- •Методические указания к самостоятельной подготовке студента.
- •План практических занятий.
- •Правила для студентов, работающих на кафедре микробиологии, вирусологии, иммунологии.
- •Обязанности дежурного.
- •Дополнительный материал к занятию. Правила микроскопии с иммерсионной системой.
- •Контрольные вопросы.
- •Техника окраска по Граму в модификации Синёва.
- •Отношение бактерий к окраске по Граму.
- •Окраска по Цилю-Нильсену.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •После изучения темы студент должен уметь.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •2. Продемонстрировать овладение умениями, полученными при изучении морфологии микробов.
- •Контрольные практические задачи по разделу «История микробиологии. Морфология микробов и вирусов».
- •Контрольные вопросы по разделу «История микробиологии. Морфология микробов и вирусов» (подробную расшифровку вопросов смотрите в занятиях 1-5).
- •План изучения темы.
- •После изучения темы студент должен уметь.
- •Дополнительная литература по разделу «Физиология микробов. Микробиологические исследования лекарственных средств» (занятия 6-14)
- •Дополнительный материал к занятию.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •После изучения темы студент должен уметь.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Контрольные вопросы.
- •Задание на самостоятельную работу.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •После изучения темы студент должен уметь.
- •Дополнительный материал к занятию.
- •Методы контроля стерильности.
- •Методы частичного обеспложивания.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Объекты микробиологического контроля, отбор проб, методика исследования, оценка результатов.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания на самостоятельную работу.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Исследование лекарственных средств, стерилизуемых в процессе производства.
- •Исследование лекарственных средств, не стерилизуемых в процессе производства.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Контрольные вопросы.
- •Контрольные практические задания по разделу «Физиология микробов. Микробиологические исследования лекарственных средств».
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Определение чувствительности бактерий к антибиотикам.
- •Диско-диффузионный метод.
- •Метод серийных разведений.
- •Метод серийных разведений антибиотика в агаризованной среде.
- •Метод е-тестов.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Метод титрования бактериофага по Грациа (на плотной питательной среде).
- •Фаготипирование бактерий.
- •Применение бактериофагов.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Дополнительный материал к занятию.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •План изучения темы.
- •После изучения темы студент должен уметь.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •План изучения темы.
- •После изучения темы студент должен уметь.
- •Дополнительный материал к занятию.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •После изучения темы студент должен уметь.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •План изучения темы.
- •После изучения темы студент должен уметь.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •План изучения темы.
- •После изучения темы студент должен уметь.
- •Контрольные вопросы.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •Занятие 37 Возбудители вирусных инфекций. Цель самоподготовки.
- •Задания для выполнения в процессе самоподготовки.
- •Работа студента на практическом занятии.
- •План изучения темы.
- •После изучения темы студент должен уметь.
- •Контрольные вопросы.
- •Самостоятельная работа студента на практическом занятии.
- •Экзаменационные вопросы по курсу микробиологии.
- •305041, Г. Курск, ул. К. Маркса, 3.
- •305041, Г. Курск, ул. К. Маркса, 3.
Метод титрования бактериофага по Грациа (на плотной питательной среде).
Питательный агар разливают в чашки Петри и подсушивают в термостате. Готовят полужидкий питательный агар по 3–4 мл в пробирке и растапливают его на водяной бане. Делают десятикратные разведения исследуемого бактериофага в изотоническом растворе хлорида натрия. Затем 0,5 мл каждого разведения бактериофага смешивают с таким же объёмом суточной бульонной культуры чувствительных к бактериофагу бактерий и выливают эту смесь в пробирку с полужидким агаром температурой 45°C. Приготовленную смесь быстро выливают на поверхность первого слоя агара в чашке Петри, где она застывает в виде тонкого слоя. После застывания второго слоя агара чашки инкубируют при 37°C в течение суток. Смеси бактериофага, культуры и полужидкого агара делают из разведений фага 102–1010, в зависимости от предполагаемого титра фага.
Не заражённые бактериофагом бактерии, размножаясь, образуют сплошной газон роста на поверхности питательного агара. Каждая инфицированная бактериофагом бактерия лизируется и освобождает потомство бактериофага, которое внедряется в интактные клетки бактерий, и весь цикл повторяется. В результате лизиса клеток на сплошном бактериальном газоне появляются «стерильные» пятна или негативные колонии бактериофага. Число этих пятен соответствует количеству фаговых частиц в засеянной смеси. Количество пятнообразующих единиц в 1 мл исходной суспензии бактериофага называется его титром.
Фаготипирование бактерий.
Метод фаготипирования имеет большое значение при эпидемиологических исследованиях, так как позволяет выявить источник и пути распространения возбудителей заболеваний. Определение фаговара выделенной чистой культуры проводят с помощью набора типовых диагностических бактериофагов. Фаговар культуры определяют по тому типовому фагу, который вызвал её лизис.
Для проведения фаготипирования исследуемую суточную культуру бактерий засевают «газоном» на поверхность питательного агара в чашки Петри, подсушивают в термостате, делят со стороны дна чашки на квадраты и наносят пипеткой по одной капле соответствующего бактериофага в тест-разведении, указанном на ампуле. В один квадрат бактериофаг не вносят, для контроля роста культуры. Чашку термостатируют при 37оС 18-20 часов, после чего оценивают результат реакции. Положительный результат реакции фаголизиса – лизис культуры в месте нанесения бактериофага («негативные» колонии) при наличии роста в контроле свидетельствует о соответствии культуры бактериофагу и принадлежности с учетом её фаголизабельности к соответствующему виду.
Применение бактериофагов.
Применяемые на практике препараты бактериофагов представляют собой фильтрат бульонной культуры соответствующих микробов, лизированных фагом, содержащий живые частицы фага, а также антигены бактерий, освободившиеся из бактериальных клеток при их лизисе. Полученный препарат – жидкий бактериофаг – должен иметь вид совершенно прозрачной жидкости желтого цвета большей или меньшей интенсивности. Препарат проходит контроль на стерильность (методом посева), безвредность и литическую активность (титр).
Диагностические бактериофаги выпускаются как в жидкой, так и в сухой форме, в ампулах. Перед началом работы сухой бактериофаг разводится.
Для лечебно-профилактических целей бактериофаги выпускаются в форме таблеток с кислотоустойчивой оболочкой, в жидком виде или в суппозиториях. Таблетированный сухой бактериофаг более стабилен при хранении и удобен при применении. Одна таблетка сухого бактериофага соответствует 20-25 мл жидкого препарата. Срок годности сухого и жидкого препарата составляет 1 год. Жидкий бактериофаг следует хранить при температуре +2 – +100С, сухой – не выше +10С, но его можно хранить в холодильнике и при отрицательной температуре.
Принятый внутрь бактериофаг сохраняется в организме в течение 5-7 дней. Как правило, приём бактериофага не сопровождается какими-либо реакциями или осложнениями. Противопоказаний к приему нет.
Бактериофаги могут применять также в виде орошений, полосканий, примочек, тампонов. Инъекционные формы бактериофагов можно вводить в стерильные полости – брюшную, плевральную, суставную и в мочевой пузырь. Существует форма выпуска бактериофагов в свечах для ректального применения.