4. Структура субъединицы на

Схема строения субъединицы НА, базирующаяся на описанных в этой главе экспериментальных данных, представлена на рас. 13 и изображает субъединицу НА как молекулу гликопротеида с молекулярной массой около 80 000 с участком, чувствительным к действию трипсина, расположенным на расстоянии */з от конца молекулы. Гидрофобная область расположена у одного из концов субъединицы НА. Расщепление трипсинчувствятельвой связи (или связей) приводит к образованию двух гликопептидов, HAi и НА2, связанных друг с другом с помощью дисульфидных мостиков. Основываясь на содержании цистеина в гликопептидах НА2, приведенных в табл. 9, можно заключить, что не более четырех дисульфидных связей соединяют ее с гликопептидом HAi1. Восстанавливающие агенты разделяют эти расщепленные субъединицы на два лолипептида — НА] и НА2. Полипептид HAi содержит основную часть углеводной компоненты, а субъединица НА2 обладает гидрофобными свойствами. Некоторые из олигосахаридов, присоединенных как к НАЬ так и к НА2, имеют на конце галактозу, и к ним могут быть присоединены остатки сиаловой кислоты. Один или большее число антигенных центров расположены полностью на гликопептиде НАь а один дополнительный антигенный центр показан в составе НА2. Область связывания эритроцитов также локализована на НАь хотя НА2-область. молекулы может играть существенную роль при образовании активных олигомеров.

При расщеплении полипептида НА полипептид НА2, вероятно, отщепляется от его карбоксильного конца (Skehel, Waterfield, 1975), поскольку в результате расщепления образу-

ется N-'конец полипептида НА2 ;и С-конец полипептида i Skehel и Waterfield сравнили последовательность первых 10 N-.концевых аминокислотных остатков лолипептида НАЬ изолированного из трех антигенно различных штаммов вируса гриппа человека типа А. Последовательность аминокислот оказалась одинаковой за исключением одного или двух положений. Одинаковая последовательность аминокислот была также обнаружена для N-конца полипептида -НА2) выделенного из антигенно различных гемагглютининов. Было исследовано 5 штаммов вируса гриппа человека типа А и один штамм вируса гриппа типа В. Исследованный участок полипептида включал в основном гидрофобные аминокислотные остатки. В составе этого участка был, кроме того, найден палиндром из 7 аминокислот, который как полагают Skehel и Waterfield (1975), может служить участком узнавания для протеаз, расщепляющих субъединицу НА с образованием частей HAi и НА2.

Эти результаты, совместно с данными Laver и Webster (1972, 1973) по изучению вариабельности пептидных карт после расщепления трипсином, указывают на то, что последовательность аминокислот в некоторых частях молекулы гемагглютинина высококонсервативна, в то время как последовательность 1в других участках этой молекулы лабильна. Возможно, именно те области, в которых последовательность аминокислот меняется, ответственны за антигенную изменчивость, в то время как стабильные участки служат для поддержания трехмерной структуры активного гемагглютинина. В результате дальнейших, более интенсивных, исследований последовательности аминокислот в гемагглютинине, вероятно, будут выявлены размер вариабельного участка (или участков) в нем и доля аминокислот, которые могут быть заменены без нарушения структуры и функции субъединицы НА.