Концентрация сухих веществ с%

Рис.17. Градуировочный график для определения

содержания сухих веществ.

Хроматографический количественный анализ

Для проведения количественного анализа широкое применение нашли хроматографические методы, осуществляемые в автоматическом режиме: газовая, газо-жидкостная, жидкостная и др. виды хроматографии. Прибор для проведения хроматографического процесса называют хроматографом.

Подача подвиж-ной фазы

→

Ввод образца (дозатор)

→

Разделение (хроматог-рафичес-кая колонка)

→

Обнару-жение (детектор)

→

Обработка данных (ЭВМ, дисплей и др.)

Блок – схема хроматографа.

Показания детектора отражают ход хроматограммы. Она представляет собой ряд пиков, принадлежащих различным исследуемым компонентам.

На хроматограмме различают:

1 – нулевая линия; 2 – пик несорбирующегося компонента; 3 – пик исследуемого компонента.

Основной характеристикой при идентификации компонентов является время удерживания (t_R), оно обозначает время, в течение которого вещество проходит от момента ввода его в колонку до момента появления максимума пика.

Для количественного определения ведут измерения высоты пика (h) или его площади(S). S_пика=h·μ_0,5; где μ_0,5 – ширина пика на середине его высоты. Затем строят калибровочный график зависимости h или S от концентрации определяемого компонента. По полученному графику методом экраполяции или методом внутреннего стандарта определяют концентрацию вещества.

Для проведения хроматографического процесса используют различные сорбенты, в зависимости от природы определяемого компонента. Неполярные сорбенты: активированные угла, тефлон, полисорб и др. полярные сорбенты: силикагели, оксид алюминия и др.

Детектор хроматографа это прибор, предназначенный для регистрации аналитического сигнала.

Основные типы детекторов: пламенно – ионизационный, термохимический, катарометр, термоионный, пламенно – фотометрический электронозахватный детектор и др.

Работа № 17 Анализ смеси полисахарида и нитрата кобальта методом гельхроматографии

Гельхроматография – метод разделения высокомолекулярных веществ при пропускании их растворов через желеобразный адсорбент (гель), получаемый из сухих гранул так называемых “молекулярных сит”.

В процессе хроматографирования в колонке многократное повторение сортировки молекул по размеру в итоге приводят к разделению и вымыванию веществ в порядке убывания их молекулярных масс. Например, полисахаридный гель “Сефадекс”, марки “g - 25” Швеция, удерживает в своих порах вещества с молекулярной массой до 5000, не задерживая более крупные. Чистота разделения, т.е. присутствие в отдельных порциях элюента на выходе из колонки лишь одного вещества, может быть определена различными видами современного химического и физико-химического анализа.

Применяемый в настоящей работе метод спектрофотометрии заключается в определении светопоглощения. Степень светопоглощения, а значит и оптическая плотность раствора может быть измерена на спектрофотометре. Так как полисахариду голубому декстрану, выходящему из хроматографической колонки первым, присуще характерное излучение с длиной волны “λ” = 280 нм, то измерение оптической плотности фракции и его раствора необходимо проводить в ультрафиолетовой области спектра на спектрофотометре. Здесь частота “σ” сигнала характеризует присутствие вещества, а интенсивность “сигнала” – его количественное содержание (концентрацию раствора).

2 – ой компонент разделяемой смеси Co(NO₃)₂ можно обнаружить в последующих фракциях по высокой электропроводности раствора сильного электролита, содержащего нитрат-ион. Присутствие Co(NO₃)₂ в элюате можно подтвердить обычными химическими пробами на ионы Co²⁺ (см. качественный анализ).