2. Белок нуклеокапсида

NP-белок связывается с 'вирусной РНК, образуя РНП-антиген. Это верно для NP-белка, выделенного не только из вириона, но.и из зараженной клетки (Schafer, 1957). 'Серологическими средствами он может быть впервые выявлен, при-

мерно через 3 ч после заражения, за час до появления гемаг-глютинина (Breitenfeld, Schafer, 1957). По прошествии этого времени титр РНП-антигена существенно не увеличивается. Это может происходить вследствие равновесия между новым синтезом и включением в зрелые частицы. По метке NP-белок может 'быть обнаружен в зараженных клетках в течение 2-го часа после инфекции (Scholtissek, Rott, 1961; Krug, 1972).

С помощью флюоресцирующих антител РНП-антиген сначала обнаруживается в ядрах. Позже он появляется и в цитоплазме (Breitenfeld, Schafer, 1957). При определенных условиях, таких, как абортивная инфекция (Franklin, Brieten-feld, 1959), в присутствии р-флюорофенилаланина (Zimmer-mann, Schafer, 1960), или в условиях феномена фон-Магнуса (Rott, Scholtissek, 1963), РНП-антиген остается в ядрах.

Раннее накопление РНП-антигена в ядрах зараженных клеток не означает, что NP-белок также синтезируется внутри ядер. Авторадиографические исследования, а также применение методов фракционирования клетки указывают на ц'итоплазматический синтез этого и другого, богатого аргинином, белка и на быстрый транспорт их из цитоплазмы в ядра (Taylor et al., 1969, 1970; Becht, 1971).

В экстрактах зараженных клеток определенная фракция РНП-антигена содержит вкРНК (Pons, 1971; Krug, 1972; Krug, Etkind, 1973), хотя в вирусных частицах находят только один тип РНК (что следует из отсутствия какой-либо самогибридизации вРНК) (Scholtissek, Rott, 1971; Pons, 1971). Невозможно решить, имеет ли РНП-антиген, содержащий вкРНК, специфическое значение в процессе размножения вирусов или он является лишь артефактом, появляющимся в процессе клеточного фракционирования. Было показано, что обе цепи РНК одинаково хорошо связываются с NP-белком in vitro (Scholtissek, Becht, 1971). Таким образом, если имеется сколько-нибудь свободного NP-белка и свободной вкРНК, в процессе гомогенизации незамедлительно образуется соответствующий РНП-антиген. Вирионная РНК .может быть вытеснена из РНП-антигена поливин'ИлсульфатО'М (Pons et al., 1969). Следовательно, можно проверить, осуществимо ли замещение различных вирусных РНК в РНП-антигене в клеточных гомагенатах. Из изменений состава оснований вирусной РНК, меченной в течение различных промежутков времени 32Р и выделенной из цитоплазматического РНП-антигена, Krug (1972) заключает, что некоторая часть вкРНК, прежде чем она включится в РНП-антиген, существует в виде, свободном от NP-белка. Включение 32Р в РНК жлеток животных происходит со значительной лаг-фазой из-за довольно медленного включения меченого,фосфора 'в '(х-положение нуклео-зидтрифосфатов (Scholtissek, 1965). До тех пор, пока соответствующие корректировки для расчетов изменений состава

оснований не сделаны, данные Krug (1972) следует интерпретировать с осторожностью.

Кинетический анализ «появления РНП-антигена в ядрах и цитоплазме, проведенный Krug (1972), -предполагает, что РНП-антиген, накапливающийся в ядрах, не является предшественником РНП-антигена, найденного в цитоплазме.