38. Система резус-фактора. Особенности системы (механизм иммунологического Rh-конфликта).

Ответ. Резус-фактор, или резус, Rh — одна из 43 систем групп крови, признаваемых Международным обществом трансфузиологов (ISBT). Клинически наиболее важная система после системы AB0. Система резус-фактора состоит из групп крови, определяемых 59 антигенами, кодируемыми более чем 200 аллелями. Наибольшее практическое значение для медицины имеют обладающие повышенными иммуногенными свойствами антигены: D, C, c, E, e. Часто используемые термины «резус-положительный» и «резус-отрицательный» относятся только, соответственно, к наличию или отсутствию антигена Rho(D), обладающего наибольшей иммуногенностью. Помимо своей роли в переливании крови, группы крови системы резус-фактора, в частности антиген Rho(D), является важной причиной гемолитической желтухи новорождённых или эритробластоза плода; для предотвращения этих заболеваний ключевым фактором является профилактика резус-конфликта. Риск резус-конфликта при беременности возникает у пар с резус-отрицательной матерью и резус-положительным отцом. Группы крови системы резус-фактора встречаются у разных народностей и в разных регионах с разной частотой. Например, среди людей европеоидной расы резус-положительными являются около 85 %. В отличие от системы группы крови AB0, в системе резус-фактора генами кодируются только антигены, при этом антиген представляет собой мембранный липопротеин. Антитела же появляются как иммунный ответ организма при введении крови, содержащей антиген, в организм человека, не содержащей этот антиген, в том числе при трансплацентарном попадании антигена, и относятся к IgM (при первичном резус-конфликте) и IgG (при повторных случаях). Существуют задокументированные случаи отсутствия у людей Rh-антигенов. Всего в мире насчитывается около 50 человек с Rhnull — «отсутствующим» резус-фактором (из-за отсутствия Rh-антигенов (Rh или RhAG) в их кровяных клетках). Вследствие этого в данных кровяных клетках отсутствуют антигены LW и Fy5, а также слабо проявляются антигены S, s, и U. Такая кровь может в редких случаях передаться по наследству, однако, как правило, является результатом двух совершенно случайных мутаций. Около 9 человек в мире являются донорами крови с данным резус-фактором. Резус-фактор может определяться: методом агглютинации в солевой среде; методом конглютинации в желатине; непрямой пробой Кумбса; реакцией с aнти-D-моноклональными антителами (цоликлонами); генотипированием. Резус-конфликт наблюдается при переливании крови Rh-положительного донора Rh-отрицательному реципиенту или у Rh-положительного плода, вынашиваемого Rh-отрицательной матерью (плод плод может унаследовать Rh-фактор от Rh-положительного отца). При проникновении больших количеств Rh-фактора плода в кровь матери в ней могут образовываться антитела, которые, проникая через плаценту в кровь плода, вызывают гемолиз эритроцитов, что впоследствии может привести к гемолитической болезни новорожденных, а иногда и к внутриутробной гибели плода. Гемолитическая болезнь новорождённых (ГБН) — патологическое состояние новорождённого, сопровождающееся массивным распадом эритроцитов, является одной из основных причин развития желтухи у новорождённых. Гемолиз происходит из-за иммунологического конфликта матери и плода в результате несовместимости крови матери и плода по группе крови или резус-фактору. В результате компоненты крови плода становятся для матери чужеродными агентами (антигенами), и в ответ на них вырабатываются антитела. Антитела проникают через гематоплацентарный барьер, атакуя компоненты крови плода, в результате чего уже в первые часы после рождения у ребёнка начинается массированный внутрисосудистый гемолиз эритроцитов. Порядок определения резус-фактора. Кровь для исследования берется из пальца непосредственно перед исследованием (можно использовать консервированную кровь без предварительной обработки), а также эритроциты из пробирки после образования сгустка и отстаивания сыворотки. Капля стандартной антирезусной сыворотки для экспресс-метода наносится на дно пробирки. Туда же добавляется капля исследуемой крови. Осторожными движениями необходимо добиться, чтобы образовавшийся раствор растекся по стеклу пробирки. Через 3 минуты после внесения эритроцитов добавляется 2-3 мл физиологического раствора. Пробирка осторожно переворачивается 3 раза, после чего считывается результат: Rh+ - при наличии агглютинатов на фоне просветленной жидкости; Rh- - при гомогенно окрашенной жидкости (отсутствие агглютинации). Определение Rh-принадлежности цоликлонами. Чтобы узнать резус-фактор, применяют моноклональные реагенты – цоликлоны, которые получают методом генной инженерии из асцитной жидкости мышей. Rh определяется во время реакции агглютинации, которая происходит на плоскости. Алгоритм действий. На планшет индивидуальной пипеткой капают большую каплю реагента (примерное количество – 0,1 мл). Около реагента капают исследуемую кровь (маленькую каплю) или эритроциты в количестве 0,01 мл. С помощью стеклянной палочки как следует смешивают реагент и кровь и каждые 30 секунд тарелку покачивают в течение трех минут, наблюдая за реакцией визуально. Реакция агглютинации начинается через 15 секунд, явно выраженной становится через 1 минуту, но результат учитывают только спустя три минуты. Если началась реакция агглютинации (склеивание эритроцитов и выпадение их в осадок), кровь маркируют резус-положительной, если слипания красных клеток не наблюдается, резус-фактор отрицательный. Склеенные эритроциты, которые представляют собой хлопья, видны.