IX. Лектины и нейраминидазы

Конканавалин А, являясь лектином и фитогемагллютини-ном, ингибирует, подобно специфическим антителам, актив-% ность NA* вируса гриппа в случае, когдавкачествесубстрата : используют высокомолекулярные соединения, такие, как фе-: гуин (Palese et al., 1973; Zalan et al., 1974). Конканавалин А .агглютинирует вещества, имеющие в своем составе a-d-плю-копиранозидные, a-d-маннопиранозидные и ia-d-фруктофура-нозидные ядра (Goldstein et al., 1965; Goldstein, 1965). Как и у антител, линия преципитации NA* может быть обна-, ружена при иммунодиффузии с использованием низжомолеку-лярного хромофорного субстрата МФН, если вместо антисыворотки взять раствор конканавалина А, а диффузию прово-. дить против разрушенного вируса. Это явление имеет место, даже несмотря на то, что конканавалин А подавляет активность NA* при использовании высокомолекулярного субстрата (Palese et al., 1973). Таким образом, конканавалин А ведет себя подобно антинейраминидазньщ антителам, т. е. блокирует активный центр фермента не непосредственно, а за счет стер'Ического эффекта.

jRott и соавт. (1972) продемонстрировали преципитацию NA* с помощью конканавалина А, полагая, что этот эффект связан с взаимодействием конканавалина с одним из поверхностных компонентов. Эти авторы, .кроме того, показали, что добавление конканавалина А к фибробластам куриного эмбриона, инфицированным вирусом FPV, предотвращает оборку или отделение вируса от клетки. Если вирус разрушался с помощью тритона Х-100, то гемагглютинирующая активность обнаруживалась в супернатанте, a NA* выпадала в осадках вместе с конка'навалином А. Однако, если NA* изолировали с помощью протеолитического фермента, только 7з ее осаждалась «онканавалином А, а 2/з оставались в растворе. Следовательно, при лротеолитическом выделении NA* от нее отщепляется фрагмент с высоким содержанием углеводов, как это уже было показано Lazdins и соавт. (1972), которые использовали в своей работе другие методы.

Ранее Zalan и соавт. (1974) высказали предположение, что активность NA* блокируется конканавалином А через взаимодействие с гемагглютинином. Однако изолированная NA* блокировалась в той же степени и тем же образом, что и NA* in situ.

Была обнаружена штаммовая зависимость ингибирования с помощью конканавалина А. Вероятно, углеводные остатки NA на поверхности вир иона легкодоступны и высвобождение фермента не обнажает .какие-либо скрытые ранее области. Кроме того, изолированная NA* может адсорбироваться на сефарозу с ковалентно связанным с ней (конканавалином А (фирма «Pharmacia», Швеция), а НА* не обладает такой способностью (Zalan, персональное сообщение). Работы Rott и соавт., а также Zalan показали, что углеводные компоненты NA* и iHA* существенно различны.

Нейраминидаза, как и НА*, адсорбируется колонкой с фи-тогемагглютинином, выделенным из Lens culinaris (Hayman et al., 1973). Этот лектин чувствителен к присутствию глюкозы, маннозы и стерически подобным им остаткам Сахаров (Stein et al., 1971). Исследования с использованием лектинов должны помочь выяснить локализацию активного центра в молекуле NA и получить информацию о природе ее углеводной части.