Контрольные вопросы.

Реакция иммунного гемолиза: необходимые ингредиенты, методика постановки, контроли, практическое применение. Реакция связывания комплемента (РСК): принцип РСК; что образуется при взаимодействии иммунной сыворотки со специфическим антигеном; что происходит с комплементом, если он присутствует при этом взаимодействии? Какова судьба комплемента в том случае, если между антигеном и антителами нет специфического сродства? С помощью какой реакции можно определить, что произошло с комплементом; почему используется именно эта реакция? Если конечным результатом РСК является гемолиз, что это означает - положительный или отрицательный результат? Методика постановки РСК. Почему исследуемую сыворотку надо инактивировать? Для чего необходимо определение титра и рабочей дозы комплемента? Что произойдет, если в реакции будет избыток комплемента или недостаточное количество его? Гемолитическая сыворотка: что содержит, как ее получают, что такое титр и как его определяют? Комплемент: химическая природа, отношение к высокой температуре, где содержится? Как можно разрушить комплемент? Что практически применяется в качестве комплемента? Каким способом обрабатывают комплемент для получения препарата с длительным сроком хранения? При постановке каких реакций иммунитета (из перечисленных) необходимо добавлять комплемент: реакция нейтрализации токсина антитоксином, реакция преципитации, реакция агглютинации, реакция иммунного бактериолиза, реакция иммунного гемолиза, РСК. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ): принцип реакции; укажите последовательность процессов при прямой реакции Кунса; необходимые ингредиенты; что является антигеном, что - антителами, чем помечены антитела; как учитывается результат реакции, с помощью какого микроскопа; как выглядит положительный результат; практическое применение - что можно обнаружить с помощью этой реакции? Непрямая реакция иммунофлюоресценции - укажите последовательность событий при этой реакции; преимущество по сравнению с прямой РИФ. Иммуноферментный анализ (ИФА) - принцип реакции; укажите последовательность событий при постановке реакции с целью обнаружения антигена в исследуемом материале; то же - при обнаружении антител. Иммуноблоттинг - принцип реакции, основные этапы; как учитывается результат; преимущества реакции по сравнению с ИФА. Радиоиммунный анализ (РИА) - основные этапы реакции, какие сыворотки применяются, чем они помечены, как учитывается результат? Иммуноэлектронная микроскопия - принцип метода; основные этапы; какая сыворотка применяется, чем она помечена; как учитывается результат реакции?

Задания для выполнения в процессе самоподготовки.

Продолжение таблицы «Реакции иммунитета».

Работа студента на практическом занятии.

1. Постановка РСК. Поставьте первую фазу РСК, поместите в термостат: отметьте время с тем, чтобы через 30 минут добавить вторую фазу.

Цель опыта: определить, имеются ли антитела в сыворотке крови больного.

Материал: сыворотка крови больного, антиген, комплемент, гемолитическая сыворотка, взвесь эритроцитов, физ.раствор.

Ход опыта: по схеме.

Результат: учтите в конце занятия.

Вывод: сформулируйте.

Разберите диагностические препараты, необходимые для РСК.

2. Реакция иммунофлюоресценции. Составьте в тетради схему постановки РИФ. Посмотрите диагностические препараты; определите - что содержит сыворотка, как приготовлена, для какой реакции (прямой или непрямой РИФ) она применяется. Посмотрите результат РИФ в люминесцентном микроскопе.

3. Иммуноферментный анализ (ИФА). Составьте в тетради схему постановки реакции. Ознакомьтесь с системой для диагностики ВИЧ-инфекции и гепатита В. Определите, что содержит каждый ингредиент и для чего применяется.

4. Иммуноблоттинг. Разберите схему постановки реакции; посмотрите демонстрационный результат реакции.

5. Радиоиммунный анализ (РИА) - разберите схему постановки и учёта реакции.

6. Иммунная электронная микроскопия (ИЭМ). Посмотрите демонстрацию - результат реакции, составьте в тетради схему реакции, укажите стрелками антиген (вирус) и меченые антитела.

Занятие 24

Медицинские иммунобиологические препараты для диагностики,

профилактики, лечения. Вакцины.

Цель самоподготовки.

После самостоятельного изучения темы студент должен знать лечебно-профилактические препараты (вакцины): источники и методы получения, классификацию, практическое применение.

Исходный уровень знаний.

Вспомните и повторите весь предыдущий материал по иммунитету: антигены и антитела; виды приобретённого иммунитета; получение иммунных сывороток; диагностические препараты.

Цель занятия.

1. Научиться характеризовать лечебно-профилактические препараты.

2. Научиться подбирать препараты для иммунопрофилактики и иммунотерапии инфекционных заболеваний.

План изучения темы.

1. Изучение общей схемы «Медицинские иммунобиологические препараты».

2. Вакцины: живые, убитые, химические, анатоксины, ассоциированные.

После изучения темы студент должен уметь.

1. Дать характеристику лечебно-профилактическим препаратам.

2. Подобрать препараты для профилактики и терапии инфекционных заболеваний.

Дополнительный материал к занятию.

Вакцинами называются препараты, которые содержат антиген и применяются для создания в организме искусственного активного иммунитета. По природе содержащегося в них антигена различают вакцины:

1) живые;

2) убитые (инактивированные);

3) химические;

4) анатоксины;

5) ассоциированные.

По назначению и применению различают вакцины профилактические и лечебные. Вакцины и анатоксины с уменьшенной дозировкой антигена (БЦЖ-м, АД-м и другие) применяют для вакцинации при наличии противопоказаний к прививкам обычными дозами вакцины и при ревакцинации.

1. Живые вакцины применяются при следующих заболеваниях: туберкулёз (БЦЖ и БЦЖ-м), чума, сыпной тиф (штамм ЕВ), туляремия, бруцеллёз, сибирская язва (СТИ), Ку-лихорадка (штамм М-44), грипп, корь, полиомиелит, эпидемический паротит, жёлтая лихорадка (штамм 17-Д).

2. Инактивированные (убитые) вакцины применяются для профилактики следующих заболеваний: полиомиелит, холера, брюшной тиф, лептоспироз, коклюш, сыпной тиф, бешенство (антирабическая культуральная вакцина), гепатит А, клещевой энцефалит, грипп, герпес..

3. Химические вакцины, в отличие от живых и убитых, не содержат микробных тел. Они содержат наиболее иммуногенные антигены, извлечённые тем или иным способом из микробных клеток. К ним относятся вакцины: брюшнотифозная (содержит 0-антиген бактерий брюшного тифа, адсорбированный на гидроокиси алюминия), менингококковая (содержит капсульный полисахарид менингококка серогруппы А, В), холерная.

4. Анатоксины – препараты, полученные из экзотоксинов путём обработки формалином и теплом. Анатоксины: стафилококковый нативный, стафилококковый адсорбированный, холероген-анатоксин, дифтерийный адсорбированный (АД, АД-м), дифтерийно-столбнячный (АДС, АДС–м), тетра-анатоксин (ботулинический типов А, В, Е, столбнячный), трианатоксин (ботулинический А, В, Е), секстаанатоксин (анатоксины C. perfringens, C. novyi, ботулинический типов А, В, Е, столбнячный).

5. Ассоциированные вакцины содержат антигены, разные по своей природе. Ассоциированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина (АКДС) содержит инактивированную или химическую коклюшную вакцину, дифтерийный и столбнячный анатоксины, адсорбированные на гидроокиси алюминия. Живая сухая комбинированная сыпнотифозная вакцина Е (ЖСКВ–Е) содержит высушенную живую культуру риккетсий Провачека авирулентного штамма Е в смеси с растворимым антигеном вирулентного штамма риккетсий. Холерная вакцина содержит холероген-анатоксин и О-антиген холерных вибрионов. Вакцина MMR содержит антигены возбудителей кори, эпидемического паротита и краснухи.

Получены генно-инженерные (рекомбинантные) вакцины против вирусов гепатита А и В.

Лечебные вакцины. Для лечебных целей применяют вакцины при некоторых хронических, и вяло протекающих бактериальных и вирусных заболеваниях: бруцеллёзе (инактивированная вакцина), хронической гонорее (инактивированная вакцина), герпесе (герпетическая инактивированная вакцина), стафилококковых инфекциях (стафилококковый антифагин, стафилококковая вакцина), протейной инфекции, инфекциях, вызванных условно-патогенными микроорганизмами. Вакцины применяются для лечения соматических заболеваний различной этиологии (рассеянный склероз, диабет, наркомания и др.), а также онкологических заболеваний (БЦЖ («Имурон») – для лечения рака мочевого пузыря).