- •I. Введение. Грипп — заболевание с неизменяющейся симптоматикой, вызываемое изменяющимся вирусом
- •II. Таксономия вирусов гриппа
- •IV. Структурное и функциональное родство вирусов гриппа с другими рнк-содержащими вирусами
- •V. Антигенная изменчивость вируса гриппа и ее отличие от антигенной изменчивости других инфекционных агентов
- •VI. Нерешенные вопросы
- •Структура вируса гриппа
- •I. Введение
- •1. Число и функции полипептидов
- •4. Нейраминидаза
- •5.Белок нуклеокапсида
- •7. Количество полипептидов в вирионе
- •8. Вирусы гриппа в и с
- •1. Гемагглютинин
- •2. Нейраминидаза
- •IV. Сборка вирионов
- •V. Заключение. Модель вириона гриппа
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Гемагглютинин
- •II. Реакция гемагглютинации
- •1. Количественное определение гемагглютинации
- •2. Гемадсорбция
- •3. Ингибирование гемагглютинации
- •III. Структура гемагглютинина
- •1. Химический состав изолированных гликопептидов
- •2. Антигенные свойства гликопептида hAt
- •4. Структура субъединицы на
- •5. Антигенная гомогенность субъединиц на
- •1. Моновалентный гемагглютинин
- •2. Агрегация и диссоциация моновалентного гемагглютинина
- •IV. Функции гемагглютинина
- •V. Заключение
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Нейраминидаза
- •II. Специфичность нейраминидазы
- •III. Субстраты для нейраминидазы
- •IV. Химические свойства нейраминидазы
- •V. Содержание нейраминидазы в оболочке вируса
- •1. Использование протеолитических ферментов
- •2. Использование детергентов
- •VI. Свойства изолированной нейраминидазы а. Состав аминокислот
- •VII. Структура нейраминидазы
- •VIII. Антигенные свойства нейраминидазы
- •IX. Лектины и нейраминидазы
- •X. Ингибиторы активности нейраминидазы
- •XI. Роль нейраминидазы
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Активность транскриптазы в клетках и вирионах гриппа
- •I. Введение
- •II. Активность рнк-полимеразы в инфицированных клетках
- •IV. Заключение
- •Рибонуклеиновые кислоты вирусов гриппа
- •I. Введение
- •II. Методы
- •1. Экстракция рнк из вирионов
- •1. Анализ экстрагированной рнк с помощью градиентного центрифугирования
- •2. Анализ экстрагированной рнк с помощью электрофореза в полиакриламидном геле (паагэ)
- •IV. Комплекс рнк с белком (рнп) а. Физические и химические свойства
- •2, Созревание и упаковка рнк в вирионы
- •1. Внутриклеточная локализация вкРнк
- •2. Кинетика синтеза вкРнк
- •3. Физические свойства информационной рнк (мРнк)
- •VI. Действие ингибиторов на синтез рнк
- •VII. Заключение
- •Генетика вируса гриппа
- •I. Введение. Исторический обзор
- •1. Исследования по генетике, проведенные Burnet и сотрудниками
- •2. Исследования по генетике, проведенные Hirst и Gotlieb
- •II. Геном вируса гриппа
- •III. Мутации, изменчивость, адаптация
- •1. Модификация вирусных гликопротеидов
- •2. Модификация вирусной оболочки
- •3„ Модификации с помощью протеолитических ферментов
- •1964) Или к гуанидвнгидрохлориду (David-West, 1973) явля
- •2. Фенотипы, относящиеся к нейраминидазе
- •3. Морфология вириона
- •1. Чувствительность к клетке-хозяину
- •2. Патогенность
- •3. Механизм рекомбинации
- •10% От выхода вируса при разрешающей температуре. Шля1
- •V!. Фенотипическое смешение и гетерозигозис
- •VII. Изучение функции генов с помощью ts-мутантов
- •VIII. Заключение
- •Репликация вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Адсорбция, проникновение, «раздевание» вируса
- •III. Транскрипция а. Последовательность синтеза рнк
- •2. Циклогексимид
- •3. Глюкозамин
- •IV. Синтез вирусных белков
- •2. Белок нуклеокапсида
- •3. Неструктурные белки
- •4. Мембранный м-белок
- •5. Гемагглютинин
- •VI. Синтез липидов
- •VII. Сборка (см. Также гл. 2)
- •IX. Неправильные формы размножения
- •Культивирование вирусов гриппа человека в лабораторных условиях, круг хозяев среди лабораторных животных и выделение вируса из клинического материала
- •I. Введение
- •II. Культивирование вирусов в лабораторных условиях
- •1. Продуктивная инфекция
- •2. Абортивная инфекция
- •3. Персистентная инфекция
- •4. Параметры инфекции
- •IV. Выделение вируса
- •Антигенная изменчивость вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Грипп в историческом аспекте (см. Также гл. 15)
- •III. Свойства генома вируса гриппа
- •IV. Субъединицы гемагглютинина
- •V. Механизм антигенного дрейфа
- •1955, 1956; Magill, 1955; Hamre et al., 1958). Эпидемиологиче
- •1956, 1957; Takatsy, Furesz, 1957), антигены постепенно за
- •VI. Механизм антигенных сдвигов (значительных антигенных изменении)
- •VII. Дополнительные доказательства,
- •2. Естественная передача вируса и селекция
- •3. Селекция и передача «нового» вируса гриппа в системе in vivo
- •1. Антигенные соотношения между вирусами гриппа человека, низших млекопитающих и птиц
- •2. Круг хозяев
- •Иммунология гриппа
- •I. Введение
- •II. Проявления иммунитета
- •1. Устойчивость к инфекции
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •4. Механизм действия антител к na
- •V. Влияние антигенного дрейфа на иммунитет
- •VII. «первородный антигенный грех»
- •VIII. Клеточный иммунитет и грипп
- •IX. Заключение
- •Грипп у человека
- •2. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа а
- •3. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа в
- •7. Изменения бактериальной флоры
- •8. Функция легких при неосложненном гриппе
- •9. Выделение больными вируса в окружающую среду
- •10. Интерферон
- •11. Продукция антител
- •1. Пневмония
- •2. Острые заболевания нижних дыхательных путей у детей
- •3. Обострение хронического бронхита
- •III. Экспериментальная гриппозная инфекция у человека
- •3. Продукция интерферона при заболевании
- •IV. Выводы и заключение
1964) Или к гуанидвнгидрохлориду (David-West, 1973) явля
ется, вероятно, свойством НА*. Но стабильность по отноше
нию к обработке трипсином, т. е. ж протеолитическому отщеп
лению шипов НА* от оболочки, по-видимому, не определяет
ся одним только НА*, так как это свойство может -быть отделено
■от серотипа НА* ('Kilbourne, 1963; Kilbourne et al., 1972).
г) Сродство к рецептору. Способность вируса агглютини
ровать эритроциты различных видов животных или эритро
циты, обработанные RDE, определяется главным образом
■сродством НА* к рецептору. Однако видимая гемагглютина-
ция, будучи комбинацией процессов прикрепления вируса к
рецептору и последующей элюции в процессе ферментативного расщепления вещества рецептора, может обусловливаться и NA*. Это можно видеть на примере Х7 (НОШ)-реком-бинанта между штаммами NWS (H0N1) и A/RI/5+/57 (H2N2). Несмотря на неспособность обоих родительских вирусов элюировать с куриных эритроцитов, рекомбинант Х7 быстро элюирует с них. Этот «новый» фенотип, приобретаемый в ходе генетического взаимодействия, получается, по-видимому, из соединения низкого по сравнению с Н2 сродства НО к рецепторам эритроцитов с высокой нейраминидазной активностью N2 (Laver, Kilbourne, 1966). Сродство НА* к определенным рецепторным веществам обнаруживается иногда по чувствительности « этим веществам реакции торможения гемагглютинации. Прогретые препараты WSE были чувствительны к муцину слюнных желез овец, а прогретые препараты Mel нечувствительны. Эти свойства были связаны с ■серотилом НА* соответствующих вирусов (раздел IA, 1в). Имеются два противоположных типа штаммов вируса H2N2, выделенных в 1957 г., которые резко отличаются по чувствительности к ингибитору, содержащемуся в нормальной лошадиной сыворотке (Choppin, Tamm, 1960). Косвенные данные указывают на то, что это различие присуще НА*, а не NA*, вероятно, вследствие различного сродства гемагглютининов ■к ингибитору (Choppin, Tamm, 1960; Sugiura et al., 1961; McCahon, Schild, 1971). Интенсивная попытка отделить в процессе генетической рекомбинации чувствительность к ингибитору от серотипа НА* оказалась тщетной (Kiibourne, неопубликованные данные).
Поскольку НА* является продуктом одного гена, то в случае мутации можно наблюдать совместное изменение приведенных выше маркеров (а, Ь, с и d), что подтверждается примером мутации М+ к M+d (раздел IA, 1в).
2. Фенотипы, относящиеся к нейраминидазе
Хотя не решено, состоит NA* из одного или двух типов полипептидо'В, до сих пор нет генетических данных, предполагающих ее двойной генетический контроль. Заметные различия в количествах NA*, приходящихся на вир ион, будут описаны далее (см. раздел IVA, 2г).
а) Серотип. Серотип может быть идентифицирован по ре
акции ингибирования NA*, уменьшению размеров бляшек
или по иммунодиффузии. Иногда его можно выявить также
по торможению реакции гемагглютинацин.
б) Стабильность. Термостабильность может быть провере
на непосредственно in vitro (Drzeniek et al., 1966; Palese
■et al., 1974). До разработки нейраминидазной реакции in vit
ro в основном для определения термостабильности NA* в ка
честве маркера часто использовали способность фермента
переходить в индикаторное состояние под действием определенного ингибитора прл условии, что /гемагтлютинирующая активность не разрушается при нагревании и что гемагглю-тинил действительно не имеет сродства к упомянутому ингибитору. Было показано, что стабильность по отношению к гуанидингидрохлориду (коррелирует с серотипом NA* (David-West, 1973).
в) Активность фермента. Низкую активность NA* штаммов NWS и WSN, резко отличающуюся от высокой активности других штаммов вируса, часто использовали в качестве маркера (Burnet, Edney, 1951; Appleby, 1952; Burnet, Lind, 1955a, b; Hobson <et al., 1968). Однако активность фермента определяется также субстратами. NA* штамма WSN, активность которой была низка при использовании в качестве субстрата фетуина, оказалась столь же активной, как и у N2-co-держащих штаммов вируса, при испытании ее на низкомолекулярном синтетическом субстрате — метоксифенилацетил-а-нейраминовой кислоте (Palese et al., 1973). Скорость элюции вируса с эритроцитов частично определяется активностью NA*, но, кроме того, другим вовлеченным в этот процесс фактором является сродство НА* к рецепторам эритроцита. Биохимические параметры активности NA*, такие, как оптимум рН, Км и специфичность к субстрату, также могут служить генетическими маркерами. NA* штамма NWS по сравнению с NA* штамма WS -проявляла ограниченный диапазон специфичности к субстрату. Фермент NWS был активен на а-гликопро-теине человека или овомуцине, но был неспособен .отщеплять сиаловую кислоту от муцина подчелюстной железы свинья. WS был активен на всех трех субстратах. Поскольку муцин подчелюстной железы свиньи содержит главным образом ]\[-гли|Колил1нейраминовую кислоту, предполагалось, что WS может высвобождать как N-ацетил-, так и N-гликолилнейр-аминовую кислоту, тогда как NWS может освобождать только N-ацетюювую форму (Jameson, Levine, 1965).
г) Количество нейраминидазы, вмещаемой вирионом. Существует ряд данных, указывающих на то, что имеется различие в количествах NA*, синтезируемой в зараженных клетках и включаемой в вирион (Webster et al., 1968; Webster, Campbell, 1972; Palese, Schulman, 1974; Mowshowitz, Kilbourne, 1974). Очевидно, это является генетически детерминированным свойством штамма. Удовлетворительного объяснения этого озадачивающего феномена с точки зрения генетики в настоящее время нет.