134. Санитарно-микробиологическое исследование инвентаря, оборудования, рук и санитарной одежды работников аптек

Санитарная одежда – мед.халат и шапочка, предназначенные для защиты медикаментов, материалов и других загрязнений, выделяемые пресоналом.

Аптечную посуду, подготовленную для розлива инъекционных растворов и глазных капель, отбирают в момент приготовления их в количестве трех штук одинаковой емкости.

Флаконы доставляют в лабораторию в укупоренном виде, используя при этом пробки и прокладки, для отпуска лек.средств.

Исследование аптечной посуды, пробок, прокладок, воронок, цилиндров:

Подготовка к исследованию: три одноименных флакона, доставленные в лабораторию, последовательно ополаскивают в 10 куб.см стерильной водопроводной воды.

Воду из флакона во флакон переливают над пламенем горелки, тщательно споласкивая каждый флакон. В банки и широкогорлые колбы с доставленными пробками и прокладками наливают 10 куб.см стерильной водопроводной воды и тщательно споласкивают.

135.Методы контроля микробной загрязненности растительного лек.Сырья

Лек. Растительное сырье может инфицироваться патогенными микробами на всех этапах заготовки (сбор, первичная обработка, сушка, измельчение, упаковка) и хранения. При хранения сырья важно соблюдение санитарного режима в аптеках. Неблагоприятное действие оказывают влажность, пыль, насекомые и др.факторы, повышающие микробное обсеменение и приводящие к порче лек.сырья. Внешними проявления микробной порчи раст.сырья являются изменение цвета и консистенции, загнивание, плесневение всего растения и или его частей. При этом резко снижается содержание или полностью исчезают фармакологические активные вещества , использование такого недоброкачественного сырья становится бесполезным или вредным. Легко портятся плоды, ягоды и корневища, богатые углеводистыми соединениями, более устойчивыми являются сухие листья, корни, кора. Состав микроорганизмов зависит от вида лек.сырья, его структуры и фармакологических свойств. Преобладают грибы, актиномицеты и спорообразующие виды бактерий.

Определение микробной обсемененности раст-го лек.сырья:

В асептических условиях(в стерильной чашке Петри, обожженными ножницами и пинцетом)из листа или верхнего слоя корневища вырезают кусочек площадью 1, который помещают в пробирку с 10мл стерильного физ.раствора и взбалтывают в течении 5мин. Из полученного смыва готовят 4 десятикратных разведения (1:10, 1:100, 1:1000, 1:10000), для посева в связи с с большой обсемененности раст.сырья используют два последних (1:1000, 1:10000)разведения. В стерильную чашку Петри вносят 1 мл смыва, после чего в нее наливают 15мл расплавленного и остженного до 45°С МПА, перемешивают и после застывания агара посевы инкубируют при 37°С 24-48 часов. Производят подсчет выросших колоний на поверхности и в глубине агара. Полученное число колоний следует умножить на степень разведения.

136. Санитарно-микробиологическое исследование сухих веществ, используемых для приготовления лек.Форм.

Исследования проводят в случаях неоднократных неудовлетворительных бактериологических анализов, превышения норм предельно допустимого содержания непатогенных микроорганизмов при удовлетворительных результатах анализов дистиллированной воды используемой для их приготовления, при удовлетворительных данных бактериологического контроля посуды, флаконов, пробок, прокладок. Результаты, полученные при исследовании сухих лекарственных веществ, служат одним из оснований для выбора партии при приготовлении инъекционных растворов. Сухие лекарственные вещества разводятся стерильной дистиллированной водой с целью создания соответствующих концентраций инъекционным растворам и глазным каплям, изготовляемым в аптеках. Отбор сухих лекарственных веществ проводят стерильными ложками в стерильную посуду лаборатории в количестве 30 - 50 г. В случае, если вещество таблетированное, то отбирают фламбированным пинцетом в стерильную посуду лаборатории в количестве 30 - 50 г.

• Аптечную посуду, подготовленную для розлива инъекционных растворов и глазных капель, отбирают в момент приготовления их в количестве трех штук одинаковой емкости.

• Флаконы доставляют в лабораторию в укупоренном виде, используя при этом пробки и прокладки, для отпуска лекарственных средств.

137. Понятие о пирогенности и методы ее определения. Пирогены – это вещества липополисахаридной природы, образующиеся при гибели микробной клетки. Представляют собой эндотоксины, при введении в организм вызывают лихорадку. Для определения пирогенности используют 3 метода. Прямой метод – биологический. Испытание проводят на кроликах. Группе животных, состоящей из 3 особей, пригодных для опыта, вводят испытуемый препарат в ушную вену. Затем измеряют ректальную температуру 3 раза с промежутками в 1 час. Испытуемый раствор считают непирогенным, если сумма повышений температуры у 3-х кроликов менее 1,4 °С. Если сумма находится в пределах 1,5-2,2 °С, испытание повторяют. Если сумма превышает 2,2 °С, то препарат считается пирогенным. Пирогенны продуцируются в основном грамотрицательными бактериями (ГОБ). У грамположительных бактерий пирогенная активность в 10⁴-10⁵ ниже, чем у ГОБ. Поэтому используют косвенный метод определения пирогенности путем определения общего количества микроорганизмов, в том числе ГОБ, до стерилизации 1 мл образца, взятого непосредственно перед стерилизацией, засевают на МПА. Инкубируют 5 суток при температуре 30-35 °С. Подсчитывают колонии – общее количество бактерий. Микроскопируюти подсчитывают колонии ГОБ. Допустимые нормы для 5,10,25,40% растворов глюкозы, 0,9% раствора NaCl – неинъекционного назначения: ОКБ – 50, ГОБ – 10; для инъекций: ОКБ – 15-20, ГОБ – 5. Превышение указанных показателей свидетельствует о пирогенности препарата после стерилизации. Наиболее современным методом определения пирогенности является ЛАЛ-тест. В основе этого метода лежит способность лизата амебоцитов (клеток крови) морских животных мечехвостов специфически реагировать с эндотоксинами грамотрицательных бактерий – липополисахаридами. Поскольку первые исследования были проведены на мечехвостах вида Limuluspolyphemus, препарат, полученный из их крови, был назван «лизат амебоцитов лимулюс» (Li,ulus amebocyte lysate) – ЛАЛ-реактив. В результате реакции эндотоксина и лизата происходит помутнение прозрачной реакционной смеси или образования твердого геля, что и служит индикатором присутствия эндотоксина. Преимуществами ЛАЛ-теста являются высокая чувствительность, возможность анализировать в короткий срок (1-2ч) большое количество образцов, возможность определения пирогенности лекарст, которые нельзя испытывать на кроликах – короткоживущих изотопов, препаратов седативного действия и др.