Лабораторная диагностика урогенитального хламидиоза

Возбудителем урогенитального хламидиоза – инфекции, вызывающей уретриты, цервициты, сальпингиты, эпидидимиты и конъюнктивиты, является Chlamydia trachomatis.

Материалом для исследования при хламидиозе являются мазки со слизистой оболочки мочеиспускательного канала, выделения из шейки матки, соскобы, мазки-отпечатки и др.

Микроскопический метод исследования мазков из исследуемого материала в окраске по методу Романовского-Гимзе в настоящее время практически не применяется. Распростра­ненными методами исследования при хламидиозе являются прямая и непрямая, в основе которых лежит обработка мазков специфическими флюоресцирующими антите­лами антителами против хламидий (прямая РИФ), либо обработка мазка нелюминесцирующими антите­лами против хламидий, а затем антивидовой люминесцирующей сывороткой (непрямая РИФ). При иссле­довании препаратов в люминесцентный микроскоп антигены хламидий обнаруживаются в цито­плазме клеток в виде единичных ярко-зеленых элементарных или ретикулярных телец (рис. 27 ).

Культуральный метод. Выделение хламидий осуществляется путем заражения исследуемым материалом культур клеток McCoy, HeLa и других линий. Через 48 часов культивирования в термостате при 37⁰ С выявляют включения возбудителя в клетках иммунофлюоресцентным методом. Выделение хламидий в культуре клеток имеет важное диагностическое значение, по­зволяет выявить жизнеспособные хламидии и определить их чувствительность к антимикробным препаратам.

Генодиагностика. Разработана ПЦР для определения специфических фрагментов ДНК хламидий.

Серологический метод включает постановку РСК, РНГА и ИФА для определения антител различных классов (IgG, IgM, IgA) к хламидиям в сыворотке крови больных с подозрением на хламидиоз. С учетом низкой иммуногенности хламидий и возможности наличия специфических антител после перенесенной ранее хламидиозной инфекции рекомендуется исследование нескольких проб сыворотки крови в динамике заболевания с интервалом в 2-3 недели. Тест-системы для ИФА дают возможность дифференцировать различные классы антител к хламидиям. При остром процессе в крови чаще выявляются антитела IgM, а также быстро нарастающие или быстро снижающиеся антитела IgG и IgA. При хронически протекающем хламидиозе чаще определяются стабильные концентрации антител IgG и IgA, титры которых снижаются в ходе эффективно проводимой терапии.

Рис. 27. Элементарные и ретикулярные тельца Chlamydia trachomatis в мазках со слизистой оболочки уретры. Прямая РИФ. х630

Самостоятельная работа студентов

1. Демонстрация фотографий колоний Mycoplasma hominis на питательной среде. Обратить внимание на характерный вид колоний в виде «яичницы-глазуньи».

2. Выявление уреаплазм на среде с мочевиной. Отметить изменение цвета индикатора среды (бромтимоловый синий) с исходного лимонно-желтого на зеленый в результате расщепления мочевины с образованием щелочных продуктов.

3. Серологический метод диагностики урогенитальных инфекций - учет демонстрационной ИФА по выявлению специфических антител в сыворотках крови больных микоплазмозом и хламидиозом.

4. Генодиагностика хламидиоза – учет ПЦР (демонстрация).