Практична частина Лабораторне заняття

Мета заняття Опанувати методику механічного ураження вірусом рослин-індикаторів різними способами.

Матеріальне забезпечення: здорові рослини тютюну Nicotiana tabacum сорт Імунний 580, дурману Datura stramonium L, лободи Chenopodium amaranticolor, квасолі зичайної Phaseolus vulgaris L.у стадії 4-х справжніх листків; віруси – вірус тютюнової мозаїки, Х-вірус картоплі; абразив – карборунд; скляні палички; 0,5л колби з дистильованою водою; фосфатний буферний розчин рН 7,4; 0,5 -1,0 л стакани з дезрозчином; етикетки для рослин; маркери.

Хід роботи

1. Провести маркування дослідних та контрольних рослин із зазначенням вірусу, яким проводиться інокуляція, способу механічного ураження та дати ураження. (Наприклад: ВТМ, укол в ценральну жилку листку, 23.01.03). При механічному ураженні рослин методом втирання інокулюму у листову пластинку умовно поділити її на дві половини, одна з яких буде контрольною, інша дослідною.

2. Посипати листову пластинку карборундом, втерти скляною паличкою в контрольну половинку буферний розчин, у дослідну – вірусний препарат (рис.4.4).

3. Після 10 хв інкубації карборунд та надлишок вірусного матеріалу змити дистильованою водою у стакани з дезрозчином.

4. Іншу рослину уразити уколом в центральну жилку (рис 4.4).

5. Помістити рослини у теплицю без світла на одну добу, а потім спостерігати за рослинами при стандартному освітленні.

6. Через тиждень провести облік результатів та зробити висновки.

а б

Рис. 4.1. Способи ураження рослин фітовірусами: а- механічна інокуляція з використанням карбурунду, б – інокуляція уколом в жилку (Кирай З. и др., 1974).

Контрольні завдання

1. Замалювати до альбому морфологію двох вірусів рослин та симптоми їх ураження на трьох видах рослин.

2. Скласти схему способів передачі для трьох вірусів рослин (ВТМ, ВОМ, ВЖКЯ).

3. Запропонувати спектр рослин-індикаторів для розділення суміші ВТМ та ХВК.

Контрольні запитання

1. Які типи реакцій рослин на ураження їх вірусом Ви знаєте?

2. Що таке рослини-індикатори?

3. Дайте визначення терміну “рослина-господар”.

4. Яке значення має метод рослин-індикаторів?

5. Назвіть рослини, що використовуються як індикатори при біологічному тестуванні.

6. Які шляхи передачі вірусів рослин Вам відомі?

7. Охарактеризуйте типи взаємодії в системі вектор-рослина та наведіть приклади вірусів.

8. Охарактеризуйте методи ураження рослин в лабораторних умовах.

9. Які способи передачі вірусів рослин через грунт Ви знаєте?

10. Яким чином віруси рослин потрапляють до рослинної клітини?

Тема. 2. Виділення, очистка та концентрування вірусів рослин

Зміст

Теоретична частина

Екстракція вірусів з рослини

Освітлення екстракту органічними розчинниками

Концентрування вірусної суспензії

Практична частина

Лабораторне заняття

Мета заняття

Матеріальне забезпечення

Хід роботи

Контрольні завдання

Контрольні запитання

Завдання для самостійної роботи студентів

Література