko@rambler.ru

Научный руководитель: Амелин В.Г.

Разработана простая и экономичная методика определения бисфенола А и диэтилстильбэстрола в широком круге пищевых продуктов с использованием сочетания методов QuECheRS и дисперсионной жидкостно – жидкостной микроэкстракции методом газовой хроматографии с детектором электронного захвата. Анализируемые вещества извлекали из твердых проб ацетонитрилом согласно методу QuECheRS, после чего концентрирование проводили при помощью микроэкстракции, где в качестве экстрагента был использован тетрахлорметан, диспергатора – конечный экстракт по методу QuECheRS. Микроэкстракцию проводили в среде бидистиллированной воды без добавления солей и изменения рН. Эффективность диспергирования увеличивали обработкой полученной эмульсии ультразвуком. Дериватизацию проводили трифторуксусным ангидридом при температуре 60 ⁰С с добавлением катализатора триэтиламина.

Были подобраны оптимальные объемы и условия для микроэкстракции бисфенола А и диэтилстильбэстрола, степень извлечения которых близка к 100%, а степень концентрирования конечного экстракта - 40. Интервал линейности градуировочного графика составил 0,05 – 10 и 0,02 – 5 мкг/мл для бисфенола А и диэтилстильбэстрола соответственно. Диапазоны определяемых концентраций в мясе, креветках, мидиях, консервированных овощах и фруктах составили 1 – 250 и 0,5 – 125 мкг/кг для бисфенола А и диэтилстильбэстрола соответственно.