- •Биологическая химия Руководство к самостоятельной работе студентов
- •Введение
- •Правила работы с тестами
- •Модуль 1 «Белки. Ферменты»
- •Рекомендуемые темы реферативных сообщений
- •Методические указания к самоподготовке
- •Графологическая структура
- •3.1. Реагенты, позволяющие определить n-концевую аминокислоту -
- •3.2. Реагенты позволяющие определить с-концевую аминокислоту -
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Фотоэлектроколориметр
- •Эталоны ответов к тестовым заданиям
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Графологическая структура «Методы осаждения белка»
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов к тестовым заданиям
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Графологическая структура «Выделение и очистка белков»
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов к тестовым заданиям
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов к тестовым заданиям
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Графологическая структура «Общие свойства ферментов»
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов к тестовым заданиям
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов к тестовым заданиям
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Основы иммуноферментного анализа
- •Клинико-диагностическое значение ифа
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Эталоны ответов к тестовым заданиям
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Контрольные вопросы к модулю «Белки. Ферменты»
- •Примеры заданий тестового контроля знаний
- •Эталоны ответов
- •Модуль 2. «Биохимия питания. Общие пути катаболизма. Биоэнергетика»
- •Рекомендуемые темы реферативных сообщений
- •План занятия
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов на тесты
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Основные характеристики пищеварительных соков
- •План занятия
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •2.1. Анилиновая проба на витамин д.
- •2.2. Реакция с серной кислотой.
- •5.1. Реакция с гидросульфитом натрия.
- •5.2. Реакция с раствором уксусно-кислой меди.
- •Эталоны ответов к тестовым заданиям
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Количественное определение витаминов.
- •План занятия
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов к тестовым заданиям
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •План занятия
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний Вид 1. Выберите один наиболее правильный ответ.
- •Самостоятельная работа
- •Эталоны ответов к тестовым заданиям
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •План занятия
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестовых заданий контроля исходного уровня знаний Вид 1. Выбор одного наиболее верного ответа
- •Вид 2. Установить соответствие.
- •Примеры ситуационных задач
- •Задача 2. В эксперименте с изолированными митохондриями в качестве субстрата дыхания используется изоцитрат. Определите:
- •Эталоны ответов к тестовым заданиям
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •План занятия
- •Методические указания к самоподготовке
- •Контрольные вопросы
- •Примеры заданий тестового контроля знаний
- •Ответы на тесты
- •Модуль 3 «Структура и обмен углеводов»
- •Рекомендуемые темы реферативных сообщений
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов на тесты
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Эталоны ответов на тесты
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Контрольные вопросы
- •Примеры тест-контроля
- •Эталоны ответов на тесты
- •Модуль 4. «Структура и обмен липидов»
- •Рекомендуемые темы реферативных сообщений
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Эталоны ответов на тесты
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов на тесты
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Контрольные вопросы
- •Примеры тест-контроля
- •Эталоны ответов на тесты
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестов для контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов на тесты
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестов для контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов на тесты
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестов для контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Эталоны ответов на тесты
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Занятие № 4. Обмен сложных белков – нуклеопротеинов и хромопротеинов.
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов на тесты
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Контрольные вопросы к коллоквиуму
- •Примеры тестовых заданий
- •Эталоны ответов на тесты:
- •Модуль 6. «Взаимосвязь и регуляция обмена веществ. Гормоны»
- •Рекомендуемые темы реферативных сообщений
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний
- •Ситуационные задачи
- •Эталоны ответов на тесты
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Современные методы определения количества гормонов
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов на тесты
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры тестов контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов на тесты
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Контрольные вопросы к зачетному занятию
- •Примеры тест-контроля
- •Эталоны ответов на тесты
- •Модуль 7. «Биохимия органов и тканей»
- •Рекомендуемые темы реферативных сообщений
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Занятие № 3. Биохимия мышечной и нервной тканей.
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Примеры контроля исходного уровня знаний
- •Примеры ситуационных задач
- •Самостоятельная работа студентов
- •1. Качественное определение белка.
- •2. Качественное определение сахара в моче с помощью реактива Фелинга.
- •3. Качественное обнаружение сахара в моче при помощи индикаторной бумаги «Глюкотест».
- •4. Количественное определение белка в моче по методу Робертса-Стольникова.
- •5. Качественное определение кетоновых тел.
- •6. Качественная реакция на кровяные пигменты.
- •7. Качественное определение желчных пигментов.
- •8. Проба Петенкофера на желчные кислоты.
- •9. Проба Яффе на уробилин.
- •10. Качественное определение индикана в моче.
- •Эталоны ответов на ситуационные задачи
- •Методические указания к самоподготовке
- •Контрольные вопросы
- •Примеры тестовых заданий
- •Эталоны ответов к тестовым заданиям
- •Графологическая структура модуля «Белки. Ферменты»
- •Рекомендуемая литература
- •Журналы по биохимии
- •Некоторые референтные значения биохимических показателей жидких сред организма
- •Некоторые референтные значения биохимических показателей жидких сред организма у детей
- •Оглавление
Методические указания к самоподготовке
Вопросы, рассматриваемые на данном занятии важны для понимания метаболических изменений и лабораторной диагностики заболеваний, связанных с нарушениями функции желез внутренней секреции, и других патологических состояний.
Современные методы определения количества гормонов
До 60-х годов прошлого столетия об активности большинства гормонов, особенно белково-пептидной природы судили путем использования биологических методов – по выраженности того или иного эффекта после введения гормона. В 1960г. R. Yalow (Р. Ялоу) и S. Berson (С. Берсон) впервые предложили радиоиммунологический анализ (РИА) для определения инсулина в крови человека. Открытие данного принципа положило начало бурному развитию разработок методов количественного определения гормонов в анализируемых пробах.
К основным преимуществам радиоиммунологического анализа относятся: высокая чувствительность – способность определять минимальные количества вещества, приблизительно равные 10-14 – 10-15моль/л, специфичность, надежность, точность и др.
В основе РИА лежит принцип использования радиоактивной метки для детекции специфических комплексов (антиген-антитело), образующихся в результате иммунологической реакции с исследуемым веществом. При этом происходит конкурентное взаимодействие двух антигенов: немеченого, представляющего собой определяемый гормон, и меченого аналога этого гормона с включенной радиоактивной меткой. Связывающий агент – соответствующее тело, вступает в равноправное взаимодействие как с искомым гормоном, так и с его меченым аналогом. Связывающий агент обладает ограниченной, строго заданной емкостью, и он не может образовывать комплекс сразу со всем количеством меченного и немеченого гормонов. По закону действующих масс происходит связывание гормонов в количествах, пропорциональных их исходным концентрациям:
аГ* аГ* - Ат
Ат
аГ аГ – Ат
аГ* - гормон-антиген с радиометкой
аГ – гормон-антиген искомый, или определяемый
Ат – связующий агент (антитело).
При этом, чем выше содержание искомого (определяемого) гормона в пробе, тем меньшая часть его радиоактивно меченого аналога свяжется с антителом. Следовательно, зная количество связующего агента и меченого гормона, концентрации которых являются величиной заданной, можно рассчитать концентрацию искомого гормона.
В настоящее время разработаны также такие виды радиоиммунологического анализа как иммунорадиометрический, радиорецепторный.
Однако РИА имеет ряд недостатков, в том числе метод требует специального оснащения лабораторий для работы с радиоактивным материалом. Поэтому в начале 1970-х годов было предложено в качестве нерадиоактивного индикатора ферментная метка, когда гормон (антиген) или связующий агент (антитело) химически прочно соединен с ферментом. При этом ферментативная активность впоследствии после соответствующей обработки пропорциональна количеству определяемого гормона. В последние годы для определения гормонов используется иммунологическая реакция, где в качестве субстрата присоединяются люминофоры – вещества, светящиеся в ультрафиолете (метод иммунохемилюминесцентного анализа). Уровень свечения измеряется на специальных приборах люминометрах.
Для успешного усвоения темы выполните следующие задания:
№ п/п |
Задание |
Методические указания к выполнению задания |
1 |
2 |
3 |
1. |
Изучите гормоны гипоталамуса и гипофиза. |
|
2. |
Изучите йодированные гормоны щитовидной железы. |
|
3. |
Изучите пептидные гормоны, регулирующие кальций-фосфорный обмен. |
|
4. |
Изучите инсулин поджелудочной железы. |
|
5. |
Изучите нарушения обмена веществ при сахарном диабете. |
а) б) в) и т.д. 3. Объясните, почему при сахарном диабете нарушается использование глюкозы крови. Укажите ферментативные блоки гликолиза, гликогенеза, пентозофосфатного окисления. 4. Ответьте, почему при сахарном диабете снижается интенсивность цикла трикарбоновых кислот, усиливается глюконеогенез. 5. Напишите реакцию гликозилирования белков при сахарном диабете. 6. Изучите причины, механизмы и последствия усиления при сахарном диабете липолиза и β-окисления жирных кислот. 7. Каковы нарушения использования ацетил-КоА при сахарном диабете? Объясните причину кетонемии и кетонурии при сахарном диабете. 8. Объясните, почему недостаточность инсулина приводит к нарушению биосинтеза нуклеиновых кислот и белка, к усилению протеолиза тканевых белков и катаболизма аминокислот. 9. Дайте определение понятиям «сахарная кривая», почечный «сахарный порог». |
6. |
Изучите структуру и влияние на обмен веществ глюкогона. |
|
7. |
Изучите гормоны мозгового слоя надпочечников. |
а) 1) б) 2) в) и др. 3) и т.д. 3. Перечислите биохимические эффекты адреналина в печени, мышечной ткани и жировой ткани. 4. Представьте схему аденилатциклазного пути мобилизации гликогена и нейтрального жира при взаимодействии адреналина с β-рецепторами. |
8. |
Изучите пептидные гормоны, регулирующие кальций-фосфорный обмен. |
|
Подготовьте к занятию протокол лабораторных работ, выписав кратко принцип метода, технику проведения качественных реакций и количественной оценки гормона на практическом занятии, оставляя место для расчетов и резюме.