- •1 Роль ветеринарной вирусологии в подготовке ветеринарного врача. Основные причины преобладания вирусных болезней над инфекционными болезнями животных невирусной этиологии.
- •2 Состояние биологии и медицины конца XIX века. Открытие вирусов. Д.И. Ивановский – основоположник вирусологии.
- •3 Основные этапы в истории вирусологии и превращение вирусологии в одну из фундаментальных биологических наук.
- •4 Вклад отечественных ученых в развитие вирусологии.
- •5 Основные достижения, современное состояние и задачи медицинской и ветеринарной вирусологии.
- •6 Происхождение и природа вирусов.
- •7 Кардинальные свойства вирусов. Физическая структура вирусов.
- •8 Характеристика вирусных нуклеиновых кислот.
- •9 Характеристика вирусных белков.
- •10 Номенклатура вирусов.
- •19 Репродукция вирусов. Схема основных процессов, обеспечивающих реализацию генетической информации.
- •20 Синтез вирусных компонентов.
- •21 Основные типы (формы) взаимодействия вирусов с клеткой. Роль отдельных компонентов вирусной частицы.
- •27 Понятие о гене и геноме. Генотип и фенотип вирусов. Генетические признаки (маркеры) и их использование в характеристике штаммов.
- •28 Мутации и их механизмы. Практическое использование вирусных мутантов.
- •29 Генетические взаимодействия вирусов.
- •30 Негенетические взаимодействия вирусов.
- •11 Пикорнавирусы.
- •16 Реовирусы.
- •12 Тогавирусы и флавивирусы.
- •13 Коронавирусы.
- •14 Рабдовирусы.
- •15 Ретровирусы.
- •17 Парвовирусы.
- •18 Герпесвирусы и поксвирусы.
- •22 Виды культур клеток и их использование. Переживающие и плазменные культуры.
- •23 Первично-трипсинизированные культуры клеток и субкультуры, их использование.
- •24 Перевиваемые и диплоидные культуры клеток, их использование.
- •25 Роллерные и суспензионные культуры клеток, их использование.
- •26 Контаминанты клеточных культур и куриных эмбрионов, методы деконтаминации. Пути создания чистых биологических систем.
- •31 Факторы неспецифической противовирусной защиты животных.
- •32 Противовирусные ингибиторы и их роль в противовирусном иммунитете. Ингибиторы
- •Механизм действия ингибиторов
- •33 Интерферон, его природа, свойства, механизм действия, получение и применение.
- •34 Иммунная система организма и её роль в специфическом противовирусном иммунитете.
- •35 Иммуноглобулины и их роль в противовирусном иммунитете.
- •36 Живые противовирусные вакцины. Принцип получения и контроль живых вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •37 Инактивированные противовирусные вакцины. Принципы получения и контроль инактивированных вакцин. Основные достоинства и недостатки.
- •38 Химические вакцины. Использование методов генной инженерии для получения противовирусных вакцин.
- •39 Препараты для специфической терапии вирусных болезней животных.
- •40 Препараты для неспецифической терапии вирусных болезней. Проблема химиотерапии вирусных болезней животных.
- •41 Вирус ящура. Краткая характеристика заболевания, история открытия и основные свойства вируса.
- •42 Методы лабораторной диагностики ящура. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •43 Вирус бешенства. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •44 Методы лабораторной диагностики бешенства. Биопрепараты для специфической профилактики.
- •45 Вирус болезни Ауески. Краткая характеристика заболевания и основные свойства вируса.
- •46 Методы лабораторной диагностики болезни Ауески. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии.
- •47 Вирус оспы животных и птиц.
- •48 Вирус диареи крупного рогатого скота.
- •49 Вирус гриппа человека и животных.
- •50 Вирус чумы крупного рогатого скота.
- •51 Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.
- •52 Вирус парагриппа-3 крупного рогатого скота.
- •53 Современные методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
- •54 Вирус классической чумы свиней.
- •55 Вирус африканской чумы свиней.
- •56 Вирус болезни Тешена.
- •57 Вирус болезни Ньюкасла.
- •58 Вирус гриппа (классической чумы) кур.
- •59 Вирус болезни Марека.
- •60 Правила работы с вируссодержащими материалами. Техника безопасности. Оборудование и аппаратура, необходимые для проведения вирусологических исследований.
- •61 Правила отбора, консервирования и транспортировки вируссодержащего материала от больных животных и трупов.
- •62 Общие принципы и современные методы диагностики вирусных болезней.
- •63 Подготовка патологического материала для вирусологических исследований.
- •64 Индикация вирусов в патологическом материале путем обнаружения вирионов и вирусных телец – включений.
- •65 Использование лабораторных животных в вирусологической практике.
- •66 Отбор яиц для инкубации, условия инкубации, отбор куриных эмбрионов для заражения вирусами.
- •67 Цели и методы заражения куриных эмбрионов.
- •68 Обнаружение вирусов в зараженных куриных эмбрионах.
- •69 Основные солевые, диспегрирующие растворы и питательные среды, необходимые для культивирования клеток, и их компоненты.
- •70 Методика получения первично-трипсинизированной культуры клеток.
- •71 Индикация вирусов в зараженных культурах клеток.
- •72 Методика титрования вирусов по единичному эффекту.
- •73 Определение титра вируса. Методика расчета лд50 по Риду и Менчу.
- •74 Схема устройства и принцип действия люминесцентного микроскопа и люминесцентных осветителей.
- •75 Основные флуорохромы и их использование при диагностике инфекционных заболеваний.
- •76 Принципы изготовления флуоресцирующих сывороток. Виды флуоресцирующих сывороток и их назначение.
- •77 Подготовка препаратов для иммунолюминесцентной диагностики. Прямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •78 Непрямой метод флуоресцирующих антител (мфа).
- •79 Прямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •80 Непрямой метод иммуноферментного анализа (ифа).
- •81 Использование в вирусологии реакции гемагглютинации (рга).
- •82 Реакция торможения гемагглютинации (ртга) и её практическое использование в вирусологии, достоинства и недостатки.
- •83 Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (рнга), достоинства и недостатки, практическое использование в вирусологии.
- •84 Реакция диффузной преципитации в агаровом деле (рдп) и её практическое использование в вирусологии.
- •85 Реакция встречного иммуноэлектроосмофареза (рвиэоф). Сущность реакции, применение.
- •86 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (пцр), использование в вирусологии.
- •87 Генетические методы диагностики вирусных болезней животных (днк-зонды), использование в вирусологии.
40 Препараты для неспецифической терапии вирусных болезней. Проблема химиотерапии вирусных болезней животных.
Интерфероны (ИФН) — это группа биологически активных белков или гликопротеидов, синтезируемых клеткой в процессе защитной реакции на чужеродные агенты. Препятствуют адсорбции вируса на клетке и подавляют процесс репликации вирусных НК (воздействуют на иРНК)
Иммуномодуляторы. В последние годы внедряются в практику препараты, приготовленные из тканей органов, участвующих в выработке иммунитета (суспензия тимуса, Т-активин, тимоген, гомотин). Т-активин получают экстракцией из тимуса крупного рогатого скота, выпускают в виде 0,01%-ного раствора. Т-активин является иммуномодулирующим средством, оказывает влияние на Т-систему иммунитета организма, восстанавливает нарушенную иммунологическую реактивность организма при первичных (врожденных) и вторичных (приобретенных) иммунодефицитных состояниях, а также стимулирует синтез иммунного интерферона, увеличивает миграционную способность лейкоцитов, в результате чего восстанавливает напряженность клеточного иммунитета.
Химиотерапевтические препараты. Вирусы являются внутриклеточными паразитами, и сложно подобрать препарат, который бы убивал вирус, не повреждая клетку, однако такие препараты начинают внедряться в практику. В зависимости от механизма противовирусного действия химиотерапевтических препаратов можно выделить несколько групп. 1. Ингибиторы репродукции вируса. К таким препаратам относятся амантацин и римантадин. Они блокируют стадию депротеинизации (раздевания) вирусов. 2. Ингибиторы сборки и освобождения потомства вирусных частиц. 3. Ингибиторы синтеза компонентов вируса (виразол, рибовирин, видарабин, марборан). 4. нуклеазы (рибонуклеаза, дезоксирибонуклеаза) - естественные ингибиторы. Они хорошо проникают в любые органы и ткани, даже в центральную нервную систему. Они действуют в клетке после депротеинизации вирусных частиц и вызывают деполимеризацию нуклеиновых кислот вирусов. Арбидол обладает прямым противовирусным действием на возбудителей ОРВЙ путём подавления ранней стадии вирусной репродукции.
Индукторы интерферона являются живые слабовирулентные или инактивированные РНК-содержащие вирусы, нуклеиновые кислоты (особенно двуцепочечная РНК), синтетические полирибонуклеотиды, бактериальные антигены, эндотоксины и липополисахариды, полианионы, некоторые соединения растительного происхождения, например, низкомолекулярные полифенолы, выделенные из березы и госсипола хлопчатника, некоторые антибиотики и красители.
Характеристика отдельных вирусов
41 Вирус ящура. Краткая характеристика заболевания, история открытия и основные свойства вируса.
Ящур – остропротекающее инфекционное заболевание, характеризуется формированием своеобразных пузырьков (афт) на слизистой оболочке ротовой полости, на коже вымени, реже – на слизистых пищеварительного тракта. В связи с этим наблюдается саливация, мастит, хромота, спадание копытного рога. У молодых животных вирус поражает сердечную и скелетную мускулатуру. Гибель животных 40-60%. Инкубационный период от 36 часов до 7 дней.
Ящур – заболевание высоко контагиозное. Вирус легко передается от больных животных к здоровым, поэтому часто протекает в виде эпизоотии или панзоотии.
Ящуром болеют парнокопытные животные - КРС, МРС, свиньи (афты между копытцев). Олени, лошади и птицы не болеют. У кошек и собак ящур протекает бессимптомно. Из диких болеют сайгаки, лоси, лани, серны, косули, зубры, яки, кабаны. Дикие животные могут передать вирус сельскохозяйственным через сено, солому, воздух. К вирусу ящура восприимчив человек. Болезнь протекает доброкачественно.
Вирус ящура является очень устойчивым к повышенной температуре. Во внешней среде при 30 градусах может сохраняться больше суток, про 70 градусах – 30 минут, при кипячении погибает. При низких температурах сохраняется длительное время. Долгое время сохраняется в инфицированных кормах, в охлажденных и замороженных продуктах животного происхождения.
Дезинфицирующие средства: хлорная известь, лизол, креолин, фенол. В обычных концентрациях мало эффективны, убивают вирус в течение нескольких часов. Рекомендуют: горячие растворы едкого натра, 1% формальдегида. Вирус не инактивируется 85% этанолом, устойчив к эфиру и хлороформу.
Культивирование:
В организме естественно восприимчивых животных, метод дорогой и небезопасный;
В организме лабораторных животных – мышат-сосунов, молодых морских свинок и крольчат;
В переживающих тканях эпителия языка КРС по методу Френкена;
В монослойных и суспензионных культурах клеток КРС и свиней. Вирус вызывает острую инфекцию клеток и ЦПД. Монослой через 12-15 часов после заражения округляется, вакуолизируется, разрушается. Монослойные культуры используют для выделения и идентификации вируса, суспензионные – для вакцин.
На куриных эмбрионах не культивируется.
Локализация вируса. У большинства животных при наличии афт большое количество в афтозной жидкости, ещё больше в стенках афт. Может быть в крови. После лопанья афт исчезает из крови, но остается во внутренних органах. Выделяется со слюной, мочой, молоком, фекалиями, спермой. Установлено, что выделение может происходить и в инкубационном периоде. После убоя больных животных при созревании мяса накапливается молочная кислота – вирус инактивируется, происходит самостерилизация трупа. Там, где этот процесс не происходит – вирус сохраняется.
Антигенная структура. В составе вирусной частицы 70% белков, они защищают РНК. С белками связана серологическая и иммунологическая специфичность. Каждый капсомер состоит из 4х основных (мажорных) структурных белков. VP-2, VP-3, VP-4 – снаружи, VP-1 – внутри. Он стимулирует образование в организме вируснейтрализующих антител – протективный антиген. Белок VP-1 – типоспецифический антиген, VP-4 – видоспецифический. В организме больных животных вирус ящура индуцирует выработку нейтрализующих, комплемент связывающих и преципитирующих антител, специфичных для типа или варианта вируса. У вируса ящура имеется несколько типов (А, О, С, Азия-1, Сат-1, 2, 3) и 64 варианта: у А – 32, у О – 11, Азия 1 – 2, Сат 1 – 7, Сат 2 – 3, Сат 3 – 4.
Диагноз можно ставить:
Болезнь парнокопытных;
100% охват;
Характерная клиника;
В 100% случаев афты у коров во рту, у свиней в межкопытных щелях, у телят нет афт;
У телят и поросят – «тигровое сердце»
Такая диагностика позволяет начать карантинные, общепрофилактические и санитарные мероприятия. Лабораторная диагностика обязательна. Она позволяет определить тип и вариант вируса. Необходимо дифференцировать от ящуроподобных заболеваний: везикулярный стоматит, везикулярная болезнь свиней, везикулярная экзантема свиней.