Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
3 курс / Общая хирургия и оперативная хирургия / Кровотечения, трансфузии.doc
Скачиваний:
1
Добавлен:
24.03.2024
Размер:
1.96 Mб
Скачать

3) Определение групп крови моноклональными антителами

а) Необходимое оснащение

Для определения группы крови используются моноклональные анти­тела, для получения которых применяется гибридомная биотехнология.

Гибридома - это клеточный гибрид, образованный путем слияния клетки опухоли костного мозга (миеломы) с иммунным лимфоцитом, син­тезирующим специфические моноклональные антитела. Гибридома при­обретает свойства обоих «родителей»: способность к неограниченному росту, характерную для опухолевой клетки, и возможность синтезиро­вать антитела, присущую иммунному лимфоциту. Разработаны стандартные реагенты - моноклональные антитела (МКА): цоликлоны анти-А и анти-В, которые применяют для определения агглютиногенов эритроцитов. Цоликлоны представляют из себя лиофилизированный порошок красного (анти-А) или синего (анти-В) цве­та, который разводят изотоническим раствором хлористого натрия непосредственно перед исследованием.

б) Техника проведения реакции

Цоликлоны анти-А и анти-В наносят на белый планшет по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями: анти-А или анти - В. Рядом с каплями антител наносят по одной маленькой капле (0,01мл) исследуемой крови. После перемешивания составных частей за реакцией агглютинации наблюдают в течение 2-3 мин.

Схема оценки результатов определения групп крови с помощью моноклональных антител (цоликлоны анти-А и анти-В)

Наличие агглютинации при реакции с цоликлоном

Группа крови

Анти-А

Анти-В

-

-

Oαβ(I)

+

-

Aβ(II)

-

+

Bα(III)

+

+

ABє(IV)

  1. Определение резус-фактора

Первый антиген этой системы Rh(D), названный резус-фактором, был открыт в эритроцитах человека в 1939 г. американским ученым Винером с помощью сыворотки кроликов, иммунизированных эритроцитами обезьян макак-резус. Резус-фактор присутствует в крови 85% людей; 15% лиц этого фактора не содержит. Анализ антител, проявляющихся в крови людей, перенесших посттрансфузионные осложнения или иммунологически несовместимые беременности, привел к открытию других антигенов этой систе­мы, называемых разновидностями резус-фактора.

Номенклатура и генетика. Система антигенов резус пред­ставлена 6 антигенами, которые, как и другие групповые при­знаки крови человека, передаются по наследству и в течение жизни не меняются. В отечественной и зарубежной литературе одинаково широко используют две номенклатуры указанных ан­тигенов: Винера и Фишера-Рейса, последняя выделена скобками Rho(D), rh'(C), rh"(E), Hro(d), hr'(c), hr"(e).

Биохимия резус-антигенов. Антигены резус относятся к липопротеидам. Они нерастворимы в воде, легко разрушаются под действием высокой температуры и высушивания.

Значение антигенов системы резус при переливании крови в клинической практике неодинаково. Наиболее важными из них являются три антигена Rho(D), rh'(C), rh"(E), обладающие наи­большей иммуногенной активностью. Установлено, что у резус-отрицательных лиц в результате переливания им резус-положительной крови или при повторных беременностях резус-положительным плодом могут появляться резус-антитела. На од­нократную трансфузию 400 мл резус-положительной крови око­ло 50% резус отрицательных реципиентов реагируют выработкой резус-антител. При повторном переливании резус-положительной крови таким лицам возникают тяжелые осложнения, сопровож­дающиеся внутрисосудистым гемолизом перелитых эритроцитов. Более 90% посттрансфузионных осложнений, обусловленных ре­зус-несовместимостью донора и реципиента, связаны с разновид­ностью резус-фактора Rho(D).