- •1 Роль ветеринарной вирусологии в подготовке ветеринарного врача. Основные причины преобладания вирусных болезней над инфекционными болезнями животных невирусной этиологии.
- •2 Состояние биологии и медицины конца XIX века. Открытие вирусов. Д.И. Ивановский – основоположник вирусологии.
- •3 Основные этапы в истории вирусологии и превращение вирусологии в одну из фундаментальных биологических наук.
- •4 Вклад отечественных ученых в развитие вирусологии.
- •5 Основные достижения, современное состояние и задачи медицинской и ветеринарной вирусологии.
- •6 Происхождение и природа вирусов.
- •7 Кардинальные свойства вирусов. Физическая структура вирусов.
- •8 Характеристика вирусных нуклеиновых кислот.
- •9 Характеристика вирусных белков.
- •10 Номенклатура вирусов.
- •19 Репродукция вирусов. Схема основных процессов, обеспечивающих реализацию генетической информации.
- •20 Синтез вирусных компонентов.
- •21 Основные типы (формы) взаимодействия вирусов с клеткой. Роль отдельных компонентов вирусной частицы.
- •27 Понятие о гене и геноме. Генотип и фенотип вирусов. Генетические признаки (маркеры) и их использование в характеристике штаммов.
- •28 Мутации и их механизмы. Практическое использование вирусных мутантов.
- •29 Генетические взаимодействия вирусов.
- •30 Негенетические взаимодействия вирусов.
- •11 Пикорнавирусы.
- •16 Реовирусы.
- •12 Тогавирусы и флавивирусы.
- •13 Коронавирусы.
- •14 Рабдовирусы.
- •15 Ретровирусы.
- •17 Парвовирусы.
- •18 Герпесвирусы и поксвирусы.
- •22 Виды культур клеток и их использование. Переживающие и плазменные культуры.
- •23 Первично-трипсинизированные культуры клеток и субкультуры, их использование.
- •24 Перевиваемые и диплоидные культуры клеток, их использование.
- •25 Роллерные и суспензионные культуры клеток, их использование.
- •26 Контаминанты клеточных культур и куриных эмбрионов, методы деконтаминации. Пути создания чистых биологических систем.
- •31 Факторы неспецифической противовирусной защиты животных.
- •32 Противовирусные ингибиторы и их роль в противовирусном иммунитете. Ингибиторы
- •Механизм действия ингибиторов
- •33 Интерферон, его природа, свойства, механизм действия, получение и применение.
- •34 Иммунная система организма и её роль в специфическом противовирусном иммунитете.
- •35 Иммуноглобулины и их роль в противовирусном иммунитете.
- •36 Живые противовирусные вакцины. Принцип получения и контроль живых вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •37 Инактивированные противовирусные вакцины. Принципы получения и контроль инактивированных вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •38 Химические вакцины. Использование методов генной инженерии для получения противовирусных вакцин.
- •39 Препараты для специфической терапии вирусных болезней животных.
- •40 Препараты для неспецифической терапии вирусных болезней. Проблема химиотерапии вирусных болезней животных.
- •41 Вирус ящура. Краткая характеристика заболевания, история открытия и основные свойства вируса.
- •42 Методы лабораторной диагностики ящура. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •43 Вирус бешенства. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •44 Методы лабораторной диагностики бешенства. Биопрепараты для специфической профилактики.
- •45 Вирус болезни Ауески. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •46 Методы лабораторной диагностики болезни Ауески. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •47 Вирус оспы животных и птиц.
- •48 Вирус диареи крупного рогатого скота.
- •49 Вирус гриппа человека и животных.
- •50 Вирус чумы крупного рогатого скота.
- •51 Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.
- •52 Вирус парагриппа-3 крупного рогатого скота.
- •53 Современные методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
- •54 Вирус классической чумы свиней.
- •55 Вирус африканской чумы свиней.
- •56 Вирус болезни Тешена.
- •57 Вирус болезни Ньюкасла.
- •58 Вирус гриппа (классической чумы) кур.
- •59 Вирус болезни Марека.
- •60 Правила работы с вируссодержащими материалами. Техника безопасности. Оборудование и аппаратура, необходимые для проведения вирусологических исследований.
- •61 Правила отбора, консервирования и транспортировки вируссодержащего материала от больных животных и трупов.
- •62 Общие принципы и современные методы диагностики вирусных болезней.
- •63 Подготовка патологического материала для вирусологических исследований.
- •64 Индикация вирусов в патологическом материале путем обнаружения вирионов и вирусных телец – включений.
- •65 Использование лабораторных животных в вирусологической практике.
- •66 Отбор яиц для инкубации, условия инкубации, отбор куриных эмбрионов для заражения вирусами.
- •67 Цели и методы заражения куриных эмбрионов.
- •68 Обнаружение вирусов в зараженных куриных эмбрионах.
- •69 Основные солевые, диспегрирующие растворы и питательные среды, необходимые для культивирования клеток, и их компоненты.
- •70 Методика получения первично-трипсинизированной культуры клеток.
- •71 Индикация вирусов в зараженных культурах клеток.
- •72 Методика титрования вирусов по единичному эффекту.
- •73 Определение титра вируса. Методика расчета лд50 по Риду и Менчу.
- •74 Схема устройства и принцип действия люминесцентного микроскопа и люминесцентных осветителей.
- •75 Основные флуорохромы и их использование при диагностике инфекционных заболеваний.
- •76 Принципы изготовления флуоресцирующих сывороток. Виды флуоресцирующих сывороток и их назначение.
- •77 Подготовка препаратов для иммунолюминесцентной диагностики. Прямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •78 Непрямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •79 Прямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •80 Непрямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •81 Использование в вирусологии реакции гемагглютинации (рга).
- •82 Реакция торможения гемагглютинации (ртга) и её практическое использование в вирусологии, достоинства и недостатки.
- •83 Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (рнга), достоинства и недостатки, практическое использование в вирусологии.
- •84 Реакция диффузной преципитации в агаровом деле (рдп) и её практическое использование в вирусологии.
- •85 Реакция встречного иммуноэлектроосмофареза (рвиэоф). Сущность реакции, применение.
- •86 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (пцр), использование в вирусологии.
- •87 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (днк-зонды), использование в вирусологии.
55 Вирус африканской чумы свиней.
Обширные кровоизлияния, цианоз кожи, тяжелые дистрофические и некротические поражения клеток ретикулоэндотелиальной системы, внутренних органов и высокой летальностью. Обладает сходными признаками с классической чумы свиней, но геморрагические процессы при африканской чуме свиней выражены сильнее, чем при классической, и не происходит образования бутонов на слизистой толстого отдела кишечника. Болеют домашние свиньи всех возрастов независимо от сезона года, а также дикие. Животные других видов невосприимчивы к вирусу африканской чумы свиней. Основным источником являются больные животные и вирусоносители. Они выделяют вирус в больших количествах с фекалиями, мочой, слюной, слезой и загрязняют окружающую среду. К факторам передачи вируса относятся все объекты внешней среды, загрязненные выделениями больных животных, а также обслуживающий персонал. Особое значение как фактор передачи приобретает мясо свиней и мясные продукты, отходы пищевых предприятий, в передачи вируса играют роль кровососущие насекомые.
Ворота инфекции – респираторный тракт, органы дыхания, слизистые рта, глаз и поврежденные кожные покровы. При первичном заболевании смертность свиней приближается к 100%.
Африканская чума была впервые изучена и подробно описана на территории Кении английским ученым Монтгомери.
Антигенная структура. Выявлено несколько серологических и иммунологических групп и подгрупп вируса. Вирус неспособен (аттенуированные штаммы) стимулировать синтез полноценных антител, не обладают вируснейтрализующими свойствами. Этим объясняется то, что создать вакцину против болезни не удается.
Вирус локализуется во всех органах и тканях.
Методы культивирования вируса:
На естественно восприимчивых животных, подсвинках 3х-4хмесячного возраста при любом методе заражения. На 4е-6е сутки животное заболевает с характерными клиническими признаками.
В культуре клеток лейкоцитов крови и клеток костного мозга свиней ЦПД появляется через 48-72 часа. Отмечается вытекание цитоплазмы, формирование многоядерных образований (клеток – теней). Пораженные вирусом клетки способны адсорбировать на себе эритроциты.
Диагностика заболеваний:
Чем быстрее будет поставлен диагноз, тем меньше будет экономический ущерб. Важным диагностическим тестом является биопроба на поросятах, иммунизированных против классической чумы. Биопробу ставят только в специализированной лаборатории с соблюдением мер предосторожности. В дальнейшем для подтверждения диагноза текущую диагностику осуществляют с помощью: РГАд, РИФ, ПЦР, ИФА. Серотипы вируса можно определить в РДП, РСК, РТГАд.
Вакцин не разработано, животных не лечат, главная профилактика – не допустить распространения болезни.
56 Вирус болезни Тешена.
Энзоотический энцефаломиелит свиней.
Болезнь Тешена – вирусная болезнь свиней, характеризующаяся поражением ЦНС. Развивается негнойный энцефаломиелит, появляется расстройство координации движения, шатающаяся походка (ходульная), параличи конечностей, шеи, глотки. Может наблюдаться ринит. Смертность от этой болезни среди заболевших поросят – 80-100%.
В естественных условиях к вирусу восприимчивы домашние и дикие свиньи, особенно поросята-отъемыши и подсвинки. Человек болезнью Тешена не болеет.
Впервые вирус был выделен в 1929 году ученым Трефни в местечке Тешени в Чехословакии. В нашей стране болезнь впервые была зарегистрирована в 1970 году.
Возбудитель болезни Тешена относится к F. Picornoviridae, род не установлен. Некоторые ученые выделяют его в самостоятельный род G. Teshovirus.
Ему свойственны признаки. Общие для семейства пикорновирусов. Диаметр частиц 25-30нм, кубический тип симметрии (икасаэдр), вирус голый, суперкапсида нет. Геном представлен односпиральной линейной молекулой РНК+. 4 полипептида в составе.
Устойчивость вируса:
Устойчив к жирорастворителям (эфиру, хлороформу), проявляет устойчивость к факторам внешней среды. При 0 градусов может сохраняться до 20 месяцев, а в замороженном виде – годами. В соленых и копченых продуктах – более 3 недель.Для дезинфекции рекомендуется горячий 3% раствор едкого натра.
Антигенная структура вируса:
Имеет 1 тип, 2 подтипа. В организме животного стимулирует образование вируснейтрализующих и комплементсвязывающих антител.
Культивирование вируса:
Вирус культивируют в культуре клеток почек, легкого, сердца, семенников поросят до 2мес. возраста и в перевиваемых культурах, таких как Hela, ВНК-15. Через несколько часов после заражения в культурах отмечается ЦПД (цитопатогенное действие). Максимальный титр вируса достигается уже к 18-24 часам. Отмечается дегенерация клеток, отделение их от стекла. Культивируют в основном на клеточных культурах.
Локализация вируса:
В крови и органах вирус обнаруживается в небольших количествах, а наивысшие титры вируса выявляют в фекалиях, в шейном и грудном отделах спинного мозга, мозжечке. К 5му дню после появления симптомов содержание вируса в ЦНС снижается, к моменту гибели животного он уже не обнаруживается.
Источником инфекции являются больные животные и реконвалесценты. Заражение здоровых животных происходит через корм, воду, мясные отходы, загрязненные выделениями больных животных. Возможно заражение при контакте здоровых животных с больными.
Лабораторная диагностика:
При подозрении на это заболевание от трупов берут кровь, кусочки из различных частей, отделов головного и спинного мозга: фрагменты КБП, мозжечка, поясничных частей спинного мозга. Хуже направлять смывы из прямой кишки и фекалии. Материал направлять нужно в термосе со льдом. Необходимо помнить о том, что вирус инактивируется в трупе животного, т.е. происходит его самостерилизация, и его можно не выделить из исследуемого материала.
Схема лабораторной диагностики включает
Экспресс-методы (ПЦР, РИФ).
Вирусологические методы: готовят хлороформенные экстракты в соотношении 1:1, проводят выделение вируса в культуре клеток первично трипсинизированных или перевиваемых. Выявляют ЦПД (дегенерацию клеток, вакуолизацию, зернистость цитоплазмы). Иногда ставят биопробу на поросятах 2х-4хмес. возраста путем интрацеребрального заражения или путем введения в скарифицированную слизистую оболочку ноздрей. Выделенный изолят идентифицируют с помощью РИФ, РН, ИФА.
Ретроспективная серологическая диагностика: предусматривает исследование сывороток крови на наличие антител к этому вирусу с помощью РН, РДП (реакции диффузионной преципитации).
На основании проведенных исследований лаборатория дает заключение о наличии или отсутствии вируса в исследуемом материале.
Специфическая профилактика и терамия энхоотического энцефаломиелита свиней.
Для специфической профилактики выпускают как живые, так и инактивированные вакцины:
Сухая вирусвакцина из аттенуированного пассажами в культуре клеток штамма;
Инактивированная гидроокисьалюминиевая формол-вакцина против болезни тешена, приготовленная из головного и спинного мозга зараженных поросят;
Инактивировання эмульгированная формол-вакцина, выращенная в перевиваемой культуре клеток почки поросенка (эмульгированная, так как адъювант – минеральное масло).
Специфическая терапия не разработана.