Примеры ситуационных задач

Задача 1. При анализе крови уровень мочевой кислоты у пациента составил 20 мг/дл. О чем это свидетельствует? Ваш предварительный диагноз. Какие рекомендации следует дать этому пациенту?

Задача 2. При одном из видов гликогенозов – болезни Гирке – помимо симптомов, связанных с нарушениями углеводного обмена, возникает подагрический артрит и другие симптомы подагры. Объясните чем вызвано это осложнение? При ответе:

а) вспомните, работа какого фермента а, следовательно, и метаболического пути нарушается при болезни Гирке;

б) укажите, какой метаболит накапливается в клетках в этих условиях;

в) объясните, почему накопление этого вещества способно вызвать подагру.

Самостоятельная работа студентов

Кратко напишите принцип метода и технику выполнения лабораторной работы, оставив место для расчетов и выводов.

Работа № 1. Количественное определение мочевой кислоты в сыворотке крови по методу Мюллера-Зейферта.

Определение мочевой кислоты в сыворотке крови производится с диагностической целью. При подагре, пневмонии, анемии, почечной недостаточности, лечение опухолей рентгенотерапией наблюдается повышение содержания мочевой кислоты. Снижение уровня мочевой кислоты возможно при акромегалии, применении дикумарола, кортизона, салицилатов и инъекций инсулина.

В норме содержание мочевой кислоты в сыворотке крови взрослых составляет у мужчин - 0,24 – 0,50 млмоль/л (4,0-8,5мг/дл), у женщин – 0,16 – 0,40 млмоль/л (2,8-7,5 мг/дл).

Принцип метода. Мочевая кислота определяется в безбелковых фильтратах сыворотки крови по интенсивности синей окраски, развивающейся при восстановлении фосфорновольфрамого реактива.

Техника выполнения работы.

В центрифужные пробирки вносят 1 мл сыворотки крови, добавляют 8 мл дистиллированной воды, 0,5 мл 0,35М серной кислоты, перемешивают. Затем добавляют 0,5 мл 10% раствора вольфрамата натрия, опять переемешивают и через 10 мин. Центрифугируют в течение 10 мин при 1500 об/мин. После осаждения белков сыворотки крови центрифугированием ставят опытную, стандартную и контрольную пробы.

Опытная проба: 3 мл надосадочной жидкости переносят в чистую прбирку.

Стандартная проба: 3 мл 0,03М стандартного раствора мочевой кислоты (1 мл содержит 0,006 ммоль мочевой кислоты) налить в чистую пробирку.

Контрольная проба: В чистую пробирку прилить 3 мл дистиллированной воды.

Во все три пробирки добавляют 1,5 мл 10,3% раствора карбоната натрия, 1 мл фосфорновольфрамового реактива, тщательно перемешивают и через 30 мин опытную и стандартную пробы фотометрируют при длине волны 590-700 нм (красный светофильтр) в кювете длиной оптического пути 1 см против контрольной пробы.

Расчет: концентрацию мочевой кислоты рассчитывают по формуле:

С= Е_опыт./Е_станд.×Е_станд.×10, где

С – концентрация мочевой кислоты, ммоль/л;

Е_опыт. – экстинкция опытной пробы;

Е_станд.- экстинкция стандартной пробы;

С_станд. – концентрация стандартного раствора мочевой кислоты,

0,03 ммоль/л;

10 – коэффициент пересчета на объём сыворотки крови.

Работа № 2. Количественное определение мочевой кислоты

в моче.

В норме у человека с мочой выделяется 3,54-4,76 ммоль/сут (600-800 мг/сут) мочевой кислоты. У мужчин несколько больше, чем у женщин. Увеличение выведения солей мочевой кислоты наблюдается при подагре, мочекислом диатезе, некоторых гематологических заболеваниях, интенсивном лечении опухолей, питании пищей, богатой пуринами.

Принцип метода. Метод основан на способности мочевой кислоты фосфорновольфрамовую кислоту в фосфорновольфрамовую синюю, интенсивность окраски которой пропорциональна содержанию мочевой кислоты. Количество фосфорновольфрамовой кислоты определяется путем титрования красной кровяной солью.

Ход работы. В колбочку (стаканчик) поместить 1,5 мл мочи, прибавить 1 мл 20% раствора NaCO₃ и 1 мл фосфорновольфрамового реактива Фолина, перемешивать, отметить появление синего окрашивания. Содержимое титровать 0,01 N раствором красной кровяной соли (К₃[Fe(CN)₆] до исчезновения окрашивания.

При расчете учесть, что 1 мл красной кровяной соли используется на окисление 0,8 мг мочевой кислоты.

Расчет: Х = К × А × В / 1,5, где

Х- содержание мочевой кислоты, мг/сут;

К – коэффициент пересчета (1мл 0,01N раствора (К₃[Fe(CN)₆] соответствует 0,8 мг мочевой кислоты);

А – количество красной кровяной соли, пошедшее на титрование, мл;

В- суточный диурез, мл.

Работа № 3. Определение содержания гемоглобина в крови цианметгемоглобиновым методом по Драбкину.

Принцип метода. Гемоглобин окисляют в метгемоглобин (гемиглобин) железосинеродистым калием (красная кровяная соль), образующийся с ацетонциангидрином окрашенный цианметгемоглобин (гемиглобинцианид) определяют колометрически.

Ход работы. В пробирку (опыт) (осторожно!) отмерить 5 мл. трансформирующего раствора (реактив Драпкина), к нему добавить 0,02 мл крови (разведена в 251 раз). В другую пробирку (стандарт) прилить 5 мл реактива Драпкина и 0,02 мл стандартного раствора. Содержимое обеих пробирок перемешать и в течение 30 минут выдержать при комнатной температуре. Измерить экстинцию опытной и стандартной проб на ФЭКэ при длине волны 500-560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 1 см против холостой пробы (трансформирующий раствор).

Расчет содержания гемоглобина произвести по формуле:

Hb(г/л)=Е_оп/Е_ст ×С × К × 0,01, где

Е_оп – экстинкция опытной пробы;

Е_ст – экстинкция стандартного раствора;

С – концентрация гемиглобинцианида в стандартном растворе (59,75 мг/100мл);

К – коэффициент разведения крови (251);

0,01 – коэффициент пересчета мг/100 мл в г/л.

Сопоставить с нормой содержания у здоровых людей и сделать вывод.

У здоровых людей концентрация гемоглобина колеблется в следующих пределах:

- новорожденные – 210 – 225 г/л;

- дети в возрасте 1 месяца – 145 - 165 г/л;

- дети в возрасте 6 месяцев – 115 - 130 г/л;

- дети в возрасте 1 года – 110 - 120 г/л;

- дети в возрасте 14-15 лет – 130 -150г/л;

- взрослые женщины – 120 - 140 г/л, мужчины – 135 - 160г/л.

Клинико-диагностическое значение определения содержания гемоглобина в крови: снижение содержания гемоглобина в крови наблюдается при анемиях различного генеза, при острых и хронических кровотечениях, некоторых инфекционных заболеваниях; повышение – при сгущении крови, при заболеваниях, связанных с увеличением количества эритроцитов (эритремии) и др.