- •(Экспериментальное исследование)
- •Список сокращений и аббревиатур, использованных в работе
- •Глава 1. Перспективы применения ксеногенной ткани селезенки для коррекции постспленэктомических нарушений (обзор литературы) 10
- •Глава 2. Материалы и методы исследования 25
- •Глава 3. Получение криоконсервированных клеток селезенки свиньи для ксенотрансплантации 41
- •Глава 4. Морфофункциональная оценка эффективности ксенотрансплантации клеток селезенки как способа коррекции индуцированного гипоспленизма 55
- •Глава 5. Изменения гомеостаза в условиях постсплен-эктомического гипоспленизма, корригированного ксенотрансплантацией клеток селезенки 79
- •Введение
- •Глава 1. Перспективы применения ксеногенной ткани селезенки для коррекции постспленэктомических нарушений (обзор литературы)
- •Проблема постспленэктомического гипоспленизма
- •1.1.1. Клинико-лабораторные проявления синдрома постспленэктомического гипоспленизма
- •1.1.2. Способы профилактики и коррекции гипоспленических послеоперационных расстройств
- •Ксенотрансплантация свиных органов и тканей
- •1.3. Технология получения материала для ксенотрансплантации
- •Глава 2. Материалы и методы исследования
- •2.1 Общая характеристика экспериментального материала
- •2.2. Характеристика методов исследования
- •2.2.1. Техника оперативных вмешательств
- •2.2.1.1. Ложная операция
- •2.2.1.2. Спленэктомия
- •2.2.1.3. Экстраперитонеальная аутотрансплантация селезенки
- •2.2.1.4. Ксенотрансплантация клеток селезенки
- •2.2.2.Приготовление препаратов для ксенотрансплантации
- •2.2.2.1. Получение взвеси клеток селезенки
- •2.2.2.2. Приготовление питательной среды для инъекции
- •2.2.2.3 Ранотензиометрия
- •2.2.3. Методы лабораторного контроля
- •2.2.3.1.Определение биохимических показателей сыворотки крови
- •2.2.3.3. Исследование показателей системы гемостаза
- •2.2.3.4 Иммунологические методы исследований
- •2.2.3.5 Общеклиническое исследование крови
- •2.2.3.6 Бактериологические методы исследований
- •2.2.4. Методы морфологического исследования
- •2.3.Методы статистической обработки
- •Глава 3. Получение криоконсервированных клеток селезенки свиньи для ксенотрансплантации
- •3.1.Технология выделения клеток селезенки
- •3.1.1 Дезагрегация ткани селезенки
- •3.1.2. Оптимизация рН среды для культивации клеток
- •3.1.3 Культивирование клеток селезенки новорожденной свиньи
- •3.2.Консервация клеток
- •3.2.1. Приготовление среды для криоконсервации
- •3.3. Получение препарата и ксенотрансплантация
- •Глава 4. Морфофункциональная оценка эффективности ксенотрансплантации клеток селезенки как способа коррекции индуцированного гипоспленизма
- •4.1 Развитие постспленэктомического гипоспленизма в ходе эксперимента
- •4.2 Летальность в экспериментальных группах
- •4.2.1. Патоморфологическое исследование погибших животных
- •4.3. Морфологическая оценка эффектов трансплантации ткани селезенки в условиях гипоспленизма
- •4.3.1 Исследование структуры печени
- •4.3.2.Исследование структуры легких
- •4.4. Морфологическое исследование зон трансплантации
- •4.5. Результаты ранотензиометрических исследований
- •Глава 5. Изменения гомеостаза в условиях постсплен-эктомического гипоспленизма, корригированного ксенотрансплантацией клеток селезенки
- •5.1. Лабораторная оценка раннего гепатопротекторного эффекта ксенотрансплантации культуры клеток селезенки
- •5.2. Влияние ксенотрансплантации клеток селезенки на белково-синтетическую функцию печени в раннем послеоперационном периоде
- •5.3. Изменения неспецифической резистентности организма у аспленизизированных животных под воздействием ксенотрансплантации клеток селезенки в раннем послеоперационном периоде
- •5.4. Влияние ксенотрансплантации клеток селезенки на систему гемостаза в раннем периоде после индукции гипоспленизма
- •Заключение
- •Практические рекомендации
- •Список использованной литературы
4.5. Результаты ранотензиометрических исследований
В связи с высокой летальностью среди аспленизированных крыс на второй неделе послеоперационного периода, ранотензиометрия во всех группах проведена на 7-е сутки эксперимента. Полученные результаты представлены в табл. 4.5.
Таблица 4.5
Результаты ранотензиометрии (медиана, нижний и верхний квартили)
Экспериментальная группа |
Усилие растяжения, г |
рОГ-1 |
рОГ-2 |
рКГ-1 |
рКГ-2 |
рКГ-3 |
ОГ-1 (n=6) |
75,0 (66,2-83,8) |
- |
0,005 |
0,004 |
0,004 |
0,631 |
ОГ-2 (n=6) |
40,0 (28,5-51,5) |
0,005 |
- |
0,936 |
0,471 |
0,004 |
КГ-1 (n=6) |
38,3 (30,4-46,2) |
0,004 |
0,936 |
- |
0,471 |
0,004 |
КГ-2 (n=6) |
35,0 (29,3-40,7) |
0,004 |
0,471 |
0,471 |
- |
0,004 |
КГ-3 (n=6) |
78,3 (70,4-86,2) |
0,631 |
0,004 |
0,004 |
0,004 |
- |
Примечание: значимость различий определена с помощью критерия Манна-Уитни.
Усилие растяжения раны было максимальным у крыс ОГ-1 и КГ-3 (межгрупповые различия не значимы) и статистически значимо отличалось от показателей, определенных для животных ОГ-2 (0,004-0,005), КГ-1 (0,004) и КГ-2 (0,004). Статистически значимых различий при сравнении ОГ-2, КГ-1 и КГ-2 не выявлено. Таким образом, КТ ККС существенно улучшает механическую прочность раны (этот показатель в ОГ-1 не отличается от определенного у ложнооперированных).
Резюме
Результаты, приведенные в настоящей главе, свидетельствуют об эффективной коррекции раннего СПГ путем КТ ККС. Как было показано с помощью морфологической оценки изменений в выбранных органах системы фагоцитирующих мононуклеаров, в наибольшей степени страдающих от патологических процессов, индуцированных аспленизацией, введение ксеногенной ККС оказывает выраженный протекторный эффект, а при морфометрическом анализе печени выявлены положительные сдвиги, даже более выраженные, чем у ложнооперированных крыс. С этими данными следует связать и результаты ранотензиометрии, свидетельствующие о нормализации механической прочности раны под влиянием КТ ККС.
Указанные факты послужили основанием для исследования некоторых параметров гомеостаза, изменение которых ожидаемо при развитии постспленэктомического гипоспленизма. Кроме того, нас интересовали лабораторные проявления реакции отторжения трансплантатов, как закономерное следствие КТ (морфологических эквивалентов этой реакции нами не выявлено). Эти результаты будут рассмотрены в следующей главе.
Глава 5. Изменения гомеостаза в условиях постсплен-эктомического гипоспленизма, корригированного ксенотрансплантацией клеток селезенки
Исходя из результатов, полученных при сравнительном исследовании летальности и морфологических изменений в печени у гипоспленических животных, мы предположили, что саногенные эффекты ксенотрансплантации клеток селезенки реализуются, в частности, уменьшением цитолитического повреждения печени и стимуляцией ее белково-синтетической функции. Обратимся к результатам проверки этой гипотезы.