1.1 Метод прозрачной камеры

Одним из первых стал эффективно использовать прозрачную камеру, вживленную в ухо кролика, J. Sandison (365). Прозрачные камеры различного типа, применяемые для наблюдения за расту­щими сосудами детально описаны ранее (306). Обычно камера со­стоит из прозрачного окна, внедряемого в кожу на участках, доступных для освещения. Камеры устанавливаются на коже спи­ны мышей, крыс, хомяка, в защечном мешке хомяка, но чаще все­го на ухе кролика. Снаружи остается очень маленькое отверстие, которое открыто для наблюдения и обеспечивает прямую оценку изменений в формирующейся подлежащей сосудистой сети (346). Этот метод был модифицирован для использования на человече­ской подкожной ткани, что позволило произвести интересные на­блюдения не только капиллярного роста, но также капиллярного кровотока в течение нескольких месяцев (78). Разработана камера для имплантации в большеберцовую кость кролика (50, 432).

Большинство сведений о сосудах и кровоснабжении опухолей также получено с использованием метода трансплантации кусочка опухоли в прозрачную камеру (защечный мешок хомячка, кожный карман на спине) или в роговицу (196). С помощью прозрачных камер интенсивно исследовался процесс васкуляризации нормаль­ных или патологически измененных органов и тканей, импланти­рованных в камеру (135, 163).

Метод прозрачной камеры имеет определенные преимущества: 1) возможность наблюдать ангиогенез у неоперированных живо­тных и в течение довольно длительного времени (нескольких ме­сяцев), 2) возможность постоянного анализа роста того же самого участка растущего сосуда или сосудистой сети. К недостаткам ме­тода следует отнести то обстоятельство, что имплантация камеры приводит к травме окружающих тканей, и поэтому рост сосудов обязательно связан с процессом заживления раны.

Чтобы понять, какие возможности дает и какие ограничения содержит в себе метод прозрачной камеры, необходимо рассмот­реть последовательность явлений, имеющих место после имплан­тации прозрачной камеры. Вначале вследствие повреждения окружающих сосудов происходит отложение фибриновой сети; за­тем начинается миграция фибробластов и других соединительнот­канных клеток (например, макрофагов); наконец, только после этого определяется рост соединительной ткани, пласта капилля­ров, формирование почек и петель. При этом следует отметить, что концы растущих капилляров часто дают экстравазаты (195).

Например, для изучения васкуляризации опухолей обычно очень небольшой кусочек опухоли трансплантируется на сформи­рованную сосудистую сеть. Ткань кусочка вначале прозрачна. Че­рез некоторое время ткани кусочка темнеют и начинают плохо пропускать свет, что является результатом дистрофических изме­нений опухолевых клеток (346). Через один - два дня кровеносные сосуды (обычно венулы) в окружающих тканях расширяются, и образующиеся сосудистые почки (отростки) врастают в кусочек опухоли. При этом ткань опухоли, окружающая пенетрирующие сосуды, вновь становится прозрачной, что показывает жизнеспо­собность составляющих ее клеток после установления циркуляции крови в сосудах. В это время, то есть спустя 3-5 суток после пере­садки, опухоль начинает расти и формирует свою собственную ти­пичную для нее сосудистую сеть.