Навч.посібник Акушерство, гінекологія та штучне осіменіння с.г. тварин, Харута, 2013

методів визначення оптимального часу осіменіння або за низької кваліфікації техніків штучного осіменіння.

Для визначення статевої охоти застосовують лише метод самця пробника (рефлексологічний), а оптимальний час для введення сперми виявляють за допомогою клініко візуального і сонографічного методів (за симптомокомплексом тічки, загального збудження та сонографічних змін у яєчниках і матці) та за стадією зрілості фолікулів.

Рідше для визначення оптимального часу застосовують методи: електрометричний (визначення електропровідності тічкового слизу), метод мікроскопії краплі тічкового слизу, алергічний, комп’ютерний (за зміною температури шийки матки), метод педометрії (за зміною частоти кроків), актометрії (визначення рухливості самок), мисливських і службових собак, биків кастратів та корів (телиць) виявниць.

Статеву охоту у корів і телиць визначають рефлексоло гічним методом. Пробників готують зі здорових, статево активних, фізично міцних бугаїв віком 8 – 10 міс. Під час відбору пробника звертають увагу на стан статевих органів, копитець, постанову кінцівок, особливо тазових, оскільки вони слугують опорою при плиганні на самок.

За одним пробником закріплюють 100–150 самок. Щоб запобігти гальмуванню статевих рефлексів, пробників утриму ють окремо від самок, а від пробників, з відведеним у бік статевим членом, один раз на тиждень отримують сперму на штучну вагіну. Щоденно вранці і ввечері на 1,5–2 год бугаїв пробників випускають у загони, де утримуються неплідні, отелені (з 4 – 6 го дня після родів), осімінені (з 10 го по 30 й день після осіменіння) корови. Після виявлення позитивної реакції самку вилучають із стада. Якщо цього не зробити, пробник може не реагувати на інших тварин зі статевою охотою.

Оскільки корови під час стадії збудження статевого циклу активно проявляють локомоторний рефлекс, Д.Д. Логвинов запропонував застосовувати метод “бугая виявника”. З цією

101

метою у куті вигульного майданчика роблять загін для утримання бугая. Для забезпечення кращого контакту між тваринами його розміщують неподалік від місць водопою тварин. Самки в охоті підходять до місця утримання пробника, чіткіше проявляють статеву активність. За цими ознаками їх відбирають на осіменіння.

Для підвищення ефективності виявлення тварин в охоті рефлексологічним методом, особливо в м’ясному скотарстві, використовують мітчики – металеві контейнери напівсферичної форми, на верхівці яких розташовується кулька діаметром близько 2,5 см.

Пристрій фіксують під нижньою щелепою бугая за допомогою ременів.

Порожнину мітчика заповнюють фарбою, колір якої залежить від масті тварин. Наявність фарби у мітчику необхідно контролювати не рідше одного разу на тиждень. Під час плигання пробника на корову в охоті він натискує на кульку і відбувається виділення фарби, внаслідок чого на спині корів у охоті залишаються короткі лінії. Позитивну пробу на охоту встановлюють у разі виявлення двох і більше міток (одна може бути випадковою).

Виявлених корів і телиць осіменяють двічі: перший раз після виявлення статевої охоти та другий – через 10–12 год за її наявності. У разі застосування пробників, здатних до коїтусу, прискорюється час овуляції, тому тварин осіменяють однократ но – зразу ж після виявлення позитивної реакції.

До недоліків методу слід віднести велику трудомісткість, ризик травматизму. Використання пробників, здатних до статевого акту, не виключає небезпеку поширення заразних хвороб, які передаються статевим шляхом.

Клініко візуальний метод визначення оптимального часу введення сперми є найпоширенішим, що пояснюється його простотою. Він ґрунтується на виявленні у тварин клінічних ознак та змін поведінки, характерних для стадії збудження

102

статевого циклу. Найбільш ймовірним показником того, що корова знаходиться в охоті, є “рефлекс нерухомості”, коли тварина допускає плигання на себе інших тварин (рис. 9).

Рис. 9. Прояв коровою “рефлексу нерухомості” під час плигання на неї інших самок

До додаткових ознак відносять садку в ділянці крупа, кореня хвоста і сідничних горбів, зміну поведінки, стрибання на інших самок, підвищення рухливої активності, набряк статевих губ і почервоніння слизової оболонки переддвер’я піхви, витікання еластичного, прозорого тічкового слизу зі статевих органів, зниження продуктивності, погіршення якості молока.

Для визначення оптимального часу введення сперми вико ристовують також биків кастратів та корів (телиць) виявниць.

Для підвищення ефективності клініко візуального методу і полегшення спостереження за тваринами використовують методи фарбування кореня хвоста, детектори плигань KaMar,

Маtе Маstег, Ноt Flash, Heat Watch.

103

Для цього оператор штучного осіменіння за циклографом, записами, календарем визначає очікувану дату прояву стадії збудження статевого циклу твариною і наносить кольорову мітку на крижі довжиною 20 і шириною 6,3 см. Зникнення фарби за дво , триразового нанесення протягом дня означає, що корова проявляла “рефлекс нерухомості”.

Детектор сплигувань KaMaR – це пластикова капсула з тюбиком, заповненим червоною фарбою, оточеною білою, губчатою речовиною всередині, прикріплений на підкладку з тканини. Їх приклеюють на крижову ділянку спини корови.

Під час сплигування інших тварин на корову тюбик з фарбою лопається і губчаста речовина забарвлюється в яскраво червоний колір.

Показники детектора вважаються позитивними, якщо його пластикова капсула забарвлюється на 50 % і більше.

Установлено, що корови проявляють рефлекс нерухомості протягом 5,1–13 год. За цей час відбувається від 6 до 50 ти плигань. На тривалість прояву рефлексу нерухомості мають вплив вік, кількість тварин в охоті, температура навколишнього середовища.

Використання детекторів рухової активності.

Вважається, що пік рухової активності збігається зі стадією збудження статевого циклу. Для визначення активності тварин в умовах виробництва використовують механічні та електронні педометри. Перші працюють за принципом “так–ні”: у разі збільшення рухової активності вдвічі вмикається червона лампочка, за зменшення – зелена. Контроль проводять два рази на добу.

Метод трансректальної пальпації статевих органів (за ступенем зрілості фолікулів). Під час дослідження яєчників визначають їх топографію, розмір, форму, поверхню, консистенцію, чутливість та оцінюють стан граафового міхурця і передбачають орієнтовний час овуляції.

104

На початку охоти домінантний фолікул ледь виступає на поверхні яєчника, промацується у вигляді міхурця розміром 0,5–1 см з пружною гладенькою поверхнею. Зрілий граафів міхурець чітко виступає на поверхні яєчника у формі пухирця діаметром 1,5–2 см. За обережного надавлювання на нього відчувається флуктуація, стінки фолікула м’яко вдавлюються. Такий стан вказує, що до овуляції залишилося 6–12 год і є показником оптимального часу для введення сперми. Після овуляції стінки фолікула спадаються і на його місці утворюється заглиблення з пухкими краями, матка втрачає ригідність.

Електрометричний метод виявлення оптимального часу осіменіння корів базується на зміні електропровідності ( опірності) секрету, що виділяється з шийки матки та зміні електричного опору слизової оболонки піхви під час стадії збудження статевого циклу.

Раніше для цього використовувалися прилади ИИП – 2М, Естрометр 2. Однак через погане технологічне виконання приладів метод не набув широкого практичного використання.

Останнім часом широко застосовується прилад фірми “Драмінскі” для визначення часу осіменіння корів за змінами електричного опору слизу, що покриває слизову піхви – “Електронний визначник тічки у корів”.

Результат вимірювання реєструють через 1,5 –2 секунди після включення приладу за стійкими показниками на табло. Після чергового вимірювання зонд потрібно вимити в теплій воді з додаванням мийних засобів та продезінфікувати.

До сприятливого прогнозу доцільно відносити показники менше 220 у.о,. а 230 у.о. і більше – відносять до сумнівного прогнозу заплідненості.

Метод відеоспостереження базується на цілодобовому чи вибірковому протягом доби спостереженні за поведінкою тварин за допомогою відеокамер. При цьому можливі два варіанти спостереження й аналізу: перший – безпосереднє спостереження за поведінкою тварин чергового оператора і

105

реєстрація номерів корів, що допускають плигання на себе інших тварин; другий – щоденний ранковий та вечірній перегляд відеозаписів і відбір тварин для осіменіння.

Метод високоефективний, але вимагає значних матеріаль них витрат на придбання обладнання. Тварин потрібно нумерувати великими цифрами на крижах або в ділянці спини чи грудної клітки (краще з обох боків), щоб під час перегляду плівки можна було їх ідентифікувати.

Лабораторні методи визначення оптимального часу осіменіння корів базуються на використанні хімічних, фізичних, цитологічних методів дослідження зразків крові, молока, цервікального чи вагінального слизу, зіскобів слизової оболонки переддвер’я піхви для визначення тих чи інших змін, які вказують на сприятливий для осіменіння час.

Нині широко використовується ультразвукове дослідження (УЗД), що значно розширює діагностичні можливості. Так, застосування УЗД дозволяє візуалізувати функціональні утворен ня (розміром 2 мм і більше) в яєчниках корів.

Пряму кишку звільняють від калових мас і методом пальпації визначають стан та топографію матки і гонад, після чого вводять зонд і розміщують над яєчниками, спочатку правим, а потім лівим. Визначають наявність фолікулів та за допомогою програм каліпера їх розміри.

У кобил статеву охоту визначають за допомогою жеребця пробника, починаючи з 3 го дня після родів та з 10–15 го дня після осіменіння. Для цього кобилу, розковану на задні кінцівки, заводять у манеж і утримують під вуздечку. Пробника підводять на поводах до голови кобили. Кобила поза охотою намагається вкусити пробника, втекти від нього або повернутися задом, щоб вдарити. Безпечною є проба на виявлення статевої охоти через дерев’яний бар’єр висотою 1,2–1,3 і довжиною 2,5 м. З одного боку, кобилу для проби підводять до бар’єра, а з іншого – перешкоди підводять жеребця. Позитивною реакцією на жеребця є його покусування, частіше сечовиділення,

106

“миготіння” статевих губ. Після виявлення позитивної реакції допускають безпосередній контакт тварин для визначення статевої охоти.

Охоту можна визначати за щоденного контакту під час перебування пробника протягом 1,5–2 год в табуні (на 10–20) кобил.

За допомогою трансректальної пальпації яєчників можна визначити ступінь зрілості фолікулів. Оптимальним часом для введення сперми є м’яка флуктуація фолікулів.

Об’єктивним методом визначення оптимального часу для осіменіння кобил є трансректальне ультразвукове дослідження, яке базується на визначенні змін форми і розмірів передовуля ційних фолікулів.

Введення сперми починають на 2 й день після початку статевої охоти і повторюють через кожні 48 год до “відбою” – прояву негативної реакції кобили на жеребця.

Усвиноматок статеву охоту визначають шляхом щоден ного (вранці та ввечері) контакту з пробником. На 50 свиноматок використовують одного пробника.

Увеликих свинокомплексах самок для осіменіння відбирають в окремі станки, між якими проганяють кнура або використовують механічний фантом, оброблений синтетичними феромонами.

Розроблені автоматизовані системи виявлення свиноматок для осіменіння. У приміщенні, де вільно утримуються свиноматки, розміщують бокс з глухими стінками, в одну з яких вмонтовують блок визначення локомоторного рефлексу Недап Велос, який зчитує індивідуальні номери свиноматок, що намагаються контактувати з кнуром, реєструє їх у комп’ютері та за третьої спроби контакту мітить тварин фарбою.

Самок, які реагують на кнура, відокремлюють і проводять індивідуальну пробу.

Виявляють ймовірність охоти за зміною поведінки самок, появою “рефлексу нерухомості”.

107

Статеву охоту починають визначати зразу ж після відлучення поросят і з 10 го дня після осіменіння. Вибір часу осіменіння залежить від кратності виявлення тварин в охоті. Якщо спостереження за тваринами проводиться чотири рази, осіменіння молодих свинок проводять одноразово через 17–18, а основних – через 21–24 год після виявлення статевої охоти. За дворазового контролю статевої охоти (з проміжком 10–12 год) сперму вводять двічі: якщо охота виявлена вранці, свиноматок осіменяють ввечері і навпаки. Другий раз тварин осіменяють через 10–12 год після першого введення сперми. Якщо за тваринами спостерігають один раз на добу, то осіменіння виконують через 12 та 24 год після встановлення статевої охоти.

У овець і кіз статеву охоту визначають у статевий сезон. У отару з 50–100 самками щоденно рано і ввечері на 1,5–2 год випускають 5–6 баранів пробників. Пробникам до підгрудка чіпляють “мітчики” з барвниками. Отару проганяють через розкол і видаляють мічених самок та осіменяють їх дворазово з інтервалом 24 год. За відсутності “мітчиків” чабани самі спостерігають за реакцією самок на пробника і виділяють тварин з позитивною реакцією.

2.19. ПІДГОТОВКА СПЕРМИ ДО ВВЕДЕННЯ

Розморожування сперми проводять з використанням приладів: біотермостат ТБ 010, “Росинка”, “Росинка 1”, АЗСУ 3, 4 (активатор замороженої сперми універсальний).

Сперму бугаїв, фасовану в формі необлицьованих гранул, розморожують за температури 38 ± 0,5 °С в ампулах з розчином натрію цитрату або в стерильних флакончиках з під антибіотиків. У нього наливають 16 мл 2,9 % розчину лимонно кислого натрію та ставлять на 2–3 хв у водяну баню для підігрівання розчину. Рівень води у водяній бані повинен лише закривати стовпчик розчину у флаконі. З посудини Дьюара, охолодженим у рідкому азоті пінцетом, дістають необлицьовану

108

гранулу і опускають у флакон з підігрітим розчином лимонно кислого натрію. Флакончик безперервно погойдують рукою до повного розморожування гранули, потім флакончик виймають і ставлять за кімнатної температури на фільтрувальний папір. Після оцінки рухливості сперму набирають в інструмент для введення.

Під час розморожування сперми, що зберігається в облицьованих гранулах, з біотермостата виймають штатив. Гранулу опускають у воду (38±0,5 °С) і витримують до появи тонкого стержня льоду (10–12 с). Потім пінцетом виймають гранулу, струшують воду, почергово протирають стерильними марлевими серветками та ватним тампоном, змоченим у 96° спирті, і вводять у зоошприц.

Тривалість розморожування пайєт (соломинок) становить: об’ємом 0,25 см3 – 20 с; 0,5 см3 – 40 с за температури 35 °С.

Сперму баранів і цапів розморожують в 1 мл 2,9 % натрію цитрату, підігрітого до температури 45 – 50 ºС за постійного погойдування.

Заморожену сперму жеребців розморожують у водяній бані за температури 38 °С. Тривалість розморожування пайєт становить 10 с, алюмінієвих туб – 50 с.

Використовувати розморожену спермодозу потрібно лише за кімнатної температури (18–22 °С) впродовж 10–15 хв.

Слід дотримуватися режимів розморожування сперми; не виймати мішечки з гранулами сперми за межі нижньої третини горловини посудини Дьюара і поміщати їх зразу ж після взяття гранули назад.

Розріджену сперму кнурів, жеребців, яка зберігається за температури льоду, який розстає, або при кімнатній темпера турі, перед введенням необхідно підігріти на водяній бані до 30–35 °С протягом 5–7 хв.

109

2.20. СПОСОБИ ШТУЧНОГО ОСІМЕНІННЯ

Штучне осіменіння – біотехнологічний метод розмноження із застосуванням прийомів отримання, оцінки, розрідження і зберігання сперми плідників та введення її самкам за допомогою спеціальних інструментів.

Осіменіння корів проводять ректо , мано та візоцерві кальними способами, телиць – ректо , візо та епіцервікальними.

Перед введенням сперми обов’язково проводять “вологу” або “суху” обробку зовнішньої поверхні статевих губ і промежини. Для “вологої” обробки використовують теплий розчин фурациліну (1:5000) або фурацилін такої ж концентрації, виготовлений на ізотонічному розчині NaCl. Зволожену поверхню статевих губ ретельно витирають ватними тампонами зверху донизу статевої щілині. За сухої обробки зовнішню поверхню статевих губ протирають сухими ватними тампонами

(рис.10).

Рис. 10. Обробка зовнішніх статевих губ у корови

Цервікальний з ректальною фіксацією шийки матки спосіб введення сперми (ректоцервікальний, бімануальний).

110