- •1 Роль ветеринарной вирусологии в подготовке ветеринарного врача. Основные причины преобладания вирусных болезней над инфекционными болезнями животных невирусной этиологии.
- •2 Состояние биологии и медицины конца XIX века. Открытие вирусов. Д.И. Ивановский – основоположник вирусологии.
- •3 Основные этапы в истории вирусологии и превращение вирусологии в одну из фундаментальных биологических наук.
- •4 Вклад отечественных ученых в развитие вирусологии.
- •5 Основные достижения, современное состояние и задачи медицинской и ветеринарной вирусологии.
- •6 Происхождение и природа вирусов.
- •7 Кардинальные свойства вирусов. Физическая структура вирусов.
- •8 Характеристика вирусных нуклеиновых кислот.
- •9 Характеристика вирусных белков.
- •10 Номенклатура вирусов.
- •19 Репродукция вирусов. Схема основных процессов, обеспечивающих реализацию генетической информации.
- •20 Синтез вирусных компонентов.
- •21 Основные типы (формы) взаимодействия вирусов с клеткой. Роль отдельных компонентов вирусной частицы.
- •27 Понятие о гене и геноме. Генотип и фенотип вирусов. Генетические признаки (маркеры) и их использование в характеристике штаммов.
- •28 Мутации и их механизмы. Практическое использование вирусных мутантов.
- •29 Генетические взаимодействия вирусов.
- •30 Негенетические взаимодействия вирусов.
- •11 Пикорнавирусы.
- •16 Реовирусы.
- •12 Тогавирусы и флавивирусы.
- •13 Коронавирусы.
- •14 Рабдовирусы.
- •15 Ретровирусы.
- •17 Парвовирусы.
- •18 Герпесвирусы и поксвирусы.
- •22 Виды культур клеток и их использование. Переживающие и плазменные культуры.
- •23 Первично-трипсинизированные культуры клеток и субкультуры, их использование.
- •24 Перевиваемые и диплоидные культуры клеток, их использование.
- •25 Роллерные и суспензионные культуры клеток, их использование.
- •26 Контаминанты клеточных культур и куриных эмбрионов, методы деконтаминации. Пути создания чистых биологических систем.
- •31 Факторы неспецифической противовирусной защиты животных.
- •32 Противовирусные ингибиторы и их роль в противовирусном иммунитете. Ингибиторы
- •Механизм действия ингибиторов
- •33 Интерферон, его природа, свойства, механизм действия, получение и применение.
- •34 Иммунная система организма и её роль в специфическом противовирусном иммунитете.
- •35 Иммуноглобулины и их роль в противовирусном иммунитете.
- •36 Живые противовирусные вакцины. Принцип получения и контроль живых вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •37 Инактивированные противовирусные вакцины. Принципы получения и контроль инактивированных вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •38 Химические вакцины. Использование методов генной инженерии для получения противовирусных вакцин.
- •39 Препараты для специфической терапии вирусных болезней животных.
- •40 Препараты для неспецифической терапии вирусных болезней. Проблема химиотерапии вирусных болезней животных.
- •41 Вирус ящура. Краткая характеристика заболевания, история открытия и основные свойства вируса.
- •42 Методы лабораторной диагностики ящура. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •43 Вирус бешенства. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •44 Методы лабораторной диагностики бешенства. Биопрепараты для специфической профилактики.
- •45 Вирус болезни Ауески. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •46 Методы лабораторной диагностики болезни Ауески. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •47 Вирус оспы животных и птиц.
- •48 Вирус диареи крупного рогатого скота.
- •49 Вирус гриппа человека и животных.
- •50 Вирус чумы крупного рогатого скота.
- •51 Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.
- •52 Вирус парагриппа-3 крупного рогатого скота.
- •53 Современные методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
- •54 Вирус классической чумы свиней.
- •55 Вирус африканской чумы свиней.
- •56 Вирус болезни Тешена.
- •57 Вирус болезни Ньюкасла.
- •58 Вирус гриппа (классической чумы) кур.
- •59 Вирус болезни Марека.
- •60 Правила работы с вируссодержащими материалами. Техника безопасности. Оборудование и аппаратура, необходимые для проведения вирусологических исследований.
- •61 Правила отбора, консервирования и транспортировки вируссодержащего материала от больных животных и трупов.
- •62 Общие принципы и современные методы диагностики вирусных болезней.
- •63 Подготовка патологического материала для вирусологических исследований.
- •64 Индикация вирусов в патологическом материале путем обнаружения вирионов и вирусных телец – включений.
- •65 Использование лабораторных животных в вирусологической практике.
- •66 Отбор яиц для инкубации, условия инкубации, отбор куриных эмбрионов для заражения вирусами.
- •67 Цели и методы заражения куриных эмбрионов.
- •68 Обнаружение вирусов в зараженных куриных эмбрионах.
- •69 Основные солевые, диспегрирующие растворы и питательные среды, необходимые для культивирования клеток, и их компоненты.
- •70 Методика получения первично-трипсинизированной культуры клеток.
- •71 Индикация вирусов в зараженных культурах клеток.
- •72 Методика титрования вирусов по единичному эффекту.
- •73 Определение титра вируса. Методика расчета лд50 по Риду и Менчу.
- •74 Схема устройства и принцип действия люминесцентного микроскопа и люминесцентных осветителей.
- •75 Основные флуорохромы и их использование при диагностике инфекционных заболеваний.
- •76 Принципы изготовления флуоресцирующих сывороток. Виды флуоресцирующих сывороток и их назначение.
- •77 Подготовка препаратов для иммунолюминесцентной диагностики. Прямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •78 Непрямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •79 Прямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •80 Непрямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •81 Использование в вирусологии реакции гемагглютинации (рга).
- •82 Реакция торможения гемагглютинации (ртга) и её практическое использование в вирусологии, достоинства и недостатки.
- •83 Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (рнга), достоинства и недостатки, практическое использование в вирусологии.
- •84 Реакция диффузной преципитации в агаровом деле (рдп) и её практическое использование в вирусологии.
- •85 Реакция встречного иммуноэлектроосмофареза (рвиэоф). Сущность реакции, применение.
- •86 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (пцр), использование в вирусологии.
- •87 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (днк-зонды), использование в вирусологии.
51 Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.
Herpesviridae. ДНК-содержащий, 120-180нм, кубический тип симметрии. 162 капсомера в белковой оболочке. Липопротеидная оболочка. Репродукция в ядре клетки.
Устойчивость: долго сохраняется в условиях глубокого замораживания. Полная инактивация через 45 суток хранения при 220С и менее 7-20 минут при 560С. Быстро инактивируется в кислой среде, разрушается жирорастворителями и в растворе формальдегида 1:500.
Культивирование: культуры клеток (почек новорожденных телят, ПЭК, ЛЭК, тестикул) – выраженное ЦПД и образование внутриядерных телец-включений через 24-48 часов.
Антигенные свойства: 1 антигенный тип вируса, способный приспосабливаться к поражению определенных органов: верхних дыхательных путей, половых органов, нервной ткани, слизистой оболочки глаз. Вызывает образование вируснейтрализующих и антигемагглютинирующих антител.
Слизистые – эпителий – репродукция – гибель клеток и слущивание – воспалительная реакция (участки некроза на поверхности слизистой). Проникновение через плацентарный и гематоэнцефалический барьеры вызывает поражение мозга, плаценты, матки и плода с последующим изгнанием его. У КРС 5 форм: поражение верхних дыхательных путей, вагинит, орхит, энцефалит, конъюнктивит, артрит. У телят возможна пневмония. При хронической серозно-гнойной пневмонии погибает до 20% телят, у нетелей и коров на 6-8 месяце аборты. При неосложненном течении – выздоровление через 10-14 суток. Патологоанатомические: респираторная – признаки серозного конъюнктивита, катарально-гнойного ринита, ларингита и трахеита. Генитальная: воспаленные слизистые влагалища и вульвы, пустулы, эрозии, язвочки, серозно-катаральный или гнойный цервицит, эндометрит, мастит. Быки: фимоз пи парафимоз. Энцефалиты: гиперемия сосудов, отечность тканей, мелкие кровоизлияния.
Восприимчив КРС. В хозяйствах с большим поголовьем чаще. Источник: больные животные, выделяют вирус во внешнюю среду 2-4 недель (кашель, истечения, случка).
Патматериал: кровь, смывы со слизистой носовой полости, глаз, влагалища, препуция, пробы спермы. От трупов: кусочки легких с бронхом, селезенки, лимфоузлов, пораженные участки слизистых носовой и ротовой полостей, трахеи, ЖКТ, кусочки паренхиматозных органов от абортированных плодов.
Экспресс: РИФ, обнаружение телец-включений, электронная микроскопия.
Вирусологические. Выделение в культуре клеток, на 6-8мес телятах. Идентификация: РИФ, РНГА, РН, ИФА, посредством рестрикционного анализа вирусной ДНК.
Ретроспективная: РН, РНГА, РСК, РТГА.
Дифференциальный: парагрипп-3, вирусная диарея, РС-инфекция, хламидиоз и др. До 14 суток исследование. Иммуните: стойкий, длительный, не менее 1,5-2 лет, который может передаваться потомству с антителами молозива.
Терапия: сыворотка реконвалесцентов.
Профилактика: живые и инактивированные вакцины.
Для серопрофилактики – поливалентные сыворотки крови.
52 Вирус парагриппа-3 крупного рогатого скота.
Транспортная лихорадка, параинфлюенца-3. Острое контагиозное заболевание главным образом телят, характеризующееся поражением органов дыхания.
Клинические признаки болезни при парагриппе могут быть разнообразными: от легких ринитов до тяжелой бронхопневмонии. Выздоровление идет через 2-3 недели, если болезнь не осложняется бактериальной микрофлорой. Болеют животные в возрасте от 10 дней до года. У взрослых животных отмечается бессимптомное течение болезни. У МРС выявляют антитела к вирусу парагриппа-3. Имеются сведения о выделении вируса от буйволов, лошадей и крыс.
История. Впервые вирус был выделен в 1959 году в США ученым Рейзингером. В нашей стране заболевание было обнаружено в 1968 году.
Возбудитель. Семейство Парамиксовириде, подсемейство парамиксовирине род Респировирус. РНКовый вирус, 1нитчатая РНК, диаметр 150-240нм, спиральный тип симметрии. Вирус сложно устроенный, имеет суперкапсид с ворсинками, в котором содержатся липиды и полисахариды. В суперкапсиде имеется также фермент нейраминидаза.
Устойчивость вируса: малоустойчив во внешней среде. При температуре 560С полностью разрушается за 30 минут. Устойчив к жирорастворителям (эфиру, хлороформу). Инактивируется в кислой среде. Обработка вируса 0,4% раствором формальдегида и 1% раствором β-пропиолактона уничтожает инфекционные свойства вируса.
В антигеном отношении все штаммы вируса парагриппа-3, выделенные в разных странах, идентичны. Вирус имеет 2 антигена: S-антиген (рибонуклеопротеидный, внутренний) и V-антиген (поверхностный, оболочечный). В антигеном отношении вирус ПГ-3 КРС и ПГ-3 человека очень близки. Вирус парагриппа обладает способностью агглютинировать эритроциты, особенно хорошо он склеивает эритроциты морской свинки. С меньшей активностью – эритроциты кролика, коровы и свиньи. Вирус не агглютинирует эритроциты кур и лошадей, чем отличается от вируса гриппа. РГА при 40С идет лучше. Вирус также может лизировать эритроциты морской свинки и кролика.
Культивируют вирус в условиях лаборатории:
В первичной культуре клеток ПЭК, ЛЭК, ТБ (тестикул бычков). Можно культивировать и на перевиваемых клеточных культурах. Вызывает ЦПД в виде зернистости, вакуолизации, образования симпластов, эозинофильных включений. При заражении клеточной культуры дает гемадсорбцию. Сроки появления гемадсорбции и ЦПД зависят от используемой культуры клеток.
В развивающихся куриных эмбрионах. Используют различные способы заражения куриных эмбрионов. Эмбрионы не погибают, вирус в этом случае выявляют с помощью РГАд.
Местом локализации вируса в организме животного являются клетки респираторных органов. Через 1-10 дней после заражения вирус можно выделить из секретов респираторного тракта, гортани, трахеи, легких, селезенки, печени, лимфоузлов, спермы быков-производителей.
Источником заражения являются больные животные, способ передачи воздушно-капельный, но возможно заражение через молоко больных коров и половым путем. Диагноз на ПГ-3 ставят с учетом эпизоотической ситуации, клинических признаков и патологоанатомических изменений.
Диагностика
Патматериал: при жизни – экссудат из носовой полости (лучше в термосе со льдом), парные пробы сывороток для серодиагностики. От животных, убитых с диагностической целью, направляют кусочки легкого, селезенки, слизистой оболочки носа, трахеи, участки кишечника, регионарные лимфоузлы.
Для диагностики парагриппа и дифференциации от других болезней выпускают диагностический набор. Диагностику проводят параллельно с исследованиями на аденовирусную инфекцию, инфекционный ринотрахеит, РС-инфекцию, вирусную диарею КРС.
Основные экспресс-методы: ПЦР, РИФ.
Вирусологические: выделяют вирус в культуре клеток первичной(ПЭК, ЛЭК, ТБ) или перевиваемой. Вирус считается выделенным, если вызывает стабильное однотипное ЦПД и положительную РГАд с эритроцитами морской свинки. Идентифицируют вирус с помощью РТГАд, РТГА, РИФ, РСК, ИФА, РН.
Ретроспективная диагностика: исследуют сыворотки крови в РТГА с эритроцитами морской свинки. Также используется ИФА и РН. Диагностический титр вируса 1:16 или увеличение титра антител в 4 и более раз во 2 пробе сыворотки.
Биопрепараты для специфической профилактики и терапии:
Профилактика:
Паравак – вакцина живая, лиофилизированная, против ПГ-3 КРС;
Бивак – живая, лиофилизированная, против ПГ-3 и ИРТ КРС;
Комбовак – против ПГ-3, ИРТ, ВД БС, РС-инфекции, рота- и коронавирусных болезней КРС;
Вакцина сухая культуральная ассоциированная против ПГ-3 и ИРТ КРС.
Для специфической профилактики и терапии:
Сыворотка против пастереллеза, сальмонеллеза, ПГ-3 и ИРТ. Может быть использована сыворотка реконвалесцентов. Переболевшие животные устойчивы к повторному заражению в течение 3-4 месяцев.