Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
osnovi_itt.doc
Скачиваний:
815
Добавлен:
20.05.2015
Размер:
1.01 Mб
Скачать

1. Оснащение:

- стандартный универсальный реагент «Антирезус» («анти–D»), представляющий собой универсальную антирезусную сыворотку, содержащую 33% раствор полиглюкина (реагент готовят на СПК);

- пробирка (пальчиковая);

- физраствор;

- пипетка для физраствора;

- одноразовая пастеровская пипетка для внесения капель исследуемой крови.

2. Проведение исследования.

На дно сухой чистой пробирки помещают 2 капли (0,1мл) универсального реагента «Антирезус», затем туда вносят одну маленькую каплю (0,02мл) эритроцитов исследуемой крови. Кровь для исследования может быть взята из пальца или из вены непосредственно перед исследованием (свежая, несвернувшаяся кровь), может быть консервированная кровь из пакета или эритроциты из пробирки после образования сгустка и отстаивания сыворотки.

Круговым вращением пробирки содержимое размазывают по её внутренней поверхности таким образом, чтобы содержимое растеклось по стенкам. Для этого кладут пробирку горизонтально на стол и катают её ладонью по столу не менее 3 минут. Такое растекание смеси по стенкам пробирки и продолжительность реакции не менее 3 мин., делают реакцию более выраженной.

Затем, через 3 мин., в пробирку добавляют 3мл изотонического раствора натрия хлорида и спокойно (без встряхивания) перемешивают содержимое трёхкратным перевёртыванием пробирки (исследование проводят в перчатках). Пробирку просматривают на свет.

3. Учёт результатов.

Результат учитываютпо наличию или отсутствию агглютинации эритроцитов. Наличие агглютинации (крупные хлопья из склеенных эритроцитов на фоне просветлённой жидкости) указывает на резус–положительную принадлежность исследуемой крови.

Отсутствие агглютинации (в пробирке равномерно окрашенная жидкость) свидетельствует о резус–отрицательной принадлежности крови.

Б. Определение резус – принадлежности крови при помощи цоликлона «анти–D» (на плоскости)

1. Реагент - цоликлон «анти – D» представляет собой раствор антител «анти–D». Реагент не содержит иных антител, поэтому он используется для выявления в эритроцитах исследуемой крови антигена Rhо(D). Заключение о присутствии Dантигена в исследуемых эритроцитах делают по наличию положительной реакции агглютинации.

Срок хранения реагента 2 года при температуре +2°…+6°С. Вскрытый флакон (на этикетке пишут дату вскрытия) в закрытом виде можно хранить 21 день при +2°…+6°С. Исследование может проводиться с образцами свежей крови, в том числе капиллярной, венозной; консервированной или без консерванта.

2. Оснащение.

- Пластинка однотонная, светлая с чистой сухой обезжиренной поверхностью, возможно использование планшетов для определения групп крови.

- Пипетки вместимостью 0,1мл (1 капля).

- Одноразовые пастеровские пипетки для нанесения на пластинку капель исследуемой крови.

- Палочки стеклянные (предметные стёкла) для смешивания цоликлона с исследуемой кровью.

3. Проведение исследования на плоскости.

- На поверхность светлой пластины нанести одну большую каплю (0,1мл) цоликлона «анти–D супер»;

- Рядом поместить маленькую (0,02мл) каплю эритроцитов исследуемой крови и смешать каплю цоликлона с каплей крови отдельной чистой стеклянной палочкой (уголком предметного стекла). Через 10 – 20 секунд мягко покачивают пластинку;

- Реакция агглютинации развивается уже через 30 секунд. Практически полностью реакция происходит за 60 секунд. Результат учитывают через 3 минуты после смешивания капель, поскольку реакция агглютинации эритроцитов, несущих слабую форму D–антигена протекает медленнее.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]