4.2.1. Патоморфологическое исследование погибших животных

При морфологическом исследовании печени погибших на 5-6 сутки крыс групп ОГ-2, КГ-2, 6 сутки в КГ-1 отмечали повреждения гепатоцитов с очагами некрозов (более 1/3 площади среза) и лейкоцитарной инфильтрацией, участки дискомплексации балочных структур. Наиболее выраженные изменения были обнаружены на светооптическом уровне в зоне портальных трактов (рис.4.2).

Рис.4.2. Изменение структуры печени погибшей на 5 сутки аспленизированной крысы. 1- очаги некроза гепатоцитов и лейкоцитарная инфильтрация. Окраска гематоксилином и эозином. Об. 40^х , Ок. 10^х.

 

У всех крыс, погибших на 7 сутки (ОГ-2, КГ-1, КГ-2), при исследовании структуры печени отмечены изменения, аналогичные наблюдаемым у погибших на 5 сутки. Морфологические изменения в печени крыс, погибших на 8 сутки в ОГ-2, КГ-1, КГ-2 и на 9 сутки в КГ-2, были представлены мелкоочаговыми некрозами, поврежденными гепатоцитами (до 1/3 площади среза), около некротически измененных гепатоцитов наблюдались скопления нейтрофилов. У погибших крыс в ОГ-1 на 8-9-е сутки в печени отмечали повреждение структуры гепатоцитов с очагами некроза и лейкоцитарной инфильтрацией до 1/3 площади среза. На 10-е сутки у погибших крыс в ОГ-1 и КГ-1 отмечали изменения в печени, аналогичные изменениям у погибших ранее в этой группе. Морфологические изменения в печени крыс погибших на 13-15 сутки в КГ-2 были представлены мелкоочаговыми некрозами, поврежденными гепатоцитами (до 1/3 площади среза) и лейкоцитарной инфильтрацией в зоне портальных трактов. Таким образом, складывалось впечатление, что у животных, погибших в более поздние сроки после операции, изменения в печени были менее выраженными по сравнению с погибшими на 5-7 сутки.

Признаков перитонита или внутрибрюшинного кровотечения не выявлено ни в одном наблюдении.

Морфологические изменения в легких крыс, погибших на 5-е сутки после аспленизации, проявлялись слабовыраженной межуточной пневмонией. Наблюдали утолщение межальвеолярных перегородок с инфильтрацией паренхимы лимфоцитами, макрофагами, сегментоядерными лейкоцитами, что отнесено нами к воспалительным изменениям первой степени (1 балл) - рис. 4.3А. У всех животных, погибших на 7 сутки (ОГ-2, КГ-1, КГ-2), признаки межуточной пневмонии были более выраженными, чем на 5 сутки. Отмечено появление некротических очагов с лейкоцитарной инфильтрацией по периферии (2 балла) - рис. 4.3Б. При заборе материала у крыс, погибших на 8-9 сутки после операции, при аутопсии в ткани легкого отмечали наличие абсцессов (рис. 4.3В). При световой микроскопии обнаруживали выраженную межуточную пневмонию с массивными очагами некрозов и участками абсцедирования (3 балла) - рис. 4.3Г.

Рис.4.3 Воспалительные изменения в легких крыс, погибших после аспленизации. А – смерть на 5-е сутки. Межуточная пневмония - 1 балл. 1- участки расширения межальвеолярных перегородок. Б – смерть на 7-е сутки после аспленизации. Межуточная пневмония - 2 балла. 1 - участки расширения межальвеолярных перегородок. 2- просвет бронха. В – макроскопическая картина (смерть на 9-е сутки). 3 - абсцесс легкого. Г – смерть на 8-е сутки. Абсцесс в легком. Межуточная пневмония - 3 балла. Эмфизема. 3 -абсцесс легкого, 4 - расширенные альвеолы, 5 - измененная легочная паренхима. А,Б, Г - окраска гематоксилином и эозином. Об. 4^х , Ок. 10^х.

 

Представленные данные свидетельствуют об увеличении воспалительных повреждений легочной ткани у крыс, погибших в более поздние сроки (8-9-е сутки послеоперационного периода), по сравнению с умершими на 5-6 сутки. Выше мы сообщили, что в отношении воспалительных изменений печени наблюдалась обратная закономерность.

Лишь в одном случае у погибшей на 5-е сутки крысы КГ-1 структура гепатоцитов была сохранена, структура балок и печеночных долек не нарушена, а в легких наблюдали массивные очаги межуточной пневмонии с участками некроза и абсцедированием (3 балла). Во всех остальных наблюдениях проявлялась указанная динамика воспалительных изменений в печени и легких.

Результаты статистической обработки обсуждаемых морфологических данных представлены в табл. 4.2.

Таблица 4.2

Балльная морфологическая оценка воспалительных изменений в печени и легких погибших крыс (средние значения)

 

Орган	Сутки	ОГ-1	ОГ-2	КГ-1	КГ-2
Печень	5-6 сут	-	2,0 n=2	1,6 n=5	2,0 n=6
	7-8 сут	1,0 * n=2	1,8 n=11	1,2 * n=5	1,7 ¨ n=10
	9-15 сут	1,0 n=5	-	1,0 n=2	1,0 · n=14 ··
Легкое	5-6 сут	-	1,0 n=2	1,4 n=5	1,0 n=6
	7-8 сут	2,0 n=2	2,2 n=11	2,8 * n=5	2,3 · n=10
	9-15 сут	2,6 n=5	-	3,0 n=2	3,0 ¨ · n=14 ··

Примечание: * - значимые различия по сравнению с ОГ-2 (р_U<0,05); ¨- значимые различия по сравнению с ОГ-1 (р_U<0,05); · - значимые различия при сравнении с показателем в той же группе на 5-6 сутки (р_W <0,05); ·· - значимые различия при сравнении с показателем в той же группе на 7-8 сутки (р_W <0,05).

 

При сравнительном анализе установлено, что у крыс, погибших на 7-8 сутки в ОГ-1, выраженность воспалительных изменений в печени была существенно ниже, чем в ОГ-2 и КГ-2 (1,0 балла против 1,8 и 1,7 балла; p_U=0,03 и 0,01 соответственно). Следует отметить, что в ОГ-2 патологические изменения в те же сроки были более выраженными по сравнению с КГ-1 (1,8 балла против 1,2 балла; p_U=0,02).

При внутригрупповом сравнении результатов патоморфологического исследования ткани печени животных, погибших на 5-6, 7-8 и 9-15 сутки эксперимента, статистически значимые различия определены лишь в КГ-2: при аутопсии на 9-15 сутки изменения в печени были существенно менее выраженными по сравнению с погибшими на 5-6 и 7-8 сутки (1,0 балла против 2,0 и 1,7 балла; p_W=0,03 и 0,02 соответственно). При бактериологическом исследовании ткани легкого и смыва с плевральной полости у погибших крыс находили ассоциацию Streptococcus pneumoniae и Staphylococcus aureus.

При сравнительном анализе степени легочных повреждений статистически значимые различия определены у крыс, погибших в ОГ-2 и КГ-1 на 7-8 сутки эксперимента (2,2 балла против 2,8 балла; p_U=0,02), а также у погибших на 9-15 сутки в ОГ-1 и КГ-2 (2,6 балла против 3,0 баллов; p_U=0,01). У животных КГ-2 воспалительные изменения в легких при гибели на 9-15 сутки были существенно более выражены, чем у умерших на 5-6 и 7-8 сутки (3,0 балла против 1,0 балла и 2,3 балла; p_W=0,03 и 0,02 соответственно). Также отмечены внутригрупповые различия у погибших на 5-6 и 7-8 сутки (1,0 балла против 2,3 балла; p_W=0,03).

Представленные данные свидетельствуют о смене приоритетности поражений исследованных внутренних органов у погибших аспленизированных крыс. Таким образом, у животных, погибших на 5-6 сутки, доминировало поражение печени, в то время как в более поздние сроки преобладали воспалительные повреждения легочной паренхимы.

Проведенный непараметрический корреляционный анализ выявил статистически высокозначимую отрицательную корреляцию степени повреждений паренхимы печени со сроками гибели животных (r_S=-0,66; p<<0,0001) и тесную положительную корреляцию воспалительных изменений в легких со сроками гибели (r_S= 0,77; p<0,0001).

Полученные результаты побудили нас исследовать морфологию печени и легких у выживших животных. Рассмотрим результаты этого фрагмента исследования.