2) Определение групп крови по стандартным изогемагглютинирующим сывороткам и стандартным эритроцитам (перекрестный способ).

Способ наиболее часто используется в серологических лабораториях. Суть метода состоит в определении наличия или отсутствия в иссле­дуемой крови групповых антигенов А и В с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток, я также групповых антител α и β с по­мощью стандартных эритроцитов. Это дает полную серологическую характеристику крови.

Реакция со стандартными эритроцитами проводится следующим образом.

а) Необходимое оснащение

• Оснащение для реакции со стандартными эритроцитами отлича­ется тем, что для реакция агглютинации необходимы стандарт­ные эритроциты трех групп крови: 0(1), А (II), В(Ш).

• Стандартные эритроциты приготавливают из крови доноров с за­ранее известной группой крови, хранят при 4-8°С. Срок годности 2-3 дня.

б) Техника проведения реакции

1. Кровь для исследования берут из вены в сухую пробирку, центрифуги­руют или оставляют в покое на 20-30 минут для разделения на сыво­ротку и эритроциты.

2. На маркированную тарелку пипеткой в шесть ячеек наносят по од­ной большой капле сыворотки исследуемой крови из пробирки (0,1мл), а рядом с ними -по одной маленькой капле (0,01мл) стан­дартных эритроцитов групп 0(1), А(П), В(Ш) (по две серии).

3. Дальнейшие мероприятия проводятся аналогично методу с использо­ванием стандартных изогемагглютинирующих сывороток: соответ­ствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет по­качивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют изотонический раствор хлорида натрия, после чего оцени­вают результат. Реакция со стандартными сыворотками проводится описанным выше способом параллельно с реакцией со стандартными эритроцитами.

в) Трактовка результатов

Наличие агглютинации при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками следующих групп				Наличие агглютинации при реакции со стандартными эритроцитами следующих групп			Группа крови
O(I)	A(II)	B(III)	AB(IV)	O(I)	A(II)	B(II)
-	-	-		-	+	+	Oαβ(I)
+	-	+		-	-	+	Aβ(II)
+	+	-		-	+	-	Bα(III)
+	+	+	-	-	-	-	ABє(IV)

Особенность трактовки результатов реакции со стандартными эритроцитами является то, что эритроциты группы 0(1) являются контрольны­ми (в них нет антигенов, что делает принципиально невозможной специфическую реакцию агглютинации с любой сывороткой). Результат перекрестного способа считается достоверным, только если при оценке результатов реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают. Если этого не происходит, обе реакции сле­дует переделать.