- •I. Введение. Грипп — заболевание с неизменяющейся симптоматикой, вызываемое изменяющимся вирусом
- •II. Таксономия вирусов гриппа
- •IV. Структурное и функциональное родство вирусов гриппа с другими рнк-содержащими вирусами
- •V. Антигенная изменчивость вируса гриппа и ее отличие от антигенной изменчивости других инфекционных агентов
- •VI. Нерешенные вопросы
- •Структура вируса гриппа
- •I. Введение
- •1. Число и функции полипептидов
- •4. Нейраминидаза
- •5.Белок нуклеокапсида
- •7. Количество полипептидов в вирионе
- •8. Вирусы гриппа в и с
- •1. Гемагглютинин
- •2. Нейраминидаза
- •IV. Сборка вирионов
- •V. Заключение. Модель вириона гриппа
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Гемагглютинин
- •II. Реакция гемагглютинации
- •1. Количественное определение гемагглютинации
- •2. Гемадсорбция
- •3. Ингибирование гемагглютинации
- •III. Структура гемагглютинина
- •1. Химический состав изолированных гликопептидов
- •2. Антигенные свойства гликопептида hAt
- •4. Структура субъединицы на
- •5. Антигенная гомогенность субъединиц на
- •1. Моновалентный гемагглютинин
- •2. Агрегация и диссоциация моновалентного гемагглютинина
- •IV. Функции гемагглютинина
- •V. Заключение
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Нейраминидаза
- •II. Специфичность нейраминидазы
- •III. Субстраты для нейраминидазы
- •IV. Химические свойства нейраминидазы
- •V. Содержание нейраминидазы в оболочке вируса
- •1. Использование протеолитических ферментов
- •2. Использование детергентов
- •VI. Свойства изолированной нейраминидазы а. Состав аминокислот
- •VII. Структура нейраминидазы
- •VIII. Антигенные свойства нейраминидазы
- •IX. Лектины и нейраминидазы
- •X. Ингибиторы активности нейраминидазы
- •XI. Роль нейраминидазы
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Активность транскриптазы в клетках и вирионах гриппа
- •I. Введение
- •II. Активность рнк-полимеразы в инфицированных клетках
- •IV. Заключение
- •Рибонуклеиновые кислоты вирусов гриппа
- •I. Введение
- •II. Методы
- •1. Экстракция рнк из вирионов
- •1. Анализ экстрагированной рнк с помощью градиентного центрифугирования
- •2. Анализ экстрагированной рнк с помощью электрофореза в полиакриламидном геле (паагэ)
- •IV. Комплекс рнк с белком (рнп) а. Физические и химические свойства
- •2, Созревание и упаковка рнк в вирионы
- •1. Внутриклеточная локализация вкРнк
- •2. Кинетика синтеза вкРнк
- •3. Физические свойства информационной рнк (мРнк)
- •VI. Действие ингибиторов на синтез рнк
- •VII. Заключение
- •Генетика вируса гриппа
- •I. Введение. Исторический обзор
- •1. Исследования по генетике, проведенные Burnet и сотрудниками
- •2. Исследования по генетике, проведенные Hirst и Gotlieb
- •II. Геном вируса гриппа
- •III. Мутации, изменчивость, адаптация
- •1. Модификация вирусных гликопротеидов
- •2. Модификация вирусной оболочки
- •3„ Модификации с помощью протеолитических ферментов
- •1964) Или к гуанидвнгидрохлориду (David-West, 1973) явля
- •2. Фенотипы, относящиеся к нейраминидазе
- •3. Морфология вириона
- •1. Чувствительность к клетке-хозяину
- •2. Патогенность
- •3. Механизм рекомбинации
- •10% От выхода вируса при разрешающей температуре. Шля1
- •V!. Фенотипическое смешение и гетерозигозис
- •VII. Изучение функции генов с помощью ts-мутантов
- •VIII. Заключение
- •Репликация вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Адсорбция, проникновение, «раздевание» вируса
- •III. Транскрипция а. Последовательность синтеза рнк
- •2. Циклогексимид
- •3. Глюкозамин
- •IV. Синтез вирусных белков
- •2. Белок нуклеокапсида
- •3. Неструктурные белки
- •4. Мембранный м-белок
- •5. Гемагглютинин
- •VI. Синтез липидов
- •VII. Сборка (см. Также гл. 2)
- •IX. Неправильные формы размножения
- •Культивирование вирусов гриппа человека в лабораторных условиях, круг хозяев среди лабораторных животных и выделение вируса из клинического материала
- •I. Введение
- •II. Культивирование вирусов в лабораторных условиях
- •1. Продуктивная инфекция
- •2. Абортивная инфекция
- •3. Персистентная инфекция
- •4. Параметры инфекции
- •IV. Выделение вируса
- •Антигенная изменчивость вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Грипп в историческом аспекте (см. Также гл. 15)
- •III. Свойства генома вируса гриппа
- •IV. Субъединицы гемагглютинина
- •V. Механизм антигенного дрейфа
- •1955, 1956; Magill, 1955; Hamre et al., 1958). Эпидемиологиче
- •1956, 1957; Takatsy, Furesz, 1957), антигены постепенно за
- •VI. Механизм антигенных сдвигов (значительных антигенных изменении)
- •VII. Дополнительные доказательства,
- •2. Естественная передача вируса и селекция
- •3. Селекция и передача «нового» вируса гриппа в системе in vivo
- •1. Антигенные соотношения между вирусами гриппа человека, низших млекопитающих и птиц
- •2. Круг хозяев
- •Иммунология гриппа
- •I. Введение
- •II. Проявления иммунитета
- •1. Устойчивость к инфекции
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •4. Механизм действия антител к na
- •V. Влияние антигенного дрейфа на иммунитет
- •VII. «первородный антигенный грех»
- •VIII. Клеточный иммунитет и грипп
- •IX. Заключение
- •Грипп у человека
- •2. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа а
- •3. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа в
- •7. Изменения бактериальной флоры
- •8. Функция легких при неосложненном гриппе
- •9. Выделение больными вируса в окружающую среду
- •10. Интерферон
- •11. Продукция антител
- •1. Пневмония
- •2. Острые заболевания нижних дыхательных путей у детей
- •3. Обострение хронического бронхита
- •III. Экспериментальная гриппозная инфекция у человека
- •3. Продукция интерферона при заболевании
- •IV. Выводы и заключение
8. Функция легких при неосложненном гриппе
При неосложненном гриппе наблюдались значительные, хотя и обратимые ограниченные нарушения вентиляции легких. Kennedy и соавт. (1965) провели исследование функции легких у 30 новобранцев, у которых было установлено заболевание гриппом, и обнаруживали кратковременное, «о достоверное уменьшение объема воздуха при форсированном выдохе (0,75 с) и, следовательно, произвольной вентиляции легких. Во время эпидемии гриппа, вызванного вирусом А (H3N2) в 1967—1969 гг., Johanson ,и соавт. (1969) провели серийное исследование функции легких у 10 ранее здоровых взрослых, заболевших гриппом, не осложненным пневмонией. Отношение остаточного объема к общей емкости легких было несколько увеличено у 6 больных. При усиленном вдохе и выдохе у 4 больных общая жизненная емкость была меньше 85% от их обычной. Кроме того, артериальное Ро„ было низким у 7 больных, что сочеталось с повышением разности альвеолярного и артериального напряжения кислорода. При введении расширяющего бронхи аэрозоля не наблюдалось заметных изменений. Horner и Gray (1973) изучали 20 больных на протяжении 2—4 нед после острого заболевания, которое не было строго идентифицировано как грипп, но имело место во время эпидемии 1968 г. Было обнаружено, что диффузионная способность для окиси углерода была снижена при лервоначально1М измерении, но нормализовалась у всех больных, кроме 4, в течение 2—3 мес.
Camner и соавт. (1973) изучали трахеобронхиальный клиренс у больных гриппом, используя тефлоновый аэрозоль, меченный технецием-99. Клиренс был снижен у 6 .больных по сравнению с девятью здоровыми лицами; это различие исчезло в течение 1 мес. Picken и соавт. (1972) показали, что скорость потока воздуха и сопротивление дыхательных путей у 3 больных с серологически доказанным гриппом В соответствовали норме, но частотно-зависимую .компоненту общего легочного сопротивления эти авторы рассматривали как указание на небольшие изменения дыхательных путей, которые сохранялись в течение 2 мес.
Недавно Hall и соавт. (1974) сообщили об изменениях сопротивления периферических дыхательных путей у лиц с доказанными случаями заболевания гриппом, вызванного вирусом А/Порт Чалмерс/73 (H3N2). Резкие изменения ча-стотио-эавиоимой компоненты общего легочного сопротивления отмечались у тех 9 из 13 нормальных взрослых, у кото-
рых полная клиническая картина развернулась на 3—10-й день болезни (57). У всех больных частотно-зависимая компонента общего сопротивления легких нормализовалась в течение 3—5 нед по окончании острого 'периода заболевания.
Эти данные 'показывают, что грипп, внешне протекающий без осложнений, часто сопровождается изменениями функции легких, вероятно, обусловленными проникновением возбудителя в глубокие дыхательные пути, несмотря на отсутствие изменений, выявляемых при рентгенологическом и физикаль-ном исследованиях.
9. Выделение больными вируса в окружающую среду
а) Сбор проб. Во многих случаях грипп можно диагностировать по клиническим данным, особенно если известно об эпидемии гриппа в данной местности. Однако для случаев
с необычной -клинической картиной или случаев .необычной тяжести, а также для установления самого факта наличия вспышки" гриппа в данной местности, желательна специфическая диагностика. Лучшим методом для специфической диагностики в отдельных случаях является выделение вируса, 'поскольку серологический диагноз требует длительного времени в связи с необходимостью иолучения/сыворотки рекой-валесцента. Вероятность выделения вируса гриппа уменьшается после 3-го дня заболевания, поэтому пробы для его выделения следует брать как можно раньше после появления симптомов. Пробы молено брать из носоглотки в виде мазков или смывов. Кроме того, мокрота или отделяемое трахеи, если их можно получить, являются источниками вируса. Смывы из носоглотки ■— оптимальные пробы для выделения вируса у добровольцев, специально обученных правильно осуществлять эту процедуру. Однако некоторым больным можно рекомендовать технику комбинированных носоглоточных мазков. Для этого сухой ватный тампон вводят в полость носа; до тех пор, пока рука не почувствует сопротивления. Затем слизистую оболочку полости носа энергично протирают круговым движением. Вторым сухим ватным тампоном энергично протирают миндалины и заднюю стенку глотки. Оба тампона помещают в одну пробирку с мясным бульоном, содержащим 0,5% бычьего альбумина или другую подходящую для транспортировки среду, например холодный триптозный бульон с 0,5% желатином. Если образец должен быть доставлен в лабораторию, его следует поместить на лед при условии, что время транспортировки не превышает 48 ч. В 'Противном случае образец необходимо заморозить при —70 °<С и 'перевозить в сухом льду. Подробные серологические методики и способы выделения вируса представлены в гл. 9 и 11.
В настоящее время в США имеется достаточное число> лабораторий при больницах и учреждениях здравоохранения,, так что методики выделения вируса доступны почти для каждого врача. Кроме того, правильно собранные пробы можно-направлять в Центр по борьбе с заболеваниями в Атланте,, штат Джорджия. Для диагностики использовали экспресс-иммунофлюоресценцию, но этот метод не нашел широкого' применения1. Tateno и соавт. (1965) показали, что с помощью1 иммунофлюоресценции можно диагностировать грипп, вызванный вирусами .гриппа А и В в течение нескольких часов.
б) Выделение вируса в окружающую среду в течение заболевания. В большинстве случаев вирус гриппа легко удается выделить, используя описанные методики. Wingfield и соавт. (1969) в 93 из 95 серологически подтвержденных случаев выделяли вирус гриппа с помощью мазков, собираемых из глотки в течение 2 дней подряд. Togo и .соавт. (1970) сообщили о выделении вируса у 48 взрослых больных при естественной гриппозной инфекции. Мазки и смывы из глотки брали ежедневно в течение 5 дней и использовали для заражения куриных эмбрионов с целью обнаружения вируса. У большинства больных (от 63 до 100%) удавалось выделить вирус в каждый из этих 5 дней, причем в противоположность данным, полученным большинством других исследователей, после 2-го дня болезни -число больных, выделяющих вирус, не уменьшилось.
Knight и соавт. (1970) отметили высокий процент положительных результатов [Выделения вируса в ранний период заболевания и последующее снижение частоты выделения у группы взрослых мужчин пр« естественной гриппозной инфекции (58). Эти данные в большой степени соответствуют клиническим наблюдениям, согласно которым вирус после 3—4 дней болезни выделяется редко. Кроме того, как
показано на. этом рисунке, количество вируса в респиратор*-НО.М отделяемом быстро снижается от максимального значения, равного в среднем 3,0 lgTKHflso1 на 1 мм.
в) Виремия. Поскольку вирус гриппа был впервые обнаружен во внелегочных тканях человека, предположили наличие виремии; данные, поддерживающие эту точку зрения, суммированы Blattner (1959). Поскольку при гриппе преобладают общие проявления и часто имеет место озноб, можно было бы ожидать наличие виремии в большом проценте случаев. Виремия, однако, была обнаружена только в несколь1 ких случаях. Naficy (1963) выделил вирус гриппа из смыва глотки и сгустка крови, полученных на 2-й день после госпитализации 40-летнего больного с классическим синдромом гриппа без осложнений. Вирус выделяли на культуре клеток почек макак резусов и на куриных эмбрионах. Lehman и Gust (1971) выделили вирус гриппа Гонконг (H3N2) из крови 2 больных, страдавших первичной вирусной гриппозной пневмонией. После смерти одного из больных вирус выделили из тканей легких, печени, селезенки, а также мазков, взятых при вскрытии из носоглотки и трахеи. В данном случае интересно то, что пробы крови брали в гепарин и осаждали в 1% декстране. Вирус был выделен при этом как из плазмы, так и из лейкоцитов. Khakpour и соавт. (1969) выделили вирус гриппа типа А у больного неосложненным гриппом. Lozhkina и соавт. (1969) сообщили о выделении вируса у 3 больных, на 3-й и 4-й день после появления клинических симптомов. Кроме того, вирус гриппа типа А был выделен из сыворотки, взятой на вскрытии из легочной вены (Weillings et al., 1973). Имеются сообщения о нескольких неудачных попытках выделить вирус из крови, в частности Kilbourne (1969), а также Minuse и соавт. (1962). Gresser и Dull, как сообщает Naficy (1963), не смогли выделить вирус из отмытой фракции лейкоцитов, полученных у 9 больных. Вероятно, виремия при гриппе — явление кратковременное, и возможность обнаружить ее частично связана с наличием или отсутствием сывороточных ингибиторов.