- •1 Роль ветеринарной вирусологии в подготовке ветеринарного врача. Основные причины преобладания вирусных болезней над инфекционными болезнями животных невирусной этиологии.
- •2 Состояние биологии и медицины конца XIX века. Открытие вирусов. Д.И. Ивановский – основоположник вирусологии.
- •3 Основные этапы в истории вирусологии и превращение вирусологии в одну из фундаментальных биологических наук.
- •4 Вклад отечественных ученых в развитие вирусологии.
- •5 Основные достижения, современное состояние и задачи медицинской и ветеринарной вирусологии.
- •6 Происхождение и природа вирусов.
- •7 Кардинальные свойства вирусов. Физическая структура вирусов.
- •8 Характеристика вирусных нуклеиновых кислот.
- •9 Характеристика вирусных белков.
- •10 Номенклатура вирусов.
- •19 Репродукция вирусов. Схема основных процессов, обеспечивающих реализацию генетической информации.
- •20 Синтез вирусных компонентов.
- •21 Основные типы (формы) взаимодействия вирусов с клеткой. Роль отдельных компонентов вирусной частицы.
- •27 Понятие о гене и геноме. Генотип и фенотип вирусов. Генетические признаки (маркеры) и их использование в характеристике штаммов.
- •28 Мутации и их механизмы. Практическое использование вирусных мутантов.
- •29 Генетические взаимодействия вирусов.
- •30 Негенетические взаимодействия вирусов.
- •11 Пикорнавирусы.
- •16 Реовирусы.
- •12 Тогавирусы и флавивирусы.
- •13 Коронавирусы.
- •14 Рабдовирусы.
- •15 Ретровирусы.
- •17 Парвовирусы.
- •18 Герпесвирусы и поксвирусы.
- •22 Виды культур клеток и их использование. Переживающие и плазменные культуры.
- •23 Первично-трипсинизированные культуры клеток и субкультуры, их использование.
- •24 Перевиваемые и диплоидные культуры клеток, их использование.
- •25 Роллерные и суспензионные культуры клеток, их использование.
- •26 Контаминанты клеточных культур и куриных эмбрионов, методы деконтаминации. Пути создания чистых биологических систем.
- •31 Факторы неспецифической противовирусной защиты животных.
- •32 Противовирусные ингибиторы и их роль в противовирусном иммунитете. Ингибиторы
- •Механизм действия ингибиторов
- •33 Интерферон, его природа, свойства, механизм действия, получение и применение.
- •34 Иммунная система организма и её роль в специфическом противовирусном иммунитете.
- •35 Иммуноглобулины и их роль в противовирусном иммунитете.
- •36 Живые противовирусные вакцины. Принцип получения и контроль живых вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •37 Инактивированные противовирусные вакцины. Принципы получения и контроль инактивированных вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •38 Химические вакцины. Использование методов генной инженерии для получения противовирусных вакцин.
- •39 Препараты для специфической терапии вирусных болезней животных.
- •40 Препараты для неспецифической терапии вирусных болезней. Проблема химиотерапии вирусных болезней животных.
- •41 Вирус ящура. Краткая характеристика заболевания, история открытия и основные свойства вируса.
- •42 Методы лабораторной диагностики ящура. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •43 Вирус бешенства. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •44 Методы лабораторной диагностики бешенства. Биопрепараты для специфической профилактики.
- •45 Вирус болезни Ауески. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •46 Методы лабораторной диагностики болезни Ауески. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •47 Вирус оспы животных и птиц.
- •48 Вирус диареи крупного рогатого скота.
- •49 Вирус гриппа человека и животных.
- •50 Вирус чумы крупного рогатого скота.
- •51 Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.
- •52 Вирус парагриппа-3 крупного рогатого скота.
- •53 Современные методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
- •54 Вирус классической чумы свиней.
- •55 Вирус африканской чумы свиней.
- •56 Вирус болезни Тешена.
- •57 Вирус болезни Ньюкасла.
- •58 Вирус гриппа (классической чумы) кур.
- •59 Вирус болезни Марека.
- •60 Правила работы с вируссодержащими материалами. Техника безопасности. Оборудование и аппаратура, необходимые для проведения вирусологических исследований.
- •61 Правила отбора, консервирования и транспортировки вируссодержащего материала от больных животных и трупов.
- •62 Общие принципы и современные методы диагностики вирусных болезней.
- •63 Подготовка патологического материала для вирусологических исследований.
- •64 Индикация вирусов в патологическом материале путем обнаружения вирионов и вирусных телец – включений.
- •65 Использование лабораторных животных в вирусологической практике.
- •66 Отбор яиц для инкубации, условия инкубации, отбор куриных эмбрионов для заражения вирусами.
- •67 Цели и методы заражения куриных эмбрионов.
- •68 Обнаружение вирусов в зараженных куриных эмбрионах.
- •69 Основные солевые, диспегрирующие растворы и питательные среды, необходимые для культивирования клеток, и их компоненты.
- •70 Методика получения первично-трипсинизированной культуры клеток.
- •71 Индикация вирусов в зараженных культурах клеток.
- •72 Методика титрования вирусов по единичному эффекту.
- •73 Определение титра вируса. Методика расчета лд50 по Риду и Менчу.
- •74 Схема устройства и принцип действия люминесцентного микроскопа и люминесцентных осветителей.
- •75 Основные флуорохромы и их использование при диагностике инфекционных заболеваний.
- •76 Принципы изготовления флуоресцирующих сывороток. Виды флуоресцирующих сывороток и их назначение.
- •77 Подготовка препаратов для иммунолюминесцентной диагностики. Прямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •78 Непрямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •79 Прямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •80 Непрямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •81 Использование в вирусологии реакции гемагглютинации (рга).
- •82 Реакция торможения гемагглютинации (ртга) и её практическое использование в вирусологии, достоинства и недостатки.
- •83 Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (рнга), достоинства и недостатки, практическое использование в вирусологии.
- •84 Реакция диффузной преципитации в агаровом деле (рдп) и её практическое использование в вирусологии.
- •85 Реакция встречного иммуноэлектроосмофареза (рвиэоф). Сущность реакции, применение.
- •86 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (пцр), использование в вирусологии.
- •87 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (днк-зонды), использование в вирусологии.
53 Современные методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
Одно из самых распространенных заболеваний, считается потенциально опасным для человека. Болеют КРС, реже МРС. Хроническое заболевание, вызывается онкогенным вирусом семейства ретровирусов, род дельтаретровирус.
Отличается наличием обратной транскриптазы => геном вируса входит в геном клетки, и клетки превращаются в опухолевые.
Вакцины до сих пор не созданы (готовят генетическую, культуральную, но не получается). Главное направление профилактики – правильная диагностика, отбор и выбраковка больных животных.
Методы диагностики: гематологический, серологический. Можно поставить диагноз по клинической картине, но она проявляется не сразу, и пока проявится – заразится уже все стадо.
Серологический: РИД – разновидность HLG/ используют диагностический набор, который содержит все необходимые компоненты. В агаровом геле, в центральную лунку – антиген (убитый вирус лейкоза), контроль сверху и снизу со специфической сывороткой. Остальные 4 лунки – сыворотки крови испытуемых животных (с 6мес, раньше не проводят, т.к. есть колостральные антитела). Должна быть линия преципитации со специфическими сыворотками и там, где проба положительная. Линии должны или соединяться, или должны быть слегка повернуты.
ИФА (твердофазный) – очень чувствительный.
Гематологический метод: вирус локализуется в лейкоцитах, эритроцитах, поражает кроветворные органы. Появляются незрелые формы, количество лейкоцитов увеличивается (у КРС норма 8тыс).
Разработана тест-система для ПЦР.
Кроме того, изучают хромосомный аппарат.
Лейкоз птиц диагностируют с помощью РНГА.
54 Вирус классической чумы свиней.
Высоко контагиозная болезнь. Характеризуется лихорадкой, геморрагическим диатезом, отмечается мраморный рисунок на лимфоузлах, крупозная пневмония, крупозно-дифтеретическое воспаление слизистой оболочки толстого отдела кишечника. На слизистой оболочке толстого отдела кишечника образуются своеобразные бутоны. Вирус является патогенным только для домашних и диких свиней. Животные других видов, в т.ч. и лабораторные, а также человек нечувствительны к данной болезни. Болезнь была впервые описана в 1833 году в Северной Америке. Вирусную природу болезни установили только в 1903 году (Швейниц, Дорсет). В настоящее время болезнь встречается более чем в 60 странах и на всех континентах, чаще регистрируется в странах Европы, Азии, Центральной Америки (там, где развито свиноводство). В нашей стране болезнь встречается в виде эпизоотических вспышек, редко (так как проводят иммунизацию свиней). Классическая чума свиней относится к особо опасным инфекциям (список А), наносит большой экономический ущерб свиноводству.
Возбудитель. Мелкий вирус, диаметр частиц 40-60 нм, РНК-содержащий. По степени вирулентности различают А, В и С варианты вируса. вариант А – вирулентные эпизоотические штаммы. В – вызывают атипичную (хроническую) форму болезни. С – американский (слабовирулентный) штамм.
Тип симметрии икосаэдр. Сложный вирус, имеется суперкапсидная оболочка. Пантропный вирус (в крови и кроветворных органах). Выделяется из организма с фекалиями, мочой, секретами слизистых оболочек носа и глаз.
Устойчивость высокая. В свинарнике не теряет свою вирулентность до 1 года. В замороженном мясе – более4х лет. В свежеохлажденном мясе 45-71 день, в копченостях до 3 месяцев. В навозе и трупах погибает через 3-5 дней, в почве через 1-2 недели. Неустойчив к высоким температурам, при 60 градусах инактивируется за 10 минут, при кипячении погибает моментально. Быстро инактивируется под действием УФ-лучей. Для дезинфекции наиболее эффективен 4% раствор гидроксида натрия, 2% раствор формальдегида, 3% раствор хлорной извести.
Антигенная структура. Однороден, не имеет ни серологических, ни иммунологических вариантов. Имеет антигенное родство с вирусом диареи КРС.
Культивирование
Обладает узким спектром патогенности. Культивируют в гомологичных и гетерологичный (КРС, овцы, козы) первичных культурах клеток без ЦПД. В настоящее время используют в перевиваемых культурах клеток РК-15. Обнаружить вирус в зараженной культуре можно с помощью РИФ. Используют явление экзальтации вирусов (усиление 1го вируса другим). Инфицированную вирусом чумы культуру клеток из тестикул поросенка дополнительно заражают вирусом Ньюкаслской болезни. Под влиянием вируса чумы вирус Ньюкаслской болезни интенсивнее размножается в культуре и быстрее выявляется ЦПД. Использовали интерферирующее действие вируса ящура, который в присутствии вируса чумы не вызывает ЦПД.
Лабораторная диагностика
Патматериал: от трупов кровь, кусочки селезенки, миндалин, лимфоузлов, грудной кости, почек и легких.
Экспрессные методы ПЦР, имунноэлектронную микроскопию, РИФ, результативность 43-90%
Для вирусологических методов суспензию из исследуемого материала. Ее замораживают и размораж.3 раза, выделяют на культурах клеток, выявляют с помощью РИФ. Иногда ставят пробу на поросятах. Лучше использовать иммунобиологическую пробу (2 группы, 1 вакцинируют, вторую нет). Идентифицируют в РИФ, РНГА, иммуноэлектроосмофареза, пользуются моноклональными антителами.
Ретроспективная серодиагностика – исследование сывороток крови на наличие антитела в РНГА, РН (если животное не иммунизировано), РДП, ИФА. Срок исследования обычно 21 день.
Специфическая профилактика и терапия
Профилактика: сухие вирус-вакцины из лапинизированных и культуральных аттенуированных (ослабленных) штаммов вируса чумы свиней. В России 4 живые вакцины из штамма К.
Сухая культуральная вирус-вакцина КС
Сухая культуральная вирус-вакцина ВГНКИ
Сухая культуральная вирус-вакцина ЛК-ВНИИВВиМ
Сухая лапинизированная вирус-вакцина СИНЛАК (ВНИИЗЖ)
Иммунитет после однократной прививки у взрослых животных сохраняется не менее года.
Инактивированная сухая вакцина против классической чумы свиней из штамма ЛК-К. Единственное эффективное средство иммунизации диких кабанов. Её можно использовать и перорально, и внутримышечно. И аэрозольно. Также ведутся работы по созданию инактивированных и генно-инженерных вакцин на основе рекомбинантных инактивированных штаммов.
Специфическая терапия дает слабый эффект. Из сыворотки получен иммунный глобулин