- •Введение
- •Оформление работы:
- •1. Дата.
- •2. Тема: номер и название работы.
- •Организация учебного процесса по биохимии
- •Правила техники безопасности при работе в биохимической лаборатории
- •Тема 1. Реакция среды
- •Работа 1. Определение реакции среды молока и яйца с помощью универсальной индикаторной бумаги
- •Работа 2. Определение реакции среды бесцветных растворов с помощью прибора Михаэлиса
- •Работа 3. Определение рН гомогената мышечной ткани, раствора яичного белка с помощью прибора Михаэлиса Приготовление гомогената из тканей животных
- •Ход опыта
- •Лучи света
- •Матовое стекло
- •Работа 4. Определение рН растворов и биологического материала электрометрическим (потенциометрическим) методом
- •Вопросы для самоподготовки по теме 1
- •Тема 2. Буферные системы
- •Работа 5. Приготовление ацетатного буферного раствора и изучение зависимости величины рН от соотношения компонентов
- •Работа 6. Изучение действия на буферный раствор небольшого количества кислоты
- •Работа 7. Изучение действия на буферный раствор большого количества кислоты
- •Работа 8. Изучение действия небольшого количества щелочи на буферный раствор
- •Работа 9. Изучение действия на буферный раствор большого количества щелочи
- •Работа 10. Влияние разбавления водой буферного раствора на величину его рН
- •Вопросы для самоподготовки по теме 2
- •Тема 3. Коллоидные растворы
- •Работа 11. Получение гидрофобного коллоидного раствора гидроксида железа Fe(oh)3.
- •Работа 13. Диализ коллоидных растворов
- •Работа 14. Изучение механизма коагуляции золя железа
- •Работа 15 . Изучение защитного действия гидрофильных коллоидов (эмульсоидов)
- •Вопросы для самоподготовки по теме 3
- •Tеma 4. Адсорбция и абсорбция
- •Работа 16. Адсорбция органических красок животным углем
- •Работа 17. Определение количества уксусной кислоты, адсорбированной животным углем
- •Вопросы для самоподготовки по теме 4
- •Тема 5. Химия и обмен белков
- •Работа 18. Определение количества белка в гомогенате мышечной ткани, яйце рефрактометрическим методом
- •Работа 19. Определение белка по методу Лоури
- •Работа 20. Разделение смеси аминокислот методом распределительной хроматографии на бумаге
- •Работа 21. Определение количества аминокислот в биоматериале по азоту аминогрупп методом формольного титрования по Серенсену
- •Работа 22. Изучение действия пепсина на переваривание белка
- •Вопросы для самоподготовки по теме 5
- •Тема 6. Ферменты (энзимы)
- •Работа 23. Приготовление раствора фермента -амилазы (кф 3.2.1. 1) слюны
- •Работа 24. Обнаружение в слюне амилазы и определение специфичности ее действия
- •Работа 25. Изучение влияния рН среды на активность амилазы слюны
- •Работа 26. Изучение влияния температуры на активность энзимов
- •Работа 27. Изучение действия активаторов и ингибиторов на активность ферментов
- •Вопросы для самоподготовки по теме 6
- •Тема 7. Углеводы и их обмен
- •Работа 28. Изучение механизма переваривания углеводов и определение активности -амилазы (кф 3.2.1.1.) слюны
- •Работа 29. Обнаружение гликогена в тканях животных
- •Вопросы для самоподготовки по теме 7
- •Тема 8. Липиды и их обмен
- •Работа 30. Изучение растворимости жира
- •Работа 31. Определение кислотного числа жира
- •Работа 32. Определение йодного числа.
- •Работа 33. Исследование эмульгирования жира
- •Работа 34. Изучение механизма переваривания липидов и определение активности панкреатической липазы (кф 3. 1. 1. 3)
- •Работа 35. Реакция обнаружения холестерола в растительном и животном маслах.
- •Вопросы для самоподготовки по теме 8
- •Тема 9. Витамины
- •Работа 36. Обнаружение витамина а в жире
- •Работа 37. Обнаружение витамина д в жире
- •Работа 38. Обнаружение витамина с в биоматериале
- •Вопросы для самоподготовки по теме 9
- •Тема 10. Минеральные вещества и вода
- •Работа 39. Определение количества кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани по де Ваарду
- •Работа 40. Определение содержания кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани комплексонометрическим методом
- •Работа 41. Определение количества неорганического фосфора в молоке и гомогенате мышечной ткани
- •Вопросы для самоподготовки по теме 10
- •Тема 11. Молоко
- •Работа 42. Определение общей кислотности молока по Тернеру
- •Работа 43 Выделение казеиногена из молока и исследование его свойств.
- •Работа 44. Определение редуктазы молока
- •Работа 45. Определение количества лактозы в молоке с помощью рефрактометра
- •Вопросы для самоподготовки по теме 11
- •Рекомендуемая литература.
Работа 11. Получение гидрофобного коллоидного раствора гидроксида железа Fe(oh)3.
Получение гидрозоля протекает по уравнению:
F eCl3 + 3H2O Fe (OH)3 + 3HCl (гидролиз)
Гидроксид железа нерастворим в воде. Образующиеся молекулы Fe(OH)3 конденсируются, слипаясь друг с другом и формируя коллоидные частицы размером в диаметре от 1 до 150 нм.
Поверхностные молекулы агрегата Fe(OH)3 вступают в химическое взаимодействие с НСl:
Fe (OH)3 + HCl = FeOCl + 2H2O.
Молекулы FeOCl являются электролитом стабилизатором и диссоциируют на ионы FeO+ выполняющие роль потенциалопределяющих ионов и ионов Cl-, являющихся противоионами.
n FeOCl FeO ++ Cl-.
Строение мицеллы гидрозоля гидроксида железа можно представить следующей схемой:
{m[Fe (OH)3] n FeO+ (n-x)Cl-}X+ Cl-
Наличие заряда на поверхности мицеллы препятствует дальнейшему слипанию частиц и выпадению их в осадок. Заряд мицеллы определяется внутренним ионным слоем.
Ход опыта
Налить в колбочку 40 мл дистиллированной воды, нагреть до кипения на спиртовке или электроплитке и влить в нее 4 мл 2% истинного (ионно-дисперсного)раствора FeCl3. Образуется красно-коричневый золь железа. Нагревание прекращают.
Задание: 1. Выполнить опыт, получить золь железа.
2. Написать последовательно реакции, приводящие к образо- ванию коллоидного раствора гидроксида железа из НОН и ионов истинного раствора FeCl3.
3. Изобразить схему строения сформировавшейся коллоидной частицы, указав ее составляющие: ядро, ионный и диффузный слои.
4. Сделать вывод, как возникает заряд на коллоидных части- цах гидроксида железа, какова его роль.
Работа 12. Получение гидрофильного коллоидного раствора
белка
При образовании коллоида из белка происходит обыкновенное растворение последнего в воде. При этом видимые невооруженным глазом частицы белка (кристаллы), состоящие из большого числа молекул, под действием воды исчезают, превращаются в невидимые вследствие их дробления (дисперсионный метод) на отдельные молекулы. Последние вступают с водой в органическую связь и становятся гидрофильными коллоидными частицами.
Ход опыта
В пробирку налить 5 мл воды (t = +40-50°C), опустить в нее маленький кусочек белка желатина (можно использовать также бычий альбумин, казеин и яичный белок) и, периодически встряхивая, растворить его. Раствор использовать в работе 13.
Задание: 1. Выполнить опыт, получить коллоидный раствор белка желатина, яичного белка
2. Написать реакцию электролитической диссоциации желатина и яичного белка (считая, например, что это кислый белок), приводящую к образованию коллоидной частицы.
3. Указать, как возникает заряд на коллоидных частицах и какова его роль.
4. Написать схему строения гидрофильной коллоидной частицы. (макромолекулы)
Работа 13. Диализ коллоидных растворов
Диализ — это очистка коллоидов от примесей с помощью ППМ. Он основан на том, что коллоидные частицы через ППМ не проходят, так как они в диаметре больше ее пор, а все остальные (ионы), имеющие диаметр меньше 1 нм, проходят. Поэтому, используя ППМ, как молекулярное сито, вымывают из коллоида, с помощью ее и многократно меняемой воды, посторонние частицы.
Ход опыта
Около 2 мл золя железа из работы 10 налить в целлофановый мешочек и опустить его в мензурку с 5 мл дистиллированной воды.
Аналогичное проделать с раствором желатина из работы 12. Через 30 - 40 мин мешочки вынуть из мензурок.
В 1-ю мензурку добавить 2 капли 1% раствора AgNO3 (аналогичный анализ проделать с дистиллированной водой - контрольная проба на ион Сl-).
Во 2-ю мензурку и оставшуюся с раствором желатина пробирку (контроль) прилить по 5 мл 20% раствора NaOH и по 2 капли 1% раствора CuSO4 (реактивы биуретовой пробы на белок). Растворы осторожно взболтать. Образовавшаяся красно-фиолетовая окраска свидетельствует о наличии белка в жидкости.
Задание: 1. Зарисовать диализатор, обозначив его состав- ляющие.
2. Отметить, появляетсяли красно-коричневое окрашива-ние воды в 1-й мензурке. Если нет, то почему?
3. Отметить, какая проба на ионы С1- в 1-й мензурке. Если положительная, то объяснить, почему.
4. Написать реакцию ионов С1- с Аg+.
5. Отметить, какова биуретовая реакция во 2-й мензурке (сравнить ее с контролем). Если отрицательная, то почему? Объяснить.