Тема 3 – Современные методы анализа, применяемые в аналитической диагностике острых отравлений. Хроматографические методы определения токсичных веществ.

Цель: Ознакомление студентов с методами анализа, применяемых в аналитической диагностике острых отравлений.

Задачи обучения: научить студентов методам анализа, применяемых при диагностике острых отравлений, а также хроматографическим методам определения токсичных веществ.

Форма проведения: групповое обсуждение с презентацией

Задания по теме:

1. Схема химико-токсикологического анализа при диагностике острых отравлений.

2. Методология хроматографических методов определения токсичных веществ.

Раздаточный материал

1. При острых отравлениях необходимо немедленно оказать медицинскую помощь пострадавшему, начиная с догоспитального этапа и продолжая в стационаре токсико­логического или реанимационного профиля. В тех случаях, когда клинические проявления на ранних стадиях развития интоксикации не позволяют установить причину отравления, проводят качественные и количественные иссле­дования в возможно короткие сроки (максимум в течение 1—2 ч после поступления больного в стационар). Успех проведения ХТА при диагностике острых отравлений зависит от качества и скорости обмена информацией между клиницистом и химиком. Объем и глубина проведения ХТА в большинстве случаев определяется потребностями клиницистов. Подробное изучение клинической картины отрав­ления, характерных симптомов отравления отдельными ядами является одним из основных условий адекватного выбора методов ХТА. Поэтому химик-токсиколог должен знать главные симптомы острых отравлений различными токсикантами.

2. Кликико-токсикологический анализ (КТА) проводят в следующих случаях.

• Для установления различия между опьянением и отравлением.

• Для установления информации о пациенте при отсутствии таковой (например, частота и ин­тенсивность потребления наркотиков, алкоголя, случаи интоксикации в прошлом и т.д.). При комплексных отравлениях, например наркотиком и алкоголем или метанолом и этано­лом и др.

• При отравлении без выраженной клинической картины, например при отравлении параце­тамолом.

• При судебных разбирательствах. По специальному запросу.

• В научно-исследовательских и учебных целях, при сборе статистических данных и т.п. Когда метод и интенсивность лечения зависят от концентрации токсиканта в организме. Когда прогноз лечения зависит от концентрации токсиканта в плазме крови, например при отравлении пестицидами (паракватом).

• При необходимости отличить терапевтические и токсичные концентрации вещества в орга­низме.

• При комплексных интоксикациях, например интоксикациях наркотиками и этанолом. При токсикологическом мониторинге.

• При отсутствии утвержденного метода количественного определения, например при иссле­довании отравлений растительными сборами.

Объектами КТА при острых отравлениях обычно являются кровь, сыворотка или плазма, моча, содержимое желудка, слюна.

3. При экспресс-диагностике острых отравлений применяют различные методы.

• Иммунохроматографические и иммуноферментные.

• Ферментативные:

— определение активности алкогольдегидрогеназы по скорости окисления

этанола до ацет­альдегида (см. гл. 8.1);

— определение активности ацетилхолинэстеразы (см. гл. 8.4) и др.

• Спектофотометрическое определение общей концентрации пептонов, низкомолекулярных белков.

• Цветные реакции непосредственно с биообъектами:

— определение фенотиазинов в моче по реакции с FPN-реактивом [хлорид

железа (III) в смеси перхлорной и азотистой кислотами];

— определение салицилатов, параквата, цианидов и других токсикантов в

моче;

— определение оксида углерода (II) в цельной крови.

• Биохимические:

— определение глюкозы в плазме крови.

4. Хроматографические методы (ХТ) определения токсичных веществ. Хроматография – физико-химический метод разделения веществ или частиц , основанный на различии в скорости их перемещения в системе несмешивающихся и движущихся относительно друг друга фаз.

Классификация хроматографических методов:

• По агрегатному состоянию фаз хроматографической системы (газовая, газоадсорбционная, газожидкостная, газомезофазная, жидкостная, жидкостно-адсорбционная, жидкостно-жидкостная, противоточная жидкостная, мицелярная, сверхкритическая флюидная, полифазная).

• Пос способу перемещения сорбента (вытеснительная, фронтальная, элюентная, изократическая, градиаетная, с программированием температуры, с программированием давления, с программированием расхода подвижной фазы и хромадистилляция).

• По конфигурации разделяющей системы (планарная, тонкослойная, бумажная, циркуляционная, многоколоночная, мультихроматография, многомерная, перколяционная).

• По механизму разделения (адсорбцтонная, распределительная, эксклюзивная, аффинная,лигандообменная,иннообменная, ион-парная,гидродинамическая, фракционирование, гидрофобная, гидрофильная,, критическая, аналитическая, препаративная, обращенная газовая,обращенная ситовая, энантиоселективная).

• По цели (аналитическая, препаративная, обращенная газовая, обращенная ситовая)

• По химическому превращению сорбата (реакционная, пиролитическая, осадочная)

• По способу детектирования (радиохроматография, хромато-масс-спектрометрия, ХТ с непрямым детектированием).

Литература

1. Токсикологическая химия: метаболизм и анализ токсикантов: учебное пособие + СD/ под ред. Н.И. Калетиной. – М., 2008. – 1016 с. Переплет.

2. Токсикологическая химия: учебник / под ред. Т.В. Плетеневой. – 2-ое изд. – М., 2008. – 512 с. Переплет.

3. Лужников Е.А. Клиническая токсикология. -М.,"Медицина", 1994. –189с.

4. Крамаренко В. Ф. Токсикологическая химия / В. Ф. Крамаренко. - Киев, «Высшая школа», 1989.- 272с.

Контрольные вопросы

1. Методы анализа, применяемые в аналитической диагностике острых отравлений.

2. Когда проводят клинико-токсикологический анализ?

3. Объекты клинико-токсикологическогоанализа.

4. Методы анализа, применяемые при экспресс-диагностике острых отравлений.

5. Классификация хроматографических методов определения токсичных веществ.

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ ПОД РУКОВОДСТВОМ ПРЕПОДАВАТЕЛЯ