Дополнительный материал к занятию.

Выделение чистой культуры бактерий - аэробов из материала, содержащего смесь микробов, занимает 3 дня и производится по следующей схеме:

1 день - микроскопия мазка из исследуемого материала, окрашенного по Граму - для предварительного ознакомления с микрофлорой данной смеси. Посев материала петлёй на чашку Петри с питательной средой штриховым методом для получения изолированных колоний. Засеянные чашки помещают в термостат на сутки.

2 день - изучение колоний, выросших на чашках, отбор изолированных колоний, описание их и микроскопия мазков из изолированных колоний (окраска по Граму) для проверки однородности микробов в колонии. Пересев изолированной колонии на скошенный агар для получения чистой культуры. Посевы помещают в термостат на сутки.

3 день - проверка чистоты культуры, выросшей на скошенном агаре, путем микроскопии мазков, окрашенных по Граму. При однородности исследуемых бактерий выделение чистой культуры можно считать законченным.

Контрольные вопросы.

Химический состав бактериальной клетки: содержание, локализация в клеточных структурах и биологическая роль воды, белков, нуклеиновых кислот, липоидов, углеводов, минеральных веществ. Что такое энергетический и конструктивный метаболизм (анаболизм и катаболизм)? Особенности обмена веществ бактерий. Механизм расщепления бактериями питательных веществ. Способы поступления их в клетку. Типы питания микробов. Могут ли микроорганизмы изменить тип питания? Какие типы питания у патогенных микробов? Питательные среды - для чего применяются, каким требованиям они должны соответствовать? Классификация питательных сред по составу, по консистенции, по назначению. Обычные (простые) питательные среды. Специальные питательные среды, для чего применяются, принцип их действия. Дифференциально-диагностические среды, принципы их действия, для чего применяются, примеры. Что такое рост микроба? Что такое размножение микроба? Как размножаются бактерии? Фазы роста бактериальной культуры. Размножение бактерий в непрерывно-проточной среде. Культивирование бактерий. Что такое культура бактерий, чистая культура, штамм, клон? Методы выделения чистой культуры бактерий. Рассказать поэтапно (по дням) выделение чистой культуры бактерий. Что такое колония микробов?

Задания для выполнения в процессе самоподготовки.

I. Напишите в тетради классификацию питательных сред (приведите примеры):

1. По происхождению

2. По консистенции

3. По назначению:

II. Составьте и начертите схему выделения чистой культуры бактерий по дням и укажите цель своих действий на каждом этапе.

Работа студента на практическом занятии.

1. Питательные среды. Посмотрите набор питательных сред, классифицируйте их по происхождению, консистенции, составу. Особое внимание обратите на назначение питательных сред.

2. Выделение чистой культуры бактерий (1 день). Возьмите пробирку со смесью микробов, осмотрите её. Приготовьте мазок. При работе с жидким материалом самое главное - не пролить! Держите пробирку всегда отверстием вверх, взяв из неё каплю материала, сначала закройте пробкой, поставьте в штатив и только после этого наносите взятый петлёй материал на предметное стекло. Мазок окрасьте по Граму в модификации Синёва, промикроскопируйте, зарисуйте. Затем посейте исследуемый материал на чашку с МПА. Укажите на чашке номер рабочего места и группы. Положите чашку кверху дном в ящик на подготовительном столе.

Запись в тетради. Выделение чистой культуры бактерий - аэробов (первый день). Подпись к рисунку: Мазок из смеси бактерий, окраска по Граму.

Занятие 8

Биологическое окисление микроорганизмов. Методы культивирования бактерий - анаэробов. Выделение чистых культур бактерий

(продолжение).

Цель самоподготовки.

После самостоятельного изучения темы студент должен знать:

- культуральные свойства микробов;

- устройство термостата.

Исходный уровень знаний.

Для усвоения материала необходимо знать:

- схему выделения чистой культуры аэробов и анаэробов;

- условия, необходимые для культивирования микробов;

- характеристику роста микробов на плотных и на жидких питательных средах; морфологию колоний микробов, пигменты микробов.

Цель занятия.

1. Изучить культуральные свойства бактерий.

2. Ознакомиться с особенностями бактериологического метода выделения чистых культур анаэробных микроорганизмов.

План изучения темы.

1. Повторение - схема выделения чистых культур бактерий.

2. Биологическое окисление (энергетический метаболизм) микроорганизмов: типы, механизм аэробного и анаэробного биологического окисления, классификация микроорганизмов по типу дыхания.

3. Методы культивирования анаэробов.

4. Культуральные свойства микробов:

а) условия, необходимые для культивирования данного вида (питательная среда, рН, rH₂, температура, аэробные и анаэробные условия);

б) характер роста данного вида микробов на питательных средах.

5. Пигменты микробов.

6. Термостат и его устройство.