Эталоны ответов к тестовым заданиям

Вид 1. 1.1. А. –б; 1.1. Б. – а.

1.2. – г (включение пролина вызывает изгиб полипептидной цепи, делая невозможным вращение вокруг связи между a-углеродным атомом и азотом иминогруппы);

1.3. – в (гидрофобные радикалы прячутся внутри частицы белка);

1.4. – а (рI_асп+ рI_лиз/2).

Вид 2. 2.1. – 1-а, 2-б, 3-в, 4-г; 5-е, 6-ж, 7-д; 2.2. - 1-г, 2-в, 3-б, 4-а.

Вид 3.3.1. - 4; 3.2. –4; 3.3. – 4; 3.4. – 2,4.

Вид 4. 4.1. –Д (-, +, -), 4.2 –Е (-, -, -), 4.3 – С (+, -, -).

Эталоны ответов на ситуационные задачи

Задача 1. Аминокислотный состав пептида отличается высоким содержанием диаминомонокарбоновых кислот – лизина и аргинина, в то же время, в структуре пептида отсутствуют ароматические и гетероциклические аминокислоты - фенилаланин, тирозин, гистидин и триптофан, дающие положительную ксантопротеиновую реакцию. В частности, тирозин с концентрированной азотной кислотой реагирует по следующей схеме:

желтая окраска

оранжевая окраска

Задача 2. В сильнокислой и щелочной среде осаждению белков препятствует заряд (отрицательный в кислой и положительный в щелочной). Поэтому, если рН исследуемой мочи не соответствует слабокислой реакции, можно получить ложно отрицательный результат.

Задача 3. В живой клетке процесс укладки синтезируемой полипептидной цепи - фолдинг регулируется особыми белками шаперонами. Эти белки контролируют формирование стабильной и биологически активной конформации, предотвращая образование из полипептидной цепи неспецифических клубков и агрегатов, а также участвуют в доставке белков к субклеточным мишеням.

Занятие № 3. Методы выделения и очистки белков.

Цель занятия.Освоить некоторые методы выделения и очистки белков, используемые в препаративной биохимии и лабораторной медицине. В результате освоения темы студент должен ознакомиться с методом электрофоретического разделения белков и научиться анализировать протеинограмму.

Студент должен
знать:	уметь:
-физико-химические свойства белков; -методы фракционирования белков; -методы очистки белков от низкомолеклярных примесей.	-анализировать протеинограмму; -производить очистку белка от низкомолекулярных примесей методом гель-фильтрации и диализа.

Содержание занятия:студентам предстоит ответить на вопросы тест-контроля и вопросы преподавателя; ознакомиться с методами электрофореза белка на бумаге, очистки раствора белка от низкомолекулярных примесей методом диализа и гельфильтрации на молселекте, проанализировать полученные данные и сделать выводы.

УИРС- решение ситуационных задач, обсуждение рефератов.

Методические указания к самоподготовке

Методы препаративной химии белков основаны на их физико-химических свойствах, поэтому при подготовке к занятию следует повторить физико-химические свойства белков. Особое внимание следует уделить коллоидным свойствам белков, таким понятиям как амфотерность аминокислот и белков, зависимость электрических свойств белков от аминокислотного состава и свойствам белков в изоэлектрическом состоянии. Для лучшего усвоения материала занятия, используя учебник, лекции и дополнительную литературу, выполните следующие задания.

№№	Задание	Указания к выполнению задания
1	2	3
1.	Изучите методы выделения индивидуальных белков.	1. Перечислите методы фракционирования белков, позволяющие получить индивидуальный белок. 2. Кратко сформулируйте, на каких физико-химических свойствах основаны перечисленные методы.
2.	Изучите, почему белки обладают свойствами коллоидов.	1.Выпишите способы определения молекулярной массы белков. 2.Перечислите данные, подтверждающие высокую молекулярную массу белков. 3.Чем можете подтвердить способность белков образовывать коллоидные растворы? 5.Охарактеризуйте принцип метода диализа. Какое практическое значение имеет диализ?
3.	Вспомните электрические свойства белков.	1. Вспомните механизм возникновения электрического заряда. Что такое изоэлектрическая точка? 2.Охарактеризуйте явление электрофореза белков. Запомните виды электрофореза. 3.Укажите факторы, от которых зависит скорость перемещения белковых молекул в поле постоянного электрического тока. 4. Напишите, на какие фракции разделяют белки сыворотки крови при электрофорезе на бумаге. Выпишите протеинограмму – соотношение белковых фракций - здорового ребенка и взрослого человека. 5. Изучите возможности электрофоретического разделения белков на полиакриламидном геле, принцип диск-электрофореза и его значение для разделения белков сыворотки крови.
4.	Повторите растворимость белков.	1. Выясните, чем определяется растворимость белков, и какие факторы стабилизируют белковую молекулу в растворе.
5.	Изучите метод хроматографии белков.	1.Выпишите классификацию методов хроматографического разделения белков по механизму разделения и технике проведения. Сформулируйте принцип метода адсорбционной, ионнообменной, афинной, и распределительной хроматографии. Кратко опишите процедуру гель-фильтрации и газожидкостной хроматографии.

Подготовьте к предстоящему занятию протокол, в котором отразите принцип метода и ход работы. Не забудьте оставить достаточно места для выводов после выполнения каждой работы.