- •1 Роль ветеринарной вирусологии в подготовке ветеринарного врача. Основные причины преобладания вирусных болезней над инфекционными болезнями животных невирусной этиологии.
- •2 Состояние биологии и медицины конца XIX века. Открытие вирусов. Д.И. Ивановский – основоположник вирусологии.
- •3 Основные этапы в истории вирусологии и превращение вирусологии в одну из фундаментальных биологических наук.
- •4 Вклад отечественных ученых в развитие вирусологии.
- •5 Основные достижения, современное состояние и задачи медицинской и ветеринарной вирусологии.
- •6 Происхождение и природа вирусов.
- •7 Кардинальные свойства вирусов. Физическая структура вирусов.
- •8 Характеристика вирусных нуклеиновых кислот.
- •9 Характеристика вирусных белков.
- •10 Номенклатура вирусов.
- •19 Репродукция вирусов. Схема основных процессов, обеспечивающих реализацию генетической информации.
- •20 Синтез вирусных компонентов.
- •21 Основные типы (формы) взаимодействия вирусов с клеткой. Роль отдельных компонентов вирусной частицы.
- •27 Понятие о гене и геноме. Генотип и фенотип вирусов. Генетические признаки (маркеры) и их использование в характеристике штаммов.
- •28 Мутации и их механизмы. Практическое использование вирусных мутантов.
- •29 Генетические взаимодействия вирусов.
- •30 Негенетические взаимодействия вирусов.
- •11 Пикорнавирусы.
- •16 Реовирусы.
- •12 Тогавирусы и флавивирусы.
- •13 Коронавирусы.
- •14 Рабдовирусы.
- •15 Ретровирусы.
- •17 Парвовирусы.
- •18 Герпесвирусы и поксвирусы.
- •22 Виды культур клеток и их использование. Переживающие и плазменные культуры.
- •23 Первично-трипсинизированные культуры клеток и субкультуры, их использование.
- •24 Перевиваемые и диплоидные культуры клеток, их использование.
- •25 Роллерные и суспензионные культуры клеток, их использование.
- •26 Контаминанты клеточных культур и куриных эмбрионов, методы деконтаминации. Пути создания чистых биологических систем.
- •31 Факторы неспецифической противовирусной защиты животных.
- •32 Противовирусные ингибиторы и их роль в противовирусном иммунитете. Ингибиторы
- •Механизм действия ингибиторов
- •33 Интерферон, его природа, свойства, механизм действия, получение и применение.
- •34 Иммунная система организма и её роль в специфическом противовирусном иммунитете.
- •35 Иммуноглобулины и их роль в противовирусном иммунитете.
- •36 Живые противовирусные вакцины. Принцип получения и контроль живых вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •37 Инактивированные противовирусные вакцины. Принципы получения и контроль инактивированных вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •38 Химические вакцины. Использование методов генной инженерии для получения противовирусных вакцин.
- •39 Препараты для специфической терапии вирусных болезней животных.
- •40 Препараты для неспецифической терапии вирусных болезней. Проблема химиотерапии вирусных болезней животных.
- •41 Вирус ящура. Краткая характеристика заболевания, история открытия и основные свойства вируса.
- •42 Методы лабораторной диагностики ящура. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •43 Вирус бешенства. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •44 Методы лабораторной диагностики бешенства. Биопрепараты для специфической профилактики.
- •45 Вирус болезни Ауески. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •46 Методы лабораторной диагностики болезни Ауески. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •47 Вирус оспы животных и птиц.
- •48 Вирус диареи крупного рогатого скота.
- •49 Вирус гриппа человека и животных.
- •50 Вирус чумы крупного рогатого скота.
- •51 Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.
- •52 Вирус парагриппа-3 крупного рогатого скота.
- •53 Современные методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
- •54 Вирус классической чумы свиней.
- •55 Вирус африканской чумы свиней.
- •56 Вирус болезни Тешена.
- •57 Вирус болезни Ньюкасла.
- •58 Вирус гриппа (классической чумы) кур.
- •59 Вирус болезни Марека.
- •60 Правила работы с вируссодержащими материалами. Техника безопасности. Оборудование и аппаратура, необходимые для проведения вирусологических исследований.
- •61 Правила отбора, консервирования и транспортировки вируссодержащего материала от больных животных и трупов.
- •62 Общие принципы и современные методы диагностики вирусных болезней.
- •63 Подготовка патологического материала для вирусологических исследований.
- •64 Индикация вирусов в патологическом материале путем обнаружения вирионов и вирусных телец – включений.
- •65 Использование лабораторных животных в вирусологической практике.
- •66 Отбор яиц для инкубации, условия инкубации, отбор куриных эмбрионов для заражения вирусами.
- •67 Цели и методы заражения куриных эмбрионов.
- •68 Обнаружение вирусов в зараженных куриных эмбрионах.
- •69 Основные солевые, диспегрирующие растворы и питательные среды, необходимые для культивирования клеток, и их компоненты.
- •70 Методика получения первично-трипсинизированной культуры клеток.
- •71 Индикация вирусов в зараженных культурах клеток.
- •72 Методика титрования вирусов по единичному эффекту.
- •73 Определение титра вируса. Методика расчета лд50 по Риду и Менчу.
- •74 Схема устройства и принцип действия люминесцентного микроскопа и люминесцентных осветителей.
- •75 Основные флуорохромы и их использование при диагностике инфекционных заболеваний.
- •76 Принципы изготовления флуоресцирующих сывороток. Виды флуоресцирующих сывороток и их назначение.
- •77 Подготовка препаратов для иммунолюминесцентной диагностики. Прямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •78 Непрямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •79 Прямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •80 Непрямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •81 Использование в вирусологии реакции гемагглютинации (рга).
- •82 Реакция торможения гемагглютинации (ртга) и её практическое использование в вирусологии, достоинства и недостатки.
- •83 Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (рнга), достоинства и недостатки, практическое использование в вирусологии.
- •84 Реакция диффузной преципитации в агаровом деле (рдп) и её практическое использование в вирусологии.
- •85 Реакция встречного иммуноэлектроосмофареза (рвиэоф). Сущность реакции, применение.
- •86 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (пцр), использование в вирусологии.
- •87 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (днк-зонды), использование в вирусологии.
6 Происхождение и природа вирусов.
Происхождение вирусов
В отношении происхождения вирусов имеется несколько гипотез, единого мнения до сих пор нет. Каждая из этих гипотез имеет и сильные, и слабые стороны.
1 гипотеза. Ученые относят вирусы к потомкам первых, доклеточных, форм жизни на земле, которые сохранились в результате перехода к паразитическому существованию. Приверженец: Жданов.
2 гипотеза. Ученые считают, что когда-то вирусы имели клеточную структуру, но при переходе к внутриклеточному паразитизму, в процессе длительной эволюции, утратили клеточные органоиды (гипотеза «регрессии»). Приверженцы: Грин, Бернет.
3 гипотеза. Вирусы, считает большинство ученых, – отделившиеся генетические компоненты клетки, их называют «взбесившимися генами клеток», которые стали автономными. Они ведут себя как внехромосомные генетические детерминанты, известные под названием плазмид и эписом. Приверженцы: Лурие, Дарниелл (1967г).
4 гипотеза. Вирусы – заблудившиеся гены. Под влиянием различных стрессов, мутагенных, канцерогенных факторов обломки клеточных НК попадают в клетки чужеродного организма.
Природа вирусов.
К концу 20х – началу 30х годов 20го века стало ясно, что вирусы являются живой материей, примерно тогда же за ними закрепились следующие названия: фильтрующиеся вирусы. Гальпровии, миогановеллы, ультравирусы.
Позднее укоренилось ныне существующее обозначение – вирусы, под которым объединили вирусы растений, человека, животных и бактерий.
В 1947 году ученый Бернет отнес вирусы к микроорганизмам. Формировались представления о вирусах как мельчайших организмах на основании наличия у них свойств, характерных для других живых организмов.
По ряду свойств вирусы сходы с растениями и животными.
Все они содержат одни и те же биологические полимеры – НК и белок.
НК играет роль генетического аппарата.
У вирусов установлен такой же триплетный биологический код синтеза белка, как и у других живых существ.
Вирусы обладают наследственностью, изменчивостью и приспособляемостью. Они воспроизводят себе подобных.
Как и все живые существа, вирусы эволюционируют, а движущей силой их эволюции является естественный отбор.
На основании этих признаков вирусы считают живыми существами.
7 Кардинальные свойства вирусов. Физическая структура вирусов.
Отличительные свойства вирусов:
У вирусов предельно простая организация, отсутствуют клеточные структуры. У них нет клеточной стенки, цитоплазмы, рибосом, ядра и др. органоидов.
Их отличает наличие в зрелых сформированных вирионах только одной из двух жизненно необходимых нуклеиновых кислот: РНК или ДНК. У всех других существ есть обе нуклеиновых кислоты в клетке. Все вирусы подразделяются на РНКовые и ДНКовые. У всех живых существ носителем генетической информации является только двунитчатая ДНК. У вирусов есть и однонитчатая, и двунитчатая как РНК, так и ДНК. У растений и животных РНК зависит от ДНК. Вирусная РНК способна реплицироваться независимо от клеточной ДНК.
У вирусов отсутствует автономный самостоятельный обмен веществ. У них нет окислительно-восстановительных ферментов, вирусы не дышат, не питаются, не выделяют никаких продуктов жизнедеятельности. Вне живой клетки они не проявляют признаков жизни. Они не растут на искусственных питательных средах. Вирусы – облигатные внутриклеточные паразиты, им нужна живая клетка.
Уровень паразитизма у вируса иной, чем у других микроорганизмов, – генетический.
У вирусов своеобразный способ воспроизведения себе подобных – репродукция. Способ репродукции разобщенный во времени и в пространстве (дизъюнктивный). Проникая в чувствительную клетку, вирусы подчиняют генетический аппарат клетки и заставляют её работать на себя. Клетка прекращает функции, направленные на собственную жизнедеятельность, и начинает работать на вирус.
Основной критерий, отличающий вирусы от всех других форм жизни, - отсутствие у них собственных белоксинтезирующих (рибосомных) и энергетических систем.
Крайне малый размер (10-250 нм) 1 нм = 10 ангстремам (Å). Массу вириона измеряют в дальтонах (Д). 1Д – масса одного атома водорода (1,67*10-24г).
Способность проходить через бактериальные фильтры (фильтруемость).
Тканевый тропизм – место локализации вируса.
Вирусы нечувствительны к антибиотикам.
Физическая структура (архитектура, архитектоника) вирусов.
Вирусная частица (вирион) может быть двух типов.
Простые (безоболочечные, голые вирусы);
Сложные (оболочечные) вирусы, имеющие липопротеидную оболочку.
С помощью электронной микроскопии и рентгеноструктурного анализа установлено, что у вирусных частиц обоих типов имеется белковая оболочка – капсид. Она состоит из капсомеров. У сложно устроенных вирусов имеется суперкапсидная оболочка (пеплос). Может быть гладкой, а может иметь выступы (пепломеры). Каждый пепломер и капсомер состоит из структурных единиц, построенных из одной или нескольких пептидных молекул, соединенных друг с другом дисульфидной связью. Отдельную структурную единицу называют белковой субъединицей.
Капсид с заключенной в нем нуклеиновой кислотой называют нуклеокапсидом. У голых вирусов термины капсид и нуклеокапсид тождественны. Капсомеры в капсиде соединяются строго симметрично. По способу укладки капсомеров в капсиде у вирусов различают два типа симметрии: спиральный и кубический тип симметрии.
Спиральный тип симметрии характерен для вирусов, у которых капсомеры соединяются с геномом и образуют спиралевидную (винтообразную) структуру, которая характеризуется длиной, диаметром и шагом спирали. Спираль может быть твердой или мягкой. Если спираль жесткая, то вирусы сохраняют свою форму. Они могут иметь прямоугольную или конусовидную форму. Если спираль мягкая – такие вирусы обладают полиморфизмом.
Кубический (квазиметрический) тип симметрии – способ укладки капсомеров в виде многогранника. Чаще всего имеют форму икосаэдра (20гранник). У него 20 граней, 30 ребер и 12 вершин. Он симметричен в 3х взаимноперпендикулярных направлениях. Большинство вирусов, поражающих животных, имеют тип симметрии в виде икосаэдра.
Смешанный тип симметрии – у бактериофагов.
Сложный тип симметрии – у вирусов оспы. Они имеют форму прямоугольного параллелепипеда с закругленными углами.
Тип симметрии вирусов учитывают при классификации вирусов.