1. Определение группы крови моноклональными антителами

Цоликлоны анти-А и анти-В наносят на планшет или пла­стинку по одной большой капле (0,1мл) под соответствующи­ми надписями «анти-А» или «анти-В». Рядом с каплями анти­тел наносят исследуемую кровь по одной маленькой капле (0,01мл). После смешивания реагентов и крови за реакцией агглютинации наблюдают 2,5 мин. Оценка результатов реак­ции представлена в таблице.

Реакция исследуемых эритроцитов с цоликлонами

№	Анти-А	Анти-В	Группа исследуемой крови
1	-	-	0(I)
2	+	-	А(II)
3	-	+	B(III)
4	+	+	AB(IV)

1. Агглютинации нет. Следовательно, исследуемые эритроциты не содержат антигенов А и В. Кровь принадлежит к группе 0(I).

2. Агглютинация наблюдается только с цоликлоном А, значит, эритроциты содержат агглютиноген А и кровь принадлежит к группе А(II).

3. Агглютинация наблюдается с цоликлоном В. Следовательно, исследуемые эритроциты содержат агглютиноген В и ровь принадлежит к группе В(III).

4. Агглютинация наблюдается с обоими цоликлонами. Следовательно, исследуемые эритроциты содержат оба агглютиногена и кровь принадлежит к группе AB(IV).

2. Определение резус-принадлежности с помощью цоликлона анти-d супер

Началом цоликлона анти-D супер являются монокло-нальные человеческие антитела анти-D.

Цоликлон анти-D супер может быть использован для вы­явления D антигена в любых вариантах прямой реакцией агг­лютинации: на плоскости, в пробирке, в микроплате.

Можно определить в нативной крови, стабилизированной консервантом, в крови, взятой из пальца.

Реакция агглютинации на плоскости

На пластинку (чашку Петри) нанести большую каплю (0,1мл) цоликлона анти-D, а рядом поместить маленькую кап­лю исследуемой крови и смешать. Реакция агглютинации на­чинает развиваться через 10 - 15 с. Четко выраженная агглю­тинация наступает через 30-60 с. Результаты реакции можно оценивать через 3 мин. Пластинку покачивают 20 - 30 с, что позволяет развиться более полной крупнолепестковой агглю­тинации.

Определение резус-принадлежности с помощью универсальной антирезусной сыворотки

Капля антирезусной универсальной сыворотки наносится на дно пробирки, добавляется 1 капля исследуемой крови или эритроцитов. Пробирку встряхивают и реакция агглютинации наступает через минуту, но оценку проводят через 3 мин. Для исключения неспецифической агглютинации эритроцитов в пробирку добавляют 2-3 мл физиологического раствора и пе­ремешивают путем встряхивания 1-2 раза. Наличие агглюти­нации указывает на резус-положительную кровь, отсутствие -на резус-отрицательную.

Методы определения совместимости крови донора и реципиента

Определив группу крови и резус-принадлежность, прово­дят пробы на индивидуальную совместимость и резус-совместимость, биологическую пробу. Затем начинают пере­ливание.

1. Проба на индивидуальную совместимость по группам крови.

Берут одну - две капли сыворотки крови больного, полу­ченной центрифугированием или отстаиванием. Добавляют меньшую каплю крови донора. Кровь донора перемешивают с сывороткой больного и покачивают в течение 5 мин. Отсут­ствие агглютинации свидетельствует о совместимости крови донора и реципиента. Появление агглютинации указывает на их несовместимость.

2. Проба на резус-совместимость с использованием 33% -ного полиглюкина в пробирке без подогрева.

На дно пробирки вносят 2 капли сыворотки больного, за­тем 1 каплю донорской крови и каплю 33%-ного полиглюкина. Содержимое пробирки перемешивают путем встряхивания, затем пробирку наклоняют, чтобы содержимое растекалось по стенкам. Через 5 мин в пробирку добавляют 2 - 3 мл физрас­твора и снова перемешивают. Оценка - наличие агглютинации указывает на то, что кровь донора несовместима с кровью больного; если агглютинации нет - кровь совместима по ре­зус-фактору.

3. Дополнительный метод определения резус-совместимости.

На чашку Петри наносят 2 капли сыворотки реципиента. К сыворотке добавляют каплю крови донора и тщательно пе­ремешивают. Чашку ставят на водяную баню при температуре 45-47° на 10 мин. Если агглютинация наступает, то кровь несо­вместима по резус-фактору.

4. Биологическая проба.

Струйно переливают 10 - 15 мл крови (эритроцитарной массы, ее взвеси или плазмы). Затем в течение 3 мин наблю­дают за состоянием больного. При отсутствии клинических проявлений несовместимости (учащение пульса, одышка, за­трудненное дыхание, гиперемия лица и т.д.) вводят еще 10-15 мл крови и наблюдают 3 мин. Эту процедуру проводят 3 раза. Отсутствие реакции после трехкратной пробы является осно­ванием для продолжения трансфузии. В случае возникновения реакции - озноб, боли в пояснице, учащение пульса, бледность или цианоз - переливание следует немедленно прекратить.

Таким образом, для переливания крови необходимо:

1) определить у больного и донора группу крови, резус-фактор;

2) провести пробы на индивидуальную, групповую со­вместимость, резус-совместимость, биологическую совмести­мость.

Категорически запрещается переливание крови из од­ной ампулы нескольким больным.

Реципиент после переливания должен находиться в по­стели, за ним следует вести наблюдение в течение 2 ч. Изме­ряется температура тела и артериальное давление, контроли­руется цвет мочи. Красная окраска мочи свидетельствует об остром гемолизе. На следующий день после переливания обя­зательно производится клинический анализ крови и мочи.

Врач, переливающий кровь и ее компоненты, обязан за­писать в истории болезни показания к переливанию компо­нентов крови, паспортные данные с каждого флакона или кон­тейнера с кровью (фамилию и инициалы донора, группу кро­ви, резус-принадлежность, дату заготовки), результат кон­трольной проверки групповой принадлежности крови больно­го по системе АВО, результата контрольной проверки группо­вой принадлежности крови донора по системе АВО, результат индивидуальной совместимости и резус-совместимости крови донора и реципиента, результат биологической пробы.

Оставшуюся во флаконе кровь донора хранят в холо­дильнике при температуре 4-6°С в течение суток.

Консервирование и хранение крови

Кровь забирается у донора в стерильных условиях из ве­ны во флаконы или пластиковые мешки, заполненные стаби­лизирующим раствором:

а) цитратно-солевым (цитрат натрия 0,5 г, хлорида натрия 0, 85, дистиллированной воды 100 мл). На 100 мл крови применяют такое же количество раствора. Срок хранения крови- 12 суток;

б) 5 - 6%-ным цитрата. На 100 мл крови берут 10 мл раствора. Срок хранения 15 суток;

в) глюкозоцитратным (цитрата Na 5 г, глюкозы 25 г, дис­тиллированной воды 100 мл). На 100 мл крови применяют 10 мл раствора. Длительность хранения 25 суток. Во всех случаях консервации в кровь добавляют антибиотик или антисептик.

Кровь хранят в холодильнике при температуре 4 - 6°С. Пригодная для переливания кровь не содержит сгустков, име­ет четкое разделение на слои: эритроциты, лейкоциты и плаз­му. При инфицировании происходит помутнение, образуются хлопья, а при гемолизе плазма приобретает розовую окраску.

Показания к переливанию крови

В настоящее время в связи с разработкой технологии фракционирования считают, что показаний к переливанию цельной крови нет. Оправданно переливание крови только при отсутствии необходимых компонентов в случае острой мас­сивной кровопотери.

Цельная кровь переливается только той группы и резус-принадлежности, которая имеется у реципиента. В исключи­тельных случаях при отсутствии одногруппной крови или ее компонентов допускается однократное переливание крови 0(I) «резус-отрицательной» реципиенту любой группы в количе­стве до 500 мл. Кровь резус-отрицательных доноров группы А(II) или В(Ш) можно перелить (в исключительных, экстрен­ных случаях) реципиенту с AB(IV) группой с учетом его ре­зус-принадлежности.

Противопоказания к переливанию крови

Переливание крови противопоказано при следующих случаях:

1. Тяжелые нарушения функции печени и почек.

2. Декомпенсация сердечной деятельности.

3. Заболевания легких, сопровождающиеся выраженным застоем в малом круге кровообращения.

4. Аллергические состояния и заболевания.

5. Активный туберкулез легких в стадии инфильтрации.

6. Черепно-мозговая травма со сдавлением мозга.