Верхній агар

Триптон 10г

Дріжджовий екстракт 5г

NaCl 10г

Агар 7г

H₂O 1л

Нижній агар

Триптон 10г

Дріжджовий екстракт 5г

NaCl 10г

Агар 15г

H₂O 1л

Фосфатний буфер (PBS) 0,1М, рН 7,4

NaCl 8,0г

KH₂PO₄ 0,2г

Na₂HPO₄ x 12H₂O 2,8г

KCl 0,2г

Об”єм розчину доводять до 1л дистильованою водою

Цитратний буфер, 0,1м, рН 3,0 –6,2

Розчин А

0,1М розчин лимонної кислоти (М.м. 192,1) 19,21 г/л

(якщо використовують моногідрат лимонної кислоти (М.м 210,14), то 21,01 г/л)

Розчин В

0,1М розчин дигідрат тринатрієвої солі (М.м. 294,12) 29,41г/л

Змішати розчини А та В у співвідношенні згідно таблиці та довести дистильованою водою до 100мл.

рН	3,0	3,4	3,8	4,2	4,6	5,0	5,4	5,8	6,2
Розчин А, мл	46,5	40,0	35,0	31,5	25,5	20,5	16,0	11,8	7,2
Розчин В, мл	3,5	10,0	15,0	18,5	24,5	29,5	34,0	38,2	42,8

Ацетатний буфер,0,1м , рН 3.6-5,6 Розчин а

0,1М оцтова кислота

Концентравана оцтова кислота 5,8 мл

Н₂О довести до 1000 мл

Розчин В

0,1М ацетат натрія

тригідрат ацетата нарія (М.м 136,09) 13,6 г/л

Змішати розчини А та В у співвідношенні та довести дистильованою водою до 100мл.

рН	3,6	4,0	4,4	4,8	5,0	5,2	5,6
Розчин А, мл	46,3	41,0	30,5	20,0	14,8	10,5	4,8
Розчин В, мл	3,7	9,0	19,5	30,0	35,2	39,5	45,2

Гліцин-HCl буфер, 0,1М, рН 2,2-3,6

0,1М гліцин (М.м 75) 7,5 г/л

0,1М HCl

Для приготування розчину змішати 50 мл 0,1М гліцину і згідно таблиці певну кількість 0,1М HCl в залежності від бажаної рН та довести об”єм до 100 дистильованою водою

рН	2,2	2,4	2,6	2,8	3,0	3,2	3,4	3,6
0,1М HCl, мл	44	32,4	24,2	16,8	11,4	8,2	6,4	5,0

Натрій-карбонат-бікарбонатний буфер, 0,05М, рН 9,6

0,015М Na₂CO₃ 1,59г

0,035М NaHCO₃ 2,93г

H₂O до 1л

Тріс-HCl буфер, 0,05 М, рН 8,0

Тріс – 6,057 г розчиняють в дистильованій воді і доводять рН розчину до 8,0, додаючи 5М HCl. Доводять об”єм розчину до 1 л дистильованою водою.

Сульфат амонія, насичений розчин

(NH₄)₂SO₄ 190г

Н₂О до 250мл

Сольовий розчин Ерла

У 1000мл дистильованої H₂O послідовно розчиняють:

NaCl 6,8г

KCl 0,4г

CaCl₂ x 6H₂O 0,39г

MgSO₄ x 7H₂O 0,1г

Na₂HPO₄ x 12H₂O 0,125г

Глюкоза 1,0г

Феноловий червоний 0,4%-ний 5,0мл

Стерилізують в автоклаві 15 хвилин при 130⁰ С, величину рН регулюють додаванням NaHCO₃ перед використанням розчину

Середовище з гідролізатом на розчині Хенкса

Середовище складається з сольового розчину Хенкса, до якого додають гідролізат лактальбуміну або казеїну.

Сольовий розчин Хенкса:

NaCl 8,0г

KCl 0,4г

CaCl₂ x 6H₂O 0,276г

MgSO₄ x 7H₂O 0,2г

КН₂РО₄ 0,06г

Na₂HPO₄ x 12H₂O 0,153г

Глюкоза 1,0г

Феноловий червоний 0,012г

H₂O 1л

До сольового розчину додають 5г гідролізату лактальбуміну або казеїну, а потім фільтрують через потрійний складчатий фільтр і стерилізують протягом 15 хвилин в автоклаві при 115 ⁰С.

Середовище Ігла

А) Амінокислоти, мг/л:

L – аргінін-HCl - 17,5

L -цистин- 12,0

L – гістидин-HCl - 8,0

L – ізолейцин 26,0

L -лейцин  - 26,0

L – лізин-HCl – 29,0

L - метионін – 8,0

L - фенілаланін – 17.0

L - треонін - 24,0

L - триптафан - 4,0

L - тирозин - 18,0

L - валін - 23,0

Спочатку в 100 мл води з додаванням кількох краплин концентрованої соляної кислоти розчиняють L –цистин та L – тирозин, а потім додають інші амінокислоти

В) Вітаміни, мг/л:

біотин 1,0

холін 1,0

холін-хлориду 1,0

фолієва кислота 1,0

пантотенат кальція 1,8

пірідоксин 1,0

пірідоксаль 1,0

тіамін 1,0

нікотінамід 1,0

нікотінова кислота 1,0

рибофлавін 0,4

Біотин, фолієву кислоту і холінхлорид розчиняють в 50 мл води при додаванні 0,1мл 0,1М NaOH. В інших 50 мл води розчиняють решту речовин. Потім два розчини зливають.