Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Кильбурн_Э_Д_Вирусы_гриппа_и_грипп.doc
Скачиваний:
1
Добавлен:
24.03.2024
Размер:
1.87 Mб
Скачать

3. Неструктурные белки

Для зараженных клеток было описано несколько неструктурных вирусспецифических белков -неизвестной функции. Один из них с относительной молекулярной массой 25 000, накапливающийся в 'больших количествах, был обозначен как NS (Lazarowitz et al., 1971). В полиакриламидных гелях он имеет скорость миграции, близкую к подвижности М-бел-ка. Однако оба белка, по-видимому, не зависят друг от друга, как видно из различий в их пептидных картах. Большие 'количества NS-'белка обнаружены в ядрах (Lazarowitz et al.,. 1971; Krug, Etkind, 1973). Эти сведения согласуются с данными предыдущих иммунофлюоресцентных исследований Dim-mock (1969), который наблюдал 'яркое окрашивание ядер с антисыворопкой, специфичной ж неструктурным вирусным антигенам, и это окрашивание, вероятно, отражало наличие NS-'белка. Как 'было установлено, этот белок также является основным вирусспецифическим белком во фракциях свободных и связанных с мембранами рибосом, выделяемых из зараженных клеток (Pons, 1972; Compans, 1973; Klenk et al.,. 1974a). Ассоциация NS с рибосомами, по-видимому, зависит от тонной силы (Krug, Etkind, 1973). В буферах с низкой ионной силой ЭТОТ нолипаптид -адсорбировался на обеих ри-босомальных субъединицах, тогда как при добавлении соли удалялся от них.

Недавнее исследование (Gregoriades, 1973) выдвинуло некоторые сомнения в идентификации NS как неструктурного' полипептида, отличного от вирионного полипептида М. Оказалось возможным экстрагировать М-полип-ептид из вирионо© кислым хлороформметанолом, и белок с идентичной электрофор етвческой подвижностью может -быть также экстрагирован из целых зараженных клеток, -ядер или полисом. Анализ-продуктов триптическои обработки М-'белка, а также ядерного и ассоциированного с рибосомами -белков, привел к множеству совпадений, предполагающих, что М- и NS-белкй 'идентичны. Необходима, однако, дальнейшая информация для убедительного объяснения этих результатов.

В дополнение к NS могут существовать другие неструктурные вирусспецифические комлоненты, хотя ни один из них. не был достаточно охарактеризован. Используя антисыворотку, направленную против неструктурных вирусных антигенов,

Dimmock и Watson (1969) преципитировали радиоактивно меченные полипептиды из зараженных клеток. Электрофоре-тический анализ в полиакриламидном геле позволил предположить наличие нескольких неструктурных полипептидов с основным компонентом, соответствующим NS. Один из остающихся неструктурных компонентов мигрирует более быстро и может соответствовать компоненту с относительной молекулярной массой от 10 000 до 15 000, описанному Skehel (1972), Krug и Etkind (1973).

4. Мембранный м-белок

М-белок, который 'выстилает внутреннюю поверхность двойного липидного слоя оболочки и которым богат вирион, находят в зараженных клетках в относительно небольших количествах. Это предполагает не только контролируемость синтеза М-белма, но и возможность того, что этот синтез является лимитирующей стадией репродукции вируса (Lazarowitz et al., 1971). Эту концепцию поддерживают данные о том, что при температуре 29 °С, при которой образование вируса подавлено, М-белок является единственным (вирусопе-дифическим белком, который нельзя обнаружить в зараженных клетмах (Klenk, Rott, 1973).

М-белок {можно обнаружить на гладких и плазматических мембранах зараженных клеток (Lazarowitz et al., 1971; Corn-pans, 1973a; Klenk et al., 1974a). Эти данные свидетельствуют о сродстве этого белка к мембранам.